DXI 800 项目 SOP

1、宁波市第一医院检验科管理文件分析项目SOP文件编号：MY-FXXMSOP-02版本：2007-A/0免疫分析项目标准操作程序（SOP）适合BECKMANCOULTERUNICEL DXI 800自动发光免疫分析仪 宁波市第一医院检验科管理文件分析项目SOP文件编号：MY-FXXMSOP-02版本： 2007-A/0生效日期：20070220文件首页文件类别：分析项目SOP文件文件编号：MY-FXXMSOP-02文件版本：2007年第一版启用日期：2007年 02 月20日有效时间：至2009年 02 月20日发出文件数：2份。分别由科主任和免疫室存放与使用文件编写者：许桂芳文件签发者：陈晓蓓

2、文件有效期内的修改：修改日期修改内容修改方式负责人签名科主任签名文件复审日期：2009年02月20日。复审后自动延长有效期两年。复审通过审批者： (科主任签名)宁波市第一医院检验科管理文件分析项目SOP文件编号：MY-FXXMSOP-02版本：2007-A/0生效日期：20070220Dxi 800发光免疫分析仪分析项目SOP 目录一、人绒毛膜促性腺激素亚单位测定标准操作规程 MY-FXXMSOP-02/01二、黄体生成素测定标准操作规程 MY-FXXMSOP-02/02三、卵泡刺激素测定标准操作规程 MY-FXXMSOP-02/03四、雌二醇测定标准操作规程 MY-FXXMSOP-02/04

3、五、非结合雌三醇测定标准操作规程 MY-FXXMSOP-02/05六、催乳素测定标准操作规程 MY-FXXMSOP-02/06七、孕酮测定标准操作规程 MY-FXXMSOP-02/07八、睾酮测定标准操作规程 MY-FXXMSOP-02/08九、前列腺特异性抗原测定标准操作规程 MY-FXXMSOP-02/09十、游离前列腺特异性抗原测定标准操作规程 MY-FXXMSOP-02/10十一、癌胚抗原测定标准操作规程 MY-FXXMSOP-02/11 十二、甲胎蛋白测定标准操作规程 MY-FXXMSOP-02/12 十三、皮质醇测定标准操作规程 MY-FXXMSOP-02/13十四、总IgE测定标

4、准操作规程 MY-FXXMSOP-02/14十五、胰岛素测定标准操作规程 MY-FXXMSOP-02/15十六、总甲状腺素T4测定标准操作规程 MY-FXXMSOP-02/16十七、游离甲状腺素测定标准操作规程 MY-FXXMSOP-02/17十八、总三碘甲状腺氨酸测定标准操作规程 MY-FXXMSOP-02/18十九、游离三碘甲状腺氨酸测定标准操作规程 MY-FXXMSOP-02/19二十、促甲状腺素测定标准操作规程 MY-FXXMSOP-02/20二十一、甲状腺球蛋白测定标准操作规程 MY-FXXMSOP-02/21二十二、铁蛋白测定标准操作规程 MY-FXXMSOP-02/22二十三、叶

5、酸测定标准操作规程 MY-FXXMSOP-02/23二十四、维生素B12测定标准操作规程 MY-FXXMSOP-02/24宁波市第一医院检验科管理文件分析项目SOP文件编号：MY-FXXMSOP-02/01版本：2007-A/0 生效日期：20070220一、人绒毛膜促性腺激素亚单位测定标准操作规程 第 1页共 5 页1 检验申请 单独检验项目申请：人绒毛膜促性腺激素亚单位测定（缩写hCG）；组合项目申请：肿瘤标志物检查组合。临床医生根据需要提出检验申请。2 标本采集与处理2.1 标本采集 常规静脉采血约2 ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。也可用肝素或EDTA作抗凝剂采

6、集血浆标本。 检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。 急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。 标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。 下列标本为不合格标本 标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。2.1.5.2 对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。 无法确认标本与申请单对应关系的。 其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.2 标本保存 接收标本后在60min内将标本离心分离出血清或血浆, 避免溶血。离心必须达到4000rpm×15min，离心后的血清中不能含有

7、颗粒物或微量纤维蛋白。 标本保存时间：室温（1525）下可稳定8h，普通冰箱中（28）稳定3d，在-20最多可保存4周。避免反复冻融。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1d的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。 已完成测试的标本保持完整的识别号，置48冰箱内保存7d。2.3 标本采集的注意事项 采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动，早上或上午采血。3 方法原理双位点免疫酶夹心法。标本中HCG与试剂中兔抗hCG-ALP结合物和包被了羊抗鼠IgG-鼠抗hCG复合物的磁性微粒子共同反应，血清hCG与固相化的抗hCG单克隆宁波市第一医院检验科管理文件分析项目SOP文件编号：MY-FXXMSOP

