1.1DNA重组技术的基本工具

1、.专题1 基因工程1.1 DNA重组技术的根本工具1科学家们经过多年的努力，创立了一种新兴生物技术基因工程。施行该工程的最终目的是A定向提取生物体的DNA分子B定向地对DNA分子进展人工“剪切C在生物体外对DNA分子进展改造D定向地改造生物的遗传性状解析：基因工程的内容就是在生物体外，通过对DNA分子进展人工“剪切和“拼接，对生物的基因进展改造和重新组合，然后导入受体细胞内进展无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需的基因产物，也就是定向地改造了生物的遗传性状。来源:Zxxk 答案：D2以下关于限制酶的说法，正确的选项是A限制酶广泛存在于各种生物中，其化学本质是蛋白质B一种限制酶只

2、能识别一种或一类特定的核苷酸序列C不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端D限制酶均能特异性地识别由6个核苷酸组成的序列解析：限制酶主要存在于微生物中，A错误；限制酶具有专一性，即一种限制酶只能识别一种或一类特定的核苷酸序列，B正确；不同的限制酶切割DNA后会形成黏性末端或平末端，C错误；限制酶均能特异性地识别核苷酸序列，但识别的核苷酸序列不一定是由6个核苷酸组成的，D错误。答案：B3以下关于DNA连接酶的作用的表达，正确的选项是来源:1ZXXKA将单个核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸二酯键B将断开的两个DNA片段的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键C连接两条DNA链上碱基之间的氢键D只能将

3、双链DNA片段互补的黏性末端连接起来解析：选项A是DNA聚合酶的作用，故A项错误。DNA连接酶能将双链DNA片段末端连接起来，重新形成磷酸二酯键，故B项正确、C项错误。D项只涉及了E·coli DNA连接酶的作用T4 DNA连接酶还可以连接平末端，故D项错误。答案：B4如以下图是基因工程主要技术环节的一个根本步骤，这一步骤需用到的工具酶是ADNA连接酶和解旋酶BDNA聚合酶和限制性核酸内切酶C限制性核酸内切酶和DNA连接酶DDNA聚合酶和RNA聚合酶解析：目的基因和载体结合需“分子手术刀限制性核酸内切酶和“分子缝合剂DNA连接酶。此过程不涉及DNA复制，不需要DNA聚合酶和解旋酶。答

4、案：C5以下图为DNA分子的切割和连接过程。DNA分子的切割和连接1EcoR I是一种_酶，其识别序列是_，切割位点是_与_之间的_键。切割结果产生的DNA片段末端形式为_。2不同来源的DNA片段结合，在这里需要的酶应是_，此酶的作用是在_与_之间形成_键而起“缝合作用的，其中能连接平末端的连接酶是_。解析：EcoR I是一种限制酶，从图中可以看出其识别序列是GAATTC，切割位点是鸟嘌呤脱氧核苷酸和腺嘌呤脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。切割后产生的DNA末端形式为黏性末端。要将不同来源的DNA片段连接起来，需要DNA连接酶，其作用是形成磷酸二酯键而将两DNA片段“缝合起来。T4 DNA连接酶既可

5、以“缝合黏性末端，也可以“缝合平末端。答案：1限制性核酸内切限制GAATTC鸟嘌呤脱氧核苷酸腺嘌呤脱氧核苷酸磷酸二酯黏性末端2E·coli DNA连接酶或T4 DNA连接酶鸟嘌呤脱氧核苷酸腺嘌呤脱氧核苷酸磷酸二酯T4 DNA连接酶A级根底稳固1能有效地打破物种的界限，定向地改造生物的遗传性状，培育新的农作物优良品种的生物技术是A基因工程技术B诱变育种技术C杂交育种技术 D组织培养技术解析：诱变育种是在一定的条件下，对某一品种进展诱变而产生的突变性状；杂交育种必须在同种生物之间进展；组织培养技术是无性生殖，难以产生新品种；而基因工程可以打破物种的界限，在不同种生物之间进展基因重组，从而

