DBXM018-2021 大豆“三系”可育种质异交传粉结实性鉴定规程

1、Q/LB.XXXXX-XXXXICS 65.020CCS B 05 22吉林省地方标准DB22/T XXXXX2022大豆“三系”可育种质异交传粉结实性鉴定规程Cord of practice for outcrossing pollination characteristics of soybean three-line fertile germplasm (点击此处添加与国际标准一致性程度的标识)征求意见稿2022 - XX - XX发布2022 - XX - XX实施吉林省市场监督管理厅发布DB22/T XXXXX2022前言本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标

2、准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由吉林省农业农村厅提出并归口。本文件起草单位：吉林省农业科学院。本文件主要起草人：张井勇、张春宝、赵丽梅、彭宝、闫昊、张伟、林春晶、王鹏年、丁孝羊、孙妍研、关哲允、李慧、孙寰、刘大壮、姚福山。9大豆“三系”可育种质异交传粉结实性鉴定规程1 范围本文件确立了大豆“三系”可育种质异交传粉结实性鉴定的程序，规定了待测可育种质准备、异交传粉鉴定、异交传粉结实性比较分析等阶段的操作指示，描述了记录与档案等追溯方法。本标准适用于北方春大豆“三系”可育种质异交传粉结实性鉴定。2 规范性引用文件

3、下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。DB22/T 22092014 杂交大豆种子DB22/T 31772020 杂交大豆质核互作雄性不育系鉴定规程3 术语和定义DB22/T 2209-2014界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3.1可育种质 soybean fertile germplasm 普通栽培大豆，它的雌蕊及雄蕊均发育正常，雌蕊能接受正常花粉而受精结实，雄蕊能产生有功能的正常花粉。3.2始花期 beginning stage of fl

4、owering 10% 大豆植株开花的时间（月/日）。3.3终花期 ending stage of flowering90% 大豆植株开花结束的时间（月/日）。3.4开花期 flowering period从始花期到终花期的累计时间（天）。3.5雄性不育系 male sterility line 雄蕊发育退化或败育，不能产生正产可育的花粉，但它的雌蕊发育正常，能接受正常花粉而受精结实，并能将雄性不育性遗传给后代的品系。 来源：DB22/T 22092014，3.1 有修改 3.6母本female parent参与杂交的亲本之一，也指不同植株的花进行异花传粉时，接受花粉的植株，本标准中，母本指测

5、交用大豆雄性不育系。3.7父本male parent 参与杂交的亲本之一，本标准中父本为提供花粉的个体，即待测大豆“三系”可育种质。3.8 异交传粉结实性 outcrossing characteristics 大豆种质作为父本异交传粉的能力。测定时父本通过吸引传粉昆虫把花粉传给不育系母本花朵完成受精结实，通过调查母本结荚数量，并与异交传粉结实性髙、中、低父本对照进行比较，分析结荚数差异显著性，以此鉴定异交结实性高低。4 鉴定流程图图1 大豆“三系”可育种质异交传粉结实性鉴定流程图5 待测可育种质准备5.1 新种质资源引进根据不同育种目标，有针对性的引进、收集、选育优良品种或品系。5.2 新种

6、质性状登记5.2.1 整理及编号对新引进种质进行去杂、去劣，登记种子的特征特性，并对其进行统一编号。5.2.2 种植及田间性状调查5.2.2.1 在田间播种引进新种质，行长 3 米，株距 10cm，行距 6065cm。5.2.2.2 出苗期至成熟期进行下列性状调查：a) 苗期：出苗后 7 天内观察并记载下胚轴颜色，开花前观察叶形；b) 开花期：观察花色，调查始花期、盛花期、终花期；c) 鼓粒期：观察抗病性、茸毛色；d) 成熟期：观察成熟期、株型、荚形、结荚习性、茸毛色、株高整齐度。5.2.3 考种成熟后，在行中间位置不缺苗处连续选取 5 株进行考种，考种项目包括：株高、主茎节数、底荚高度、有效

7、分枝数、荚形、荚皮色、单株有效荚数、单株粒数、单株粒重、百粒重、粒形、粒色、种脐色、籽粒光泽等。6 异交传粉鉴定6.1 组合配制6.1.1 异交母本6.1.1.1 中早熟期母本JLSCMS34A，RN 型高异交率雄性不育系，中早熟期组，开花期 30-35 天，该雄性不育系田间异交率超过 90.0%。6.1.1.2 中熟熟期母本JLSCMS82A，RN 型高异交率雄性不育系，中熟熟期组，开花期 35-40 天，该雄性不育系田间异交率超过 90.0%。6.1.2 测交用父本对照6.1.2.1 中早熟期组对照以该熟期组，髙异交率可育系 JLSCMS34B、中异交率可育系 JLCMS47B、低异交率可