8、-02/01版本：2007-A/0 生效日期：20070220一、人绒毛膜促性腺激素亚单位测定标准操作规程 第 2 页共 5 页抗体结合，而兔抗hCG-ALP结合物与血清hCG不同的抗原位点起反应，最后形成微粒子-羊抗鼠IgG-鼠McAb-hCG-兔抗体-ALP夹心型免疫复合物。经磁性分离，洗涤洗去未结合的物质，加入化学发光底物Lumi-Phos*530，测量反应产生的光，光子的量与标本中hCG的浓度成比例，由多点校准曲线求得标本中hCG的浓度。4 试剂及其他用品4.1 试剂：Access-hCG测定试剂包，由美国BECKMAN COULTER公司出品，试剂盒产品号33500。未打开的试剂包保

9、存于28在有效期内稳定，不可冻存。开启的试剂包载入系统中可使用28d。4.2 试剂盒组分4.2.1 磁性微粒子：包被了羊抗鼠IgG-鼠抗hCG单克隆抗体复合物。4.2.2 液体试剂：碱性磷酸酶标记的兔抗-HCG抗体。4.2.3 试剂包即开即用，无须特殊准备。4.3 其他试剂与用品4.3.1 化学发光底物：ACCESS的通用发光剂底物液，Cat. No. 81906。4.3.2 清洗缓冲液、反应杯等。5 校准品与校准模式5.1 校准品: 采用美国BECKMAN COULTER公司Access专用配套hCG校准液，5个浓度。有校准卡片。5.2 校准类型和校准点数目：非线性模式，6个校准点。仪器根据

10、校准曲线卡片数据(6参数对数拟合曲线)自动建立校准曲线。5.3 校准周期：在同一批号试剂使用期间校准曲线有效，但在间隔28d后需要重新校准。另在：更换试剂批号或出现质控漂移时；仪器进行全面保养后；仪器的重要零件更换后，进行一次校准。5.4 校准液重建方法：液态校准液，即可使用。6 质控品与室内质控规则6.1 质控品采用hCG质控品或采用自备混合血清。6.2 质控液重建方法：液态质控液，即开即用，充分颠倒混匀，无需特殊准备。6.3质控品测定：在每一批标本中测定质控血清一次。宁波市第一医院检验科管理文件分析项目SOP文件编号：MY-FXXMSOP-02/01版本：2007-A/0 生效日期：200

11、70220一、人绒毛膜促性腺激素亚单位测定标准操作规程 第 3 页共 5 页6.4 质控规则：采用L-J质控图，以±3s为失控限。标准差由本室实验数据得出。6.5 如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。7 适用仪器美国BECKMAN COULTER公司的DxI 800自动发光免疫分析仪。8 标本检测步骤装载试剂 进行校准 进行质控 输入工作表 加载样本 测定操作 结果复核 报告。 9 主要分析参数无须输入操作参数，仪器根据预设的分析项目参数和试剂条码的信息自动进行分析。标本25µl。10 结果计算仪器

12、根据校准曲线自动给出每个标本测定结果。测定结果单位以mIU/mL或IU/L表示。11 检验结果的报告及范围11.1 结果的报告 结果经审核后，确认准确无误后发出报告。 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。11.2 报告范围：0.5200000 mIU/mL。超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本重新稀释后重复测定的结果。12 操作性能12.1 精密度：批内CV 3.5%4.4%；批间CV 1.34%2.15%。12.2 分析范围：0.

13、5200000mIU/mL。 12.3 分析灵敏度：0.5mIU/mL。12.4 方法的有限性及干扰因素：TSH（250µIU/mL）、LH（400 mIU/mL），FSH（400 mIU/mL）时无交叉反应。甘油三脂（22.6mmol/L）、血红蛋白（10g/L）或胆红素（0.34mmol/L）宁波市第一医院检验科管理文件分析项目SOP文件编号：MY-FXXMSOP-02/01版本：2007-A/0 生效日期：20070220一、人绒毛膜促性腺激素亚单位测定标准操作规程 第 4 页共 5 页时在检测允许的精密度范围内对结果没有影响。13 参考范围及医学决定水平参考范围：男性和未怀孕