6、定向改造生物的遗传性状。答案：A2在基因工程中，常用的“剪刀“针线和“载体分别指A大肠杆菌病毒、质粒、DNA连接酶B噬菌体、质粒、DNA连接酶C限制酶、RNA连接酶、质粒D限制酶、DNA连接酶、质粒解析：基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的意愿，进展严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由此可见，DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶限制酶分子“剪刀，DNA连接酶分子“针线，质粒、动植物病毒或噬菌体运载体。答案：D3以下四个DNA分子，彼此间具有黏性末端的一组是A BC D解析：两个黏性末端彼此

7、之间可以根据碱基互补配对原那么连接成DNA片段。答案：D4作为基因的运输工具载体，必须具备的条件之一及理由是A可以在受体细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因B具有多个限制酶切割位点，以便于目的基因的表达C具有某些标记基因，以便为目的基因的表达提供条件D可以在受体细胞中复制并稳定保存，以便于进展挑选解析：作为载体要携带目的基因进入受体细胞并使之表达，必须可以在受体细胞内稳定地保存并大量复制。同时要具有某些标记基因，是为了通过标记基因是否表达来判断目的基因是否进入了受体细胞，从而挑选受体细胞。载体要具有多个限制酶切割位点，那么是为了便于与外源基因连接。答案：A5限制酶是一种核酸内

8、切酶，可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列，以下图为四种限制酶BamH，EcoR ，Hind 和Bgl 的识别序列和切割位点：切割出来的DNA黏性末端可以互补配对的是ABamH 和EcoR BBamH 和Hind CBamH 和Bgl DEcoR 和Hind 解析：BamH切割出来的DNA黏性末端是GATC，Bgl切割出来的DNA黏性末端也是GATC，它们可以互补配对。答案：CB级才能训练6如图表示两种限制酶识别DNA分子的特定序列，并在特定位点对DNA分子进展切割的示意图，请答复以下问题：1图中甲和乙代表_。2EcoR、Hpa代表_。3图中甲和乙经过相应操作均形成两个片段，切口的类型分别

9、为_、_。甲中限制酶的切点是_之间，乙中限制酶的切点是_之间。4由图解可以看出，限制酶的作用特点是_。5假如甲中G碱基发生基因突变，可能发生的情况是_。解析：1由题图看出，甲和乙代表由脱氧核苷酸构成的不同的DNA片段。2EcoR和Hpa能切割DNA分子，说明它们是限制酶。3甲中切点在G、A之间，切口在识别序列中轴线两侧，形成黏性末端；乙中切点在A、T之间，切口在识别序列中轴线处，形成平末端。4限制酶能识别DNA分子的特定核苷酸序列，并从特定位点切割DNA分子。5当特定核苷酸序列变化后，就不能被相应限制酶识别。答案：1有特定脱氧核苷酸序列的DNA片段2两种不同的限制酶3黏性末端平末端G、AA、T

10、4能识别双链DNA分子的特定脱氧核苷酸序列，并从特定的位点将DNA分子切开来源:Z_xx_k 5限制酶不能识别切割位点7限制酶Mun和限制酶EcoR 的识别序列及切割位点分别是CTTAAG和GAATTC。如以下图表示的是四种质粒和目的基因，其中箭头所指部位为酶的识别位点，质粒的阴影部分表示标记基因。适于作为图示目的基因载体的质粒是解析：目的基因两侧有Mun和EcoR 两种限制酶的识别序列，用这两种酶切割都可得到目的基因；B中质粒无标记基因，不符合作为载体的条件；C、D中的标记基因都会被破坏。答案：A8以下图表示某种质粒和人的胰岛素基因，其中a表示标记基因，b表示胰岛素基因，E1表示某限制酶的酶

11、切位点，现用该种限制酶分别切割质粒和胰岛素基因，后用DNA连接酶连接切割后的质粒和胰岛素基因，以下选项中不可能出现的是解析：根据目的基因和质粒上的限制性核酸内切酶的切割位点及互相连接情况判断不可能出现选项C的连接。答案：C9据图所示，有关工具酶功能的表达错误的选项是A限制酶可以切断a处BDNA聚合酶可以连接a处C解旋酶可以使b处解开DDNA连接酶可以连接c处解析：限制酶切割DNA分子时破坏的是DNA链中的磷酸二酯键，如图a处。DNA聚合酶是将单个核苷酸加到已有的核酸片段的3末端的羟基上，形成磷酸二酯键，因此DNA聚合酶可以连接a处。解旋酶解开两个碱基对之间的氢键，即b处解开。DNA连接酶连接的