8、育系 JLCMS31B分别作为父本异交结实性高、中、低可育对照材料。6.1.2.2 中熟期组对照以该熟期组，髙异交率可育系 JLSCMS82B、中异交率可育系 JLCMS9B、低异交率可育系 JLCMS89B分别作为父本异交结实性高、中、低可育对照材料。6.1.3 测交用父本任一待测可育种质为父本。6.2 异交组合田间种植6.2.1 田间设计 随机区组设计， 3 个地点（吉林西部半干旱区、同时满足野生传粉昆虫活跃地区），每个地点 3 次重复，小区大小为 3m×1.95m，每个小区种植 3 行（1.95m），行长 3.0m，相邻小区间空置 1 行（0.65m），相邻区组间空置 0.80

9、m，小区具体设计见附录 A 图 A.1。6.2.2 亲本的田间播种每个区组均播种异交结实率髙、中、低父本对照 3 组，每个小区播种一份父本及一份母本， 小区内 3 行按父本、母本、父本顺序播种，播种方式见附录 A 图 A.1，父母本均按穴播种，株距 20cm，每穴播 4 粒种子，出苗后每穴定苗 2 株。依据待测可育系开花期调整播种日期，使之与母本不育系开花期相遇。6.2.3 田间去杂6.2.3.1 母本田间去杂出苗期依据下胚轴颜色（绿色或紫色）去杂，第二个复叶期依据叶形、茸毛色去杂，始花期依据花色、茸毛色去杂，始花期对开放的花朵手检花粉育性，拔出可能混杂的花粉可育植株。6.2.3.2 父本田间

10、去杂出苗期依据下胚轴颜色去杂，第二个复叶期依据叶形、茸毛色去杂，始花期依据花色、茸毛色去杂。6.2.4 异交传粉6.2.4.1 传粉环境保护父母本开花期之前，鉴定小区田间管理同大豆生产田一致；开花前一周，喷施对蜂类毒性小的杀虫剂，预防开花期田间害虫。整个开花期，尽量减少农事操作，禁止喷施杀虫剂，避免影响野生昆虫传粉。6.2.4.2 开花期昆虫传粉父母本整个开花期，利用野生传粉昆虫作为传粉媒介，完成花粉从可育父本到不育母本的异交授粉，达到异交结实。6.2.5 杂交荚调查在 3 个地点，调查各个小区母本不育系单株结荚数，取样方法为，在小区中间行不缺苗中间位置连续取 5 株记录结荚个数，淘汰性状不一

11、致的不育系单株。7 异交传粉结实性比较分析7.1 差异显著性分析整理 6.2.5 结荚数数据，利用 SPSS20.0 统计分析各个可育材料对应不育系母本结荚数差异显著性，此差异代表可育系间异交传粉能力的强弱。7.2 排序比较利用 7.1 分析结果，确定各个待测材料母本结荚数与高、中、低对照母本结荚数间差异显著性，排列各个材料异交传粉结实性高低顺序，并参照表1确定父本异交传粉结实性高低。7.3 分类7.3.1 高异交传粉结实性 此类待测材料对应母本结荚数极显著或显著高于高异交结实性对照，或与高异交结实性对照比较无显著差异，参照附录 B 表 B.1。7.3.2 中高异交传粉结实性此类待测材料对应母

12、本结荚数极显著或显著低于高异交结实性对照，且极显著或显著髙于中异交结实性对照，参照附录 B 表 B.1。7.3.3 中异交传粉结实性此类待测材料对应母本结荚数极显著或显著低于高异交结实性对照，但与中异交结实性对照比较无显著差异，并且极显著或显著髙于低异交结实性对照，参照附录 B 表 B.1。7.3.4 中低异交传粉结实性此类待测材料对应母本结荚数极显著或显著低于髙和中异交结实性对照，但极显著或显著髙于低异交结实性对照，参照附录 B 表 B.1。7.3.5 低异交传粉结实性此类待测材料对应母本结荚数与低异交结实性对照比较无显著差异，或者极显著或显著低于低异交结实性对照，参照附录 B 表 B.1。

13、AA附录A （规范性）田间种植示意图图 A.1 给出了父母本田间种植示意图。3.0 m0.65m1 A 1 1 A 11 A 1. . . . . . .1 A 11 A 1行1 行2 行31.95m小区-12 A 2 2 A 22 A 2. . . . . . .2 A 22 A 2行5 行6 行73 A 3 3 A 33 A 3. . . . . . .3 A 33 A 3行9 行10 行11小区-n小区-2区组3.0 m1 A 1 1 A 11 A 1. . . . . . .1 A 11 A 1行1 行2 行3小区-12 A 2 2 A 22 A 2. . . . . . .2 A 22 A 2行5 行6 行73 A 3 3 A 33 A 3. . . . . . .3 A 33 A 3行9 行10 行11小区-n小区-2区组0.8 m图A.1 田间种植示意图BB附录B （规范性）待测父本异交结实性分类对照表表 B.1 给出了待测父本异交结实性高低分类。表 B.1 待测父本异交结实性分类对照表父本异交结实性分类母本结荚数与父本