14、女性：<10mIu/mL滋养层相关疾病：>100000 mIu/mL孕期（受孕后） HCG浓度0.21week 550 mIu/mL12week 50500 mIu/mL23week 1005000 mIu/mL34week 50010000 mIu/mL45week 100050000 mIu/mL56week 10000100000 mIu/mL68weekmIu/mL23months 10000100000 mIu/mL14 临床意义14.1 hCG最初是由滋养层分泌，后来由绒毛和胎盘分泌。在妊娠头三个月，hCG的浓度增加并达到高峰；在妊娠中、后期h

15、CG形成平台。14.2 在末次月经后的3到4周内检测尿液或血液中hCG的浓度是确定妊娠最可靠的指标。测定hCG可应用于对异位妊娠、先兆流产、多胎妊娠的诊断。hCG检测浓度低并不能除外妊娠，如果怀疑妊娠，应在48h以后再次采集标本进行检测。14.3 hCG浓度升高还可见于滋养层细胞肿瘤和非滋养层细胞肿瘤，如：小肠癌、肺癌、睾丸癌、乳腺癌和前列腺癌、葡萄胎、绒毛膜癌及其脑转移等；测定外周血循环中hCG的浓度对上述患者的疗效监测十分有意义。15 结果审核以及分析与相关项目的联系15.1 由资深专业人员负责检验结果的审核。15.2 审核者认真审核每一个测定结果，对发出报告结果的可靠性负责，并在报告单的

16、审核者处签名。15.3 相关项目：审核与其他肿瘤标志物等的关系，或参考受检者临床资料，若发现与临床相悖的情况，应分析与查找原因。宁波市第一医院检验科管理文件分析项目SOP文件编号：MY-FXXMSOP-02/01版本：2007-A/0 生效日期：20070220一、人绒毛膜促性腺激素亚单位测定标准操作规程 第 5 页共 5 页16 有关引用程序与文件16.1 DxI 800自动发光分析仪仪器标准操作规程。16.2免疫检验室内质控标准操作程序。16.3检验结果审核程序。16.4标本送检和接收程序。17 参考文献17.1 陆永绥，张伟民主编. 临床检验管理与技术规程. 杭州:浙江大学出版社, 20

17、04.17.2 Access hCG测定试剂说明书。17.3 叶应妩，王毓三，申子瑜主编. 全国临床检验操作规程 (第三版). 东南大学出版社，2006. 18 本SOP变动程序任何一位使用本SOP的工作人员如提出对本SOP改动意见，或本测定项目的方法、试剂有变动的情况，可以对本SOP作出改动，但必须先报经专业主管和科主任批准。19 本SOP涉及的记录与表单19.1 剂装载记录表19.2 质控记录19.3 失控及失控处理记录19.4 检验结果审校核记录宁波市第一医院检验科管理文件分析项目SOP文件编号：MY-FXXMSOP-02/02版本：2007-A/0 生效日期：20070220二、黄体生

18、成素测定标准操作规程 第 1 页共 5 页1 检验申请 单独检验项目申请：黄体生成素测定（缩写LH）；组合项目申请：(女)性激素检查组合。临床医生根据需要提出检验申请。2 标本采集与处理2.1 标本采集 常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。也可采集血浆标本，用肝或EDTA抗凝。 检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。 急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。 标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。 下列标本为不合格标本 标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清

19、或血浆。2.1.5.2 对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。 无法确认标本与申请单对应关系的。 其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.2 标本保存 接收标本后在60min内将标本离心分离出血浆, 避免溶血。离心必须达到4000rpm×15min，离心后的血清中不能含有颗粒物或微量纤维蛋白。 标本保存时间：室温（1525）下可稳定8h，普通冰箱中（28）稳定2d，在-20最多可保存4周。避免反复冻融。 已完成测试的标本保持完整的识别号，置48冰箱内保存7d。2.3 标本采集的注意事项 采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动。3 方法原理采用双抗体夹心酶联免疫发光分

20、析原理。标本中LH与包被在磁性微粒子上的抗LH抗体结合，经磁性分离，洗涤洗去未结合的物质，然后加入ALP标记的羊抗hLH，反应后形成微粒子-羊抗鼠IgG-鼠抗hLH-hLH-羊抗体-ALP夹心型免疫复合物，再次分宁波市第一医院检验科管理文件分析项目SOP文件编号：MY-FXXMSOP-02/02版本：2007-A/0 生效日期：20070220二、黄体生成素测定标准操作规程 第 2 页共 5 页离洗涤后，加入化学发光底物Lumi-Phos 530，经碱性磷酸酶的作用产生光子，测量反应产生的光，光子的量与标本中hLH 的浓度成正比，由多点校准曲线求得标本中hLH 的浓度。4 试剂及其他用品4.1