12、是两个相邻的脱氧核苷酸的磷酸和脱氧核糖，形成磷酸二酯键，如a处，而图示的c处连接的是同一个脱氧核苷酸内的磷酸和脱氧核糖。答案：D10基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和挑选。限制酶的识别序列和切点是GGATCC，限制酶的识别序列和切点是GATC。根据以下图判断以下操作正确的选项是A目的基因和质粒均用限制酶切割来源:Z*xx*k B目的基因和质粒均用限制酶切割C质粒用限制酶切割，目的基因用限制酶切割D质粒用限制酶切割，目的基因用限制酶切割解析：解此题要明确目的基因要切下，质粒只要切开。限制酶的识别序列和切点是GATC，单独使用时可以把目的基因和质粒都切断；限制酶的识别序列

13、和切点是GGATCC，只能把它们切开，单独使用时不能切下，所以目的基因用限制酶切割，质粒用限制酶切割；因为用限制酶切割质粒时破坏了Gene，所以只能用Gene 作为标记基因。答案：D11根据基因工程的有关知识，答复以下问题： 1限制酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有_和_。2质粒载体用限制酶X识别的序列由6个核苷酸组成切割后产生的片段如下：AATTCGGCTTAA该酶识别的序列为_，切割的部位是_。3为使切割后的载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用限制酶X切割外，还可用限制酶Y切割，两种酶共同的特点是_。4按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即_DNA连接酶和

14、_DNA连接酶，其中后者只能连接一种末端。5基因工程中除质粒外，_和_也可作为载体。解析：1限制酶切割DNA分子后可产生两种类型的末端，即平末端和黏性末端。2将图中片段两端的黏性末端对接后可以看出限制酶X识别的序列为6个核苷酸组成的GAATTC，互补链是CTTAAG，切割的位点为G和A之间的磷酸二酯键。3质粒载体可以用限制酶X切割，也可以用另一种限制酶切割，说明该酶与限制酶X切割产生的黏性末端一样。4基因工程使用的DNA连接酶，按来源可分为E·coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶，其中只能连接黏性末端的是E·coli DNA连接酶。5基因工程的载体有质粒、噬菌体的衍生

15、物和动植物病毒。答案：1黏性末端平末端2GAATTC或CTTAAGG和A之间的磷酸二酯键来源:Zxxk 3两种限制酶切割后形成的黏性末端一样4T4E·coli5噬菌体的衍生物动植物病毒12如图为某基因工程中利用的质粒简图，小箭头所指分别为限制酶EcoR I、BamH I的酶切位点，ampR为青霉素抗生素抗性基因，tetR为四环素抗生素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。目的基因的两端分别有包括EcoR I、BamH I在内的多种酶的酶切位点。据图答复以下问题：1在基因工程中常用的工具有三种：一是用于切割DNA分子的_；二是将目的基因与载体拼接的_；三是作为载体的质粒。

16、2将含有目的基因的DNA与经特定的酶切后的载体质粒进展拼接形成重组DNA，理论上讲，重组DNA可能有“_“_“_三种，其中有效的所需要的重组DNA是_。因此需要对这些拼接产物进展分离提纯。3利用图示的质粒拼接形成的三种拼接产物重组DNA与无任何抗药性的原核宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的拼接产物重组DNA是_。解析：1在基因工程中常用的工具酶有两种：一是用于切割DNA分子的限制酶，二是将目的基因与载体连接的DNA连接酶。2用同一种限制酶将含有目的基因的DNA和质粒分别切开，产生的黏性末端一样，进展拼接形成的重组DNA，理论上讲，可能有目的基因目的基因、目的基因载体和载体载体三种。其中人们所需要的重组DNA是目的基因载体。3由图可以看出两种限制酶的酶切位点都在四环素抗性基因中，两种限制酶都能破坏四环素抗性基因，因此用该质粒拼接形成的三种拼接产物重组DNA与无任何抗药性的原核宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的拼接产物应是载体载体仍有抗性基因。答案：1限制酶限制性核酸内切酶DNA连接酶2目的基因目的基因目的基因载体载体载体目的基因载体