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文档简介

1、动物细胞工程练习教师版(20分钟50分)1.(12分)如图所示为动物细胞培养过程中,动物细胞增殖情况的变化曲线(图中B、D两点表示经筛选后继续培养)。据图回答问题。(1)OA段的培养称为培养,AB段可能发生了现象。(2)动物细胞培养和植物组织培养过程中,就细胞增殖、分化来说,动植物细胞都要进行,不同的是植物细胞还要进行。(3)为制备单克隆抗体,需将注射到小鼠体内,以获取细胞,同时可选取图中点的细胞与该细胞融合形成杂交细胞,所选取的细胞,其细胞膜上的比正常细胞显著减少,为筛选能够产生单克隆抗体的杂交细胞,可用培养基达到目的。【解析】(1)动物细胞培养的初次培养称原代培养,分瓶后的培养称传代培养;

2、当动物细胞相互接触时,会发生接触抑制现象。(2)动植物细胞培养都必然发生细胞增殖,从而使细胞数目增多;另外,植物组织培养一般都会发生脱分化和再分化的过程。(3)制备单克隆抗体时,需要将产生单一抗体的B淋巴细胞与能够无限增殖的细胞杂交。欲获得B淋巴细胞必须先注射抗原,检测到有相应抗体的存在才可以提取到相应的B淋巴细胞,而癌细胞表面的糖蛋白减少,黏着性降低,近似球形,易于扩散。筛选一般用选择性培养基来进行。答案:(1)原代接触抑制(2)增殖或分裂脱分化和再分化(3)抗原B淋巴D糖蛋白选择性【知识总结】原代培养与传代培养(1)原代培养:细胞悬液第一次在瓶中培养,没有分瓶培养之前的细胞培养。(2)传代

3、培养:原代培养的细胞生长、繁殖一定时间后,由于空间不足或细胞密度过大导致营养枯竭,影响细胞的生长,因此需要重新用胰蛋白酶等处理,进行分瓶扩大培养,即传代培养。2.(15分)(2015·银川模拟)下图为利用生物技术制备单克隆抗体的实验探究。请回答问题:(1)图中过程导入的诱导基因的作用是。实现过程所需的工具酶是。(2)图中过程属于,其实质是。(3)图中过程属于技术,该过程的实现通常采用作为诱导剂。(4)丙细胞所具有的特点是。(5)与普通培养基相比,图中用于细胞培养的培养液需加入等。【解析】(1)从图中可以看出,导入诱导基因的目的是诱导小鼠成纤维母细胞形成干细胞。过程为基因工程,所需的工

4、具酶是限制酶和DNA连接酶。(2)分析题图,经过过程,干细胞转化为造血干细胞、脂肪细胞、骨细胞等多种细胞,因此属于细胞分化的过程,细胞分化的实质是基因的选择性表达。(3)过程为动物细胞融合过程,该过程常用的诱导剂是灭活的病毒等。(4)丙细胞有甲、乙两种细胞的特点,即既能无限增殖,又能分泌单一的抗体。(5)用于动物细胞培养的培养液中需要加入动物血清等。答案:(1)诱导小鼠成纤维母细胞形成干细胞限制酶和DNA连接酶(2)细胞分化基因选择性表达(3)细胞融合灭活的病毒(聚乙二醇)(4)既能无限增殖,又能分泌单一的抗体(5)动物血清3.(12分)(2013·海南高考)单纯疱疹病毒型(HSV-

5、1)可引起水泡性口唇炎。利用杂交瘤技术制备出抗HSV-1的单克隆抗体可快速检测HSV-1。回答下列问题:(1)在制备抗HSV-1的单克隆抗体的过程中,先给小鼠注射一种纯化的HSV-1蛋白,一段时间后,若小鼠血清中抗的抗体检测呈阳性,说明小鼠体内产生了反应,再从小鼠的中获取B淋巴细胞。将该B淋巴细胞与小鼠的细胞融合,再经过筛选、检测,最终可获得所需的杂交瘤细胞,该细胞具有的特点是。(2)若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体,可将该杂交瘤细胞注射到小鼠的中使其增殖,再从中提取、纯化获得。(3)通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识别这种HSV-1蛋白,其原因是该抗体具有和等特性。【解题指南】解答本题时

6、需关注以下两点:(1)明确产生单克隆抗体的细胞既需要无限增殖,又能大量产生单一抗体的特点。(2)理解单克隆抗体的制备过程。【解析】本题考查单克隆抗体的制备过程、单克隆抗体的特点。(1)给小鼠注射HSV-1蛋白后,小鼠体内发生体液免疫,小鼠血清中产生抗HSV-1蛋白的抗体。B淋巴细胞是从小鼠的淋巴器官(如脾、骨髓、扁桃体、胸腺等)中获取。杂交瘤细胞由B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合而来,具有两个亲本细胞的特性:既能无限增殖,又能产生特异性抗体。(2)若想获得大量单克隆抗体,通常有两种方法:一是将杂交瘤细胞在动物细胞培养液中培养,然后从动物细胞培养液中筛选分离出单克隆抗体;二是将杂交瘤细胞注射到小鼠的腹

7、腔中使其增殖,然后从小鼠的腹水中提取纯化获得。(3)单克隆抗体具有特异性强、纯度高的特点。答案:(1)HSV-1蛋白体液免疫脾脏骨髓瘤无限增殖且产生专一抗体(2)腹腔腹水(3)纯度高特异性强4.(11分)有性生殖的生物产生后代需进行受精作用,植物体细胞杂交要进行原生质体的融合,单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合,可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程,据图回答相关问题:(1)若a、b分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花粉,且这两对基因分别位于两对同源染色体上,由于受一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用,在光照强度大于800 lx时都不能生长。要想从融合细胞的培养

8、液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞,较为简便的筛选方法是。(2)若a、b表示两种植物体细胞,则由d细胞形成杂种植株的原理是,这种育种方法的优点是。(3)若a、b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞,则d细胞的特点是。由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较,具有的特点。生产上一般不能通过直接培养B淋巴细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是。(4)下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解,请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。【解题指南】解答本题时需关注以下四点:(1)hr是a、b产生的配子中相同的配子,另外两种配子分别是Hr、hR。(2)两个不同的细胞形成的杂种细胞发育成植株。(3)骨髓瘤细胞的特点、B淋巴细胞的特点与融合后的细胞具备的特点之间的关系。(4)单克隆抗体产生的过程由细胞融合和杂交细胞的培养两部分组成。【解析】(1)a的花粉基因型为Hr和hr,b的花粉基因型为hR和hr,只有HhRr的基因组合方式没有隐性纯合基因,所以杂种细胞HhRr能在光照强度大于800 lx时生长。(2)植物体细胞杂交形成植株,是植物细胞全能性的表现,克服了自然条件下物种之间的生殖隔离。(3)在单克隆抗体产生过程中细胞d是杂交瘤细胞,具备了融合前两种细胞的优点,能无限增殖且产生特定抗体。B淋巴细胞不能无限增殖,无法得到大量的抗体。(4)只有注射特定抗原后才能得到特定的B淋巴细胞

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