21、 试剂：Access LH测定试剂包，由美国BECKMAN COULTER公司出品，试剂盒产品号33510。未打开的试剂包保存于28在效期内稳定，不可冻存。开启的试剂包载入系统中可使用28d。4.2 试剂盒组分 磁性微粒子：包被了羊抗鼠IgG-鼠抗hLH单克隆抗体复合物的磁性微粒子。4.2.2 液体试剂：碱性磷酸酶标记的羊抗人LH抗体。4.2.3 试剂包即开即用，无须特殊准备。4.3 其他试剂与用品4.3.1 化学发光底物：ACCESS的通用发光剂底物液，Cat. No. 81906。4.3.2 清洗缓冲液、反应杯等。5 校准品与校准模式5.1 校准品: 采用Access专用配套LH校准液，C

22、at. No. 33515，5个浓度。有校准卡片。5.2 校准类型和校准点数目：非线性模式，6个校准点。仪器根据校准曲线卡片数据(6参数对数拟合曲线)自动建立校准曲线。5.3 校准周期：在同一批号试剂使用期间校准曲线有效，但在间隔28d后需要重新校准。每当：更换试剂批号或出现质控漂移时；仪器进行全面保养后；仪器的重要零件更换后，进行一次校准。5.4 校准液重建方法：液态校准液，即可使用。6 质控品与室内质控规则6.1 质控品采用LH质控品或采用自备混合血清。6.2 质控液重建方法：液态质控液，即开即用，充分颠倒混匀，无需特殊准备。6.3质控品测定：在每一批标本中测定质控血清一次。6.4 质控规

23、则：采用L-J质控图，以±3s为失控限。标准差由本室实验数据得出。宁波市第一医院检验科管理文件分析项目SOP文件编号：MY-FXXMSOP-02/02版本：2007-A/0 生效日期：20070220二、黄体生成素测定标准操作规程 第 3 页共 5 页6.5 如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。7 适用仪器美国BECKMAN COULTER公司的DxI 800自动发光免疫分析仪。8 标本检测步骤装载试剂 进行校准 进行质控 输入工作表 加载样本 测定操作 结果复核 报告。9 主要分析参数无须输入操作参数，仪器

24、根据预设的分析项目参数和试剂条码的信息自动进行分析。标本量50µl。10 结果计算仪器根据校准曲线自动给出每个标本测定结果。测定结果单位以mIU/mL或IU/L表示。系统可以利用所得到的FSH和LH结果自动进行LH/FSH比值（L/F）的计算。11 检验结果的报告及范围11.1 结果的报告 结果经审核后，确认准确无误后发出报告。 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。11.2 报告范围：0.2250IU/mL，超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字

25、说明，例如：系根据标本重新稀释后重复测定的结果。12 操作性能12.1 精密度：批内CV 3.6%5.4%；批间CV 4.3%6.4%。12.2 分析范围：0.2250IU/mL。 12.3 分析灵敏度：0.2IU/ml。12.4 方法的有限性及干扰因素：FSH（400 mIU/mL）、TSH（200mIU/L）、hCG（1 IU/mL）；hCG（125 IU/mL）在检测允许的精密度范围内对结果没有影响。甘油三脂（33.9mmol/L）、血红蛋白（5g/L）或胆红素（0.684mmol/L）时对试验的干扰少于10%。宁波市第一医院检验科管理文件分析项目SOP文件编号：MY-FXXMSOP-0

26、2/02版本：2007-A/0 生效日期：20070220二、黄体生成素测定标准操作规程 第 4 页共 5 页13 参考范围及医学决定水平参考范围：男性：1.28.6 mIu/ ml女性: 卵泡期2.110.9mIu/ml排卵期19.2103.0mIu/mL黄体期1.212.8mIu/ml绝经期10.958.6mIu/mL14 临床意义14.1 黄体生成素（LH）是一种二聚体的糖蛋白，由腺垂体分泌，受下丘脑促性腺激素释放激素的调节。其-亚单位与其它的糖蛋白类激素相同，-亚单位具有生物学活性并与人绒毛膜促性腺激素有部分的同源性。14.2 在女性月经周期中，卵泡刺激素（FSH）刺激卵泡的生长；当卵

