氢化物发生原子吸收法测定血液头发中痕量硒

1、氢化物发生原子吸收法测定血液头发中痕量硒 林文业 何秉忠 黄鹂娟 赵士钧 黄桂宽 吴继同 张丽兰 （广西分析测试研究中心）（广西冶金研究所） （广西医学院）在硒的生物化学作用被逐渐认识的今天,要求提供精确的分析数据.由于经典的荧光光度法测定硒,条件比较苛刻,本文采用氢化物发生原子吸收法测定了人体、实验部分一 仪器及工作条件 日立Z-6000型原子分光光度计硒空心阴极灯(北京有色金属研究总院产)日立HFS-2型氢化物发生装置耐热石英管(长沙产,规格:长120mm,内径11mm).波长196.0nm,灯电流5mA,狭缝1.3nm,空气流量1.00kg·cm-2, 乙炔流量0.05kg&#

2、183; cm-2 ,测量方式直示,计算方是用峰高,校准曲线或标准加入方法曲线,计算时间13s,延迟时间0.5s,进样量3ml,载气流速Ar100ml·min-1 ,进样时间30s,反应时间15s.二 试剂 硒(IV)标准贮备液:1000ug·ml-1,由高纯硒粉配置.硒中间标准溶液5ug·ml-1.硼氢化钾:1.5%溶液中含有0.1%的氢氧化钠,用时现配.亚沸蒸馏水三 试样处理ºC恒温沙浴中加热消化至溶液成呈淡黄色后(约4h),加入1mlH2O2,继续加热消化至溶液清亮(约1h)取出,测定前用HCl(30%)溶液定容.于试样处理的同时制备试剂空白.四

3、校准曲线的绘制1 校准曲线·ml 硒的标准系列溶液.2 标准加入法曲线移取10ml试样+10mlHCl(30%):10ml样液+10ml 2ng·ml-1硒标准溶液; 10ml样液+10ml 10ng·ml-1硒标准溶液; 10ml样液+10ml 14ng·ml-1硒标准溶液,制成均含HCL(30%)溶液的硒标准加入法系列溶液. 结果与讨论 一 式样前处理方法的考察试样的前处理是至关重要的.目前测定硒的前处理方法普遍采用湿法消化,常用的分解装置有高型烧杯,三角锥瓶,高压分解坩锅和配有回流冷凝器的凯氏烧杯.由于前两种装置分解式样时,使用的酸量较大,硒易挥发

4、损失,而且这些方法得消化液均需要转移定容,易引起较大的误差.本法采用刻度石英试管,HNO3+HclO4+H2O2+HCl氧化还原体系,于160ºC恒温沙浴中消化血液头发试样.由于石英试管上端能起到空气的冷凝回流作用,因而试剂不易挥发,试样消化完全.与配有冷凝管的烧瓶消化法比较,具有操作简单,试剂和式样用量少,减少转译的误差等优点.本法与水冷凝管的凯氏烧瓶消化法比较的结果见表1. 表1 分解方法的比较统计参数*本法水冷凝管烧瓶法全血(ng·ml-1 )头发(ng·g-1 )全血(ng·ml-1 )头发(ng·g-1 )X+SD144.5+6.96

5、6.5+13.0145.0+7.1664.8+14.4N50505050RSD%4.82.04.92.2* X: 硒的平均值 n: 测定次数 SD: 标准偏差 RSD:相对标准偏差二 常见共存例子的干扰试验我们调查了存在于血液,头发中的25种共存例子对痕量硒测定的干扰试验,结果表明,下述离子(ug·ml-1)不干扰5ng·ml-1硒的测定:Ca(700), Na 、Fe3+(500), Mg、K(200), Cu、Zn(5),Ni、Mn、Al(1), Cr6+、Co(0.2), Mo、As3+、Bi、Sr、Ti、Hg、Sn2+ (0.1),Si、Ba(0.5),Pb(0.0

6、6),Cd(0.05)以及NO3-、ClO4-、H2O2(0.5M).锑()0.05 ug·ml-1不干扰,含量0.1 ug·ml-1有负干扰,但血液头发中锑的含量一般都低于此值,再者经过了相对的稀释,它不会给本法测定硒带来影响.当HNO3、HClO4、H2O2的浓度小于0.5M时也不干扰测定.原因是盐酸介质保持了较佳浓度,可是试样中的Fe、Cu和Ni等重金属元素形成络合物避免其干扰(1) ,这些与文献(3) ,报道是一致的.另外还采用低浓度硒的校准曲线,使试样中基体元素的浓度得到相对稀释(100倍以上),因而更有效地消除血液,头发试样中基体元素对测定硒的干扰.三 校准曲线

7、法与标准加入法结果比较在拟定的最佳条件下, 准曲线法和标准加入法(图1),对试样进行了测试.实验表明,尽管血液,头发试样中含有较复杂的基体元素,但用上述两种校准曲线所求得硒的含量是一只的.四 本法的回收率及精密度在血液,头发试样中分别添加硒标准,按试样处理步骤处理后进行测定,其回收结果见表2.五个平行样品的测定,方法的精密度在1.24.8%以内.经过分析商业部食品检测科学研究所提供的一级标准物质(GBW08551)猪肝中的硒含量,标准值为0.94+0.05 ug·g-1 ,本法测定值为0.93+0.04 ug·g-1 ,准确度是令人满意的.表 2 硒的回收率样品原含Se量(ppb)加入Se量(ppb)测得Se量(ppb)回收率(%)空白-100100100血液A144.4100200241.3347.896.9102血液B246.0200300442.8544.998.499.6头发C356.6100200457.5548.010195.7头发D665.1200300864.69590299.898.0五 应用用本法测定人体全血(177例)头发(327例)中硒的含量,其结果与文献报道值相近(411) .结果见表3. 表 3 人体全血,头发硒平均水