27、泡成熟时，LH分泌增强形成LH峰，FSH水平则有所下降，导致排卵。卵巢的类固醇激素是LH分泌的重要负反馈调节因素。当女性绝经后，卵巢的负反馈作用减退，从而导致LH浓度升高。14.3 LH浓度升高还可见于卵巢功能衰退的绝经前女性或青春期卵巢发育不成熟的女性。14.4 hLHh/hFSH的比值常有助于对多囊子宫的诊断。14.5 低浓度hLH和hFSH可提示垂体功能不足，而高浓度hLH和hFSH若伴有性激素浓度降低，则提示性功能不足如Turners综合征和绝经期、子宫切除术后等。14.6 hLH测定还有助于分析下丘脑-垂体-性腺功能状态，以便判断卵巢和性腺发育不全或区别垂体性闭经和下丘脑闭经。15

28、结果审核以及分析与相关项目的联系15.1 由资深专业人员负责检验结果的审核。15.2 审核者认真审核每一个测定结果，对发出报告结果的可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。15.3 相关项目：审核与其他女性激素等的关系，如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。16 有关引用程序与文件16.1 DxI 800自动发光免疫分析仪仪器标准操作规程。宁波市第一医院检验科管理文件分析项目SOP文件编号：MY-FXXMSOP-02/02版本：2007-A/0 生效日期：20070220二、黄体生成素测定标准操作规程 第 5 页共 5 页16.2免疫检验室内质控标准操作程序。16.3检验结果审核程序

29、。16.4标本送检和接收程序。17 参考文献17.1 陆永绥，张伟民主编. 临床检验管理与技术规程. 杭州:浙江大学出版社, 2004.17.2 Access LH测定试剂说明书。17.3 叶应妩，王毓三，申子瑜主编. 全国临床检验操作规程 (第三版). 东南大学出版社，2006. 18 本SOP变动程序任何一位使用本SOP的工作人员如提出对本SOP改动意见，或本测定项目的方法、试剂有变动的情况，可以对本SOP作出改动，但必须先报经专业主管和科主任批准。19 本SOP涉及的记录与表单19.1 剂装载记录表19.2 质控记录19.3 失控及失控处理记录19.4 检验结果审校核记录宁波市第一医院检

30、验科管理文件分析项目SOP文件编号：MY-FXXMSOP-02/03版本：2007-A/0 生效日期：20070220三、卵泡刺激素测定标准操作规程 第 1 页共 5 页1 检验申请 单独检验项目申请：卵泡刺激素测定（缩写FSH）；组合项目申请：女性激素检查组合。临床医生根据需要提出检验申请。2 标本采集与处理2.1 标本采集 常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。也可采集血浆标本，用肝或EDTA抗凝。 检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。 急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。 标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接

31、收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。 下列标本为不合格标本 标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。2.1.5.2 对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。 无法确认标本与申请单对应关系的。 其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.2 标本保存 接收标本后在60min内将标本离心分离出血浆, 避免溶血。离心必须达到4000rpm×15min，离心后的血清中不能含有颗粒物或微量纤维蛋白。 标本保存时间：室温（1525）下可稳定8h，普通冰箱中（28）稳定2d，在-20最多可保存4周。避免反复冻融。 已完成测试的标本保持完整的识别号，置48冰

32、箱内保存7d。2.3 标本采集的注意事项 采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动。3 方法原理 采用双抗体夹心法酶联免疫发光分析原理。标本中FSH与包被在磁性微粒子上的鼠抗FSH单克隆抗体结合，再与液相试剂中碱性磷酸酶标记的抗FSH抗体结合，经磁性分离，洗涤洗去未结合的物质，然后加入ALP连结的羊抗hFSH，最后形成微粒子-羊抗宁波市第一医院检验科管理文件分析项目SOP文件编号：MY-FXXMSOP-02/03版本：2007-A/0 生效日期：20070220三、卵泡刺激素测定标准操作规程 第 2 页共 5 页鼠IgG-鼠抗hFSH-hFSH-羊抗体-ALP夹心型免疫复合物。再次分离洗涤后

33、，加入化学发光底物Lumi-Phos 530，经碱性磷酸酶的作用产生光子，测量反应产生的光，光子的量与标本中hFSH的浓度成正比，由多点校准曲线求得标本中hFSH的浓度。4 试剂及其他用品4.1 试剂：Access FSH测定试剂包，由美国BECKMAN COULTER公司出品，试剂盒产品号33520。未打开的试剂包保存于28在有效期内稳定，不可冻存。开启的试剂包载入系统中可使用28d。4.2 试剂盒组分 磁性微粒子包被珠：包被了羊抗鼠IgG-鼠抗hFSH单克隆抗体复合物的磁性微粒子。4.2.2 液体试剂：碱性磷酸酶标记的羊抗hFSH抗体。含蛋白的Tris缓冲液。4.2.3 试剂包即开即用，无

34、须特殊准备。4.3 其他试剂与用品4.3.1 化学发光底物：ACCESS的通用发光剂底物液，Cat. No. 81906。4.3.2 清洗缓冲液、反应杯等。5 校准品与校准模式5.1 校准品: 采用Access专用配套FSH校准液，5个浓度。Cat. No. 33525。有校准卡片。5.2 校准类型和校准点数目：非线性模式，6个校准点。仪器根据校准曲线卡片数据(6参数对数拟合曲线)自动建立校准曲线。5.3 校准周期：在同一批号试剂使用期间校准曲线有效，但在间隔28d后需要重新校准。每当：更换试剂批号或出现质控漂移时；仪器进行全面保养后；仪器的重要零件更换后，进行一次校准。5.4 校准液重建方法

35、：液态校准液，即可使用。开封后于28保存最长不超过13周，或-20保存13周。避免反复冻融。6 质控品与室内质控规则6.1 质控品可购买FSH质控品或采用自备混合血清。6.2 质控液重建方法：液态质控液，即开即用，充分颠倒混匀，无需特殊准备。6.3质控品测定：在每一批标本中测定质控血清一次。宁波市第一医院检验科管理文件分析项目SOP文件编号：MY-FXXMSOP-02/03版本：2007-A/0 生效日期：20070220三、卵泡刺激素测定标准操作规程 第 3 页共 5 页6.4 质控规则：采用L-J质控图，以±3s为失控限。标准差由本室实验数据得出。6.5 如出现失控情况，按室内质

36、控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。7 适用仪器美国BECKMAN COULTER公司的DxI 800自动发光免疫分析仪。8 标本检测步骤 装载试剂 进行校准 进行质控 输入标本检测项目 加载标本 标本测定 结果复核 报告。 9 主要分析参数无须输入操作参数，仪器根据预设的分析项目参数和试剂条码的信息自动进行分析。标本40µl。10 结果计算仪器根据校准曲线自动给出每个标本测定结果。测定结果单位以mIU/mL或IU/L表示。系统可以利用所得到的FSH和LH结果自动进行LH/FSH比值（L/F）的计算。11 检验结果的报告及范围11.

37、1 结果的报告 结果经审核后，确认准确无误后发出报告。 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。11.2 报告范围：0.2200 mIU/mL，超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本重新稀释后重复测定的结果。12 操作性能12.1 精密度：批内CV 1.9%2.4%；批间CV 5.0%7.3%。12.2 分析范围：0.2200 mIU/mL。 12.3 分析灵敏度：0.2 IU/ml。12.4 准确性：回收试验结果，回收率104.3。宁波

38、市第一医院检验科管理文件分析项目SOP文件编号：MY-FXXMSOP-02/03版本：2007-A/0 生效日期：20070220三、卵泡刺激素测定标准操作规程 第 4 页共 5 页12.5 方法的有限性及干扰因素：LH（400 mIU/mL）、TSH（250µIU/L）、hCG（125IU/mL）在检测允许的精密度范围内对结果没有影响。甘油三脂（33.9mmol/L）、血红蛋白（10g/L）或胆红素（0.684mmol/L）时对试验的干扰少于10%。13 参考范围及医学决定水平参考范围：男性：1.319.3 mIU/ml 女性：卵泡期 3.98.8 mIU/ml 排卵期 4.522

39、.5 mIU/ml 黄体期 1.85.1 mIU/ml绝经期 16.7113.6 mIU/ml14 临床意义14.1 卵泡刺激素（FSH）是由腺垂体分泌，并受下丘脑促性腺激素释放激素的调节。FSH在男性和女性体内的功能主要是促进性腺组织的发育并维持其功能，同时，性腺组织合成和分泌的类固醇激素也可以负反馈调节FSH的分泌。14.2 FSH和黄体生成素（LH）共同控制性腺的生长与生殖作用。育龄妇女的FSH刺激子宫滤泡的发育。血液FSH水平在月经周期中波动，受促性腺激素的负反馈调节。在女性绝经期，卵巢的功能和类固醇激素的分泌停止，负反馈调节作用消失，从而导致FSH浓度的升高；此外，FSH浓度升高还可

40、见于处于卵巢功能衰退的绝经前期女性或青春期卵巢发育不成熟的女性。14.3 FSH与LH水平升高而性激素水平低下时反映性腺功能失调，如发生在男性，提示睾丸功能发育不成熟或无睾症；在女性则可能于绝经期、早熟性子宫功能失调或子宫切除术后等情况中出现。14.4 异常的FSH浓度还提示下丘脑-垂体轴的功能失调。14.5 低浓度hLH和hFSH可提示垂体功能不足，而高浓度hLH和hFSH若伴有性激素浓度降低，则提示性功能不足如Turners综合征和绝经期、子宫切除术后等。服用口服避孕药的妇女其促性腺激素水平常是低下的。15 结果审核以及分析与相关项目的联系15.1 由资深专业人员负责检验结果的审核。宁波市

41、第一医院检验科管理文件分析项目SOP文件编号：MY-FXXMSOP-02/03版本：2007-A/0 生效日期：20070220三、卵泡刺激素测定标准操作规程 第 5 页共 5 页15.2 审核者认真审核每一个测定结果，对发出报告结果的可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。15.3 相关项目：审核与其他女性激素等的关系，如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。16 有关引用程序与文件16.1 DxI 800自动发光免疫分析仪仪器标准操作规程。16.2免疫检验室内质控标准操作程序。16.3检验结果审核程序。16.4标本送检和接收程序。17 参考文献17.1 陆永绥，张伟民主编. 临床检

42、验管理与技术规程. 杭州:浙江大学出版社, 2004.17.2 Access FSH测定试剂说明书。17.3 叶应妩，王毓三，申子瑜主编. 全国临床检验操作规程 (第三版). 东南大学出版社，2006. 18 本SOP变动程序任何一位使用本SOP的工作人员如提出对本SOP改动意见，或本测定项目的方法、试剂有变动的情况，可以对本SOP作出改动，但必须先报经专业主管和科主任批准。19 本SOP涉及的记录与表单19.1 剂装载记录表19.2 质控记录19.3 失控及失控处理记录19.4 检验结果审校核记录宁波市第一医院检验科管理文件分析项目SOP文件编号：MY-FXXMSOP-02/04版本：200

43、7-A/0 生效日期：20070220四、雌二醇测定标准操作规程 第 1 页共 5 页1 检验申请 单独检验项目申请：雌二醇测定（缩写E2）；组合项目申请：女性激素检查组合。临床医生根据需要提出检验申请。2 标本采集与处理2.1 标本采集 常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。也可采集血浆标本，用肝或EDTA抗凝。 检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。 急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。 标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。 下列标本为不合格标本 标本量不足：少于0.3m

44、l的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。2.1.5.2 对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。 无法确认标本与申请单对应关系的。 其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.2 标本保存 接收标本后在60min内将标本离心分离出血浆, 避免溶血。离心必须达到4000rpm×15min，离心后的血清中不能含有颗粒物或微量纤维蛋白。 标本保存时间：室温（1525）下可稳定8h，普通冰箱中（28）稳定2d，在-20最多可保存4周。避免反复冻融。 已完成测试的标本保持完整的识别号，置48冰箱内保存7d。2.3 标本采集的注意事项 采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动，早上

45、或上午采血。3 方法原理采用竞争性酶联免疫发光分析法。标本与包被了羊抗兔IgG-兔抗雌二醇复合物的磁性微粒子反应，20分钟后，加入雌二醇-ALP结合物，标本中雌二醇与碱性磷酸酶标记的雌二醇竞争结合磁性微粒子上抗雌二醇抗体有限的结合位点，最后抗原抗体复合物宁波市第一医院检验科管理文件分析项目SOP文件编号：MY-FXXMSOP-02/04版本：2007-A/0 生效日期：20070220四、雌二醇测定标准操作规程 第 2 页共 5 页与固相化的捕获抗体结合形成微粒子-羊抗兔IgG-兔抗体-（雌二醇或雌二醇-ALP）免疫复合物。经磁性分离，洗涤洗去未结合的物质，加入化学发光底物Lumi-Phos

46、530，经碱性磷酸酶的作用产生光子，光子的量与标本中雌二醇的量成反比，由多点校准曲线求得标本中雌二醇的浓度。4 试剂及其他用品4.1 试剂：Access雌二醇测定试剂包，由美国BECKMAN COULTER公司出品，试剂盒产品号33540。未打开的试剂包保存于28可稳定至有效期，不可冻存。开启的试剂包载入系统中可使用14d。4.2 试剂盒组分 微粒子包被珠：包被了羊抗兔IgG-兔抗雌二醇抗体复合物的磁性微粒子、含BSA的Tris缓冲液。 液体试剂：碱性磷酸酶标记的雌二醇抗体。4.2.4 试剂包即开即用，无须特殊准备。4.3 其他试剂与用品4.3.1 化学发光底物：ACCESS的通用发光剂底物液

47、，Cat. No. 81906。4.3.2 清洗缓冲液、反应杯等。5 校准品与校准模式5.1 校准品：采用Access专用配套雌二醇校准液，Cat. No. 33545，5个浓度。有校准卡片。雌二醇校准可溯源至同位素稀释-气相色谱分析/质谱分析。5.2 校准类型和校准点数目：非线性模式，6个校准点。仪器根据校准曲线卡片数据(6参数对数拟合曲线)自动建立校准曲线。5.3 校准周期：在同一批号试剂使用期间校准曲线有效，但在间隔28d后需要重新校准。每次完成维修保养程序后或质控失控时，也要重新校准。5.4 校准液重建方法：液态校准液，即开即用。校准液开启后于28保存最长不超过13周，或于-20保存1

48、3周。避免反复冻融。6 质控品与室内质控规则6.1 质控品采用E2质控品或采用自备混合血清。6.2 质控液重建方法：液态质控液，即开即用，充分颠倒混匀，无需特殊准备。宁波市第一医院检验科管理文件分析项目SOP文件编号：MY-FXXMSOP-02/04版本：2007-A/0 生效日期：20070220四、雌二醇测定标准操作规程 第 3 页共 5 页6.3质控品测定：在每一批标本中测定质控血清一次。6.4 质控规则：采用L-J质控图，以±3s为失控限。标准差由本室实验数据得出。6.5 如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标

49、本检测。7 适用仪器：美国BECKMAN COULTER公司的DxI 800自动发光免疫分析仪。8 标本检测步骤装载试剂 进行校准 进行质控 输入标本检测项目 加载标本 标本测定 结果复核 报告。 9 主要分析参数无须输入操作参数，仪器根据预设的分析项目参数和试剂条码的信息自动进行分析。标本25µl。10 结果计算仪器根据校准曲线自动给出每个标本测定结果。测定结果单位以pmol/L或pg/mL表示。换算公式：pg/mLpmol/L×0.272411 检验结果的报告及范围11.1 结果的报告 结果经审核后，确认准确无误后发出报告。 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日

50、期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。11.2 报告范围：7313216 pmo/L，超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本重新稀释后重复测定的结果。12 操作性能12.1 精密度：批内CV 1.4%6.1%；批间CV 3.2%7.7%。12.2 分析范围：7313216 pmo/L 。 12.3 分析灵敏度：73 pmo/L。宁波市第一医院检验科管理文件分析项目SOP文件编号：MY-FXXMSOP-02/04版本：2007-A/0 生效日期：20070220四、雌二醇测定标准操

51、作规程 第 4 页共 5 页12.4 方法的有限性及干扰因素：与雌三醇、雌激素酮、葡萄糖苷-雌二醇、5-二氢-睾酮和睾酮等无明显交叉反应性。甘油三脂（36.1mmol/L）、血红蛋白（1.3g/L）或胆红素（0.17mmol/L）时对试验的干扰少于5%。13 参考范围及医学决定水平参考范围：男性：73275 pmo/L女性：卵泡期 88418 pmo/L 排卵期 2271959 pmo/L 黄体期 2931002 pmo/L 绝经期 73322 pmo/L14 临床意义14.1 雌二醇是卵巢分泌的重要雌性激素，也可由肾上腺、胎盘和睾丸产生。外周血循环中有超98%的雌二醇是与血清蛋白质相结合，其中主要是与性激素结合球蛋白（SHBG）相结合。雌二醇通过羟基化并与硫或葡萄糖苷酸结合的方式被代谢，其代谢清除率受雌二醇本身浓度的影响。14.2 雌二醇正常情况下对促性腺激素的释放存在负反馈调节；但是，当雌二醇的产生加速优势卵泡的快速生长时，其调节变为正反馈，导致LH分泌急速达峰，发生排卵。14.3 雌二醇的检测对评价各种月经功能紊乱（包括青春期延迟、停经、绝经等）十分有意义。15 结果审核以及分析与相关项目的联系15.1 由资深专业人员负责检验结果的审核。15.2 审核者认真审核每一个测定结果，对发出报告结果的可靠