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文档简介

1、天然药物中各类化学成分的检识方法l、挥发油和油脂(1)油斑试验:将试液滴于滤纸上,能自然挥发或加热后挥发者可能为挥发油。   如果出现持久性的透明斑点,可能为油脂。(2)香草醛浓HCI试验,将试液滴于滤纸上,喷洒试剂如显紫、兰、黄、红色可能含挥发油。 (对某些酚类、萜类、甾体等皆可显色)(3)丙烯醛试验:将试液3滴和倍量无水硫酸钠固体置于试管中,直火加热,甘油和甘油脂类能生成有刺激臭味的丙烯醛。(可用斐林试剂检查)2、蒽醌类(4)碱液试验(Borntragers 反应):取试液lml加1NaoH溶液lml,即呈红一红紫色,亦有呈兰色者,表示可能有羟基蒽醌。(5)醋酸镁试验:

2、取试液0.5ml,加人试剂23滴,若有羟基蒽醌类,则会出现橙、兰、紫色等。颜色随羟基数目、位置而定。3、香豆素(6)荧光试验:羟基香豆素类的极稀水溶液发生兰色荧光,加氨后呈黄色荧光。(7)异羟肟酸铁反应:取1N盐酸羟胺甲醇液1,置于小试管中,加试液数滴,加2N氢氧化钾甲醇液使溶液呈碱性,在水浴上煮沸2分钟,冷却后滴加5HCI使溶液呈酸性,加1FeCL3溶液l2滴,若出现紫红色,表现有香豆素或其它酯类,内酯化合物。(8)取试品的乙醇液2m1,加1NaOH液1m1,于沸水浴上加热10分钟(若有沉淀过滤除去),于澄明液中加2HCI液酸化后,溶液变混浊,为内酯、香豆素类反应。  注可同时取醇

3、浸液2m1,不加试剂对照观察。4、黄酮类(9)盐酸镁粉反应:试品的乙醇溶液,加人浓盐酸5滴及少量镁粉,在沸水浴上加热l2分钟,如呈现红色,表明含有游离黄酮类化合物,如不加镁粉只加浓盐酸即显红色者,可能为花青素。注多数黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇显橙色紫红,黄酮甙及黄酮醇甙反应不明显,查耳酮、橙酮及儿茶素类无反应。(10)铝盐络合反应:取试样甲醇液1,滴加1AICI3甲醇溶液,呈深黄色,放置后出现黄色荧光者为3,5一位游离羧基或邻二羟基黄酮类。(11)氨熏试验:将滴有试液的滤纸,加上一滴氨水,立即置紫外灯下观察,有极明显的黄色荧光斑点。5、糖、低聚糖和甙类(12)Molish反应:取供试液1m1

4、加10一萘酚12滴,振摇,倾斜试管,沿管壁加人浓硫酸1m1界面出现紫红色环,表示含糖甙类。(13)斐林反应:取试品水溶液1-2m1,加入碱性酒石酸铜试剂lml,沸水浴上加热23分钟,产生棕红或砖红色沉淀(氧化亚铜),表示含还原糖。 试液与10硫酸煮沸510分钟,冷后以NaOH液中和,再加斐林试剂1m1沸水浴加热23分钟,产生的沉淀比水解前多,表示含多糖和甙。6甾体、三萜皂甙(14)皂甙泡沫试验:取试品的中性或弱碱性热水溶液2ml,用力振摇1分钟,如产生多量泡沫,放置10分钟后泡沫没有显著消失即表明含有皂甙成分。另取两支试管,各加试品热水溶液1ml,一管内加5NaOH液2ml溶液。另一

5、管加人5盐酸溶液2m1,将两试管用力振摇一分钟观察两管出现泡沫情况,如两管的泡沫高度相似,表明为三萜皂甙,如含碱液管比含酸液管的泡沫高达数倍,表明有团体皂甙。(15)浓硫酸醋酐反应(LiebemannBurchard反应)取试品少许置白瓷板上,加入醋酐23滴,沿白瓷板加入一微滴(用毛细管加入)浓硫酸,交置面出现红色,渐变为紫一兰一绿色等,最后退色。(三萜皂甙最后变兰,甾体皂甙最后变绿色)(16)氯仿一浓硫酸试验(Salkowshi反应)将2m1试品的氯仿液,置于试管中,沿管壁滴加浓流酸2m1,氯仿层出现红色,硫酸层有绿色荧光。(如试品不是氯仿溶液,则需将其蒸干,再加2m1氯仿溶解)。注如泡沫反

6、应明显,里伯曼反应红色不明显,可取糖,多糖及甙的水解液置分液漏斗中,加等量乙醚振摇提取,分出乙醚液,加无水硫酸钠少量脱水,挥去乙醚,再作里伯曼反应。7、有机酸(17)pH试纸检查(pH3以下可能含有机酸)(18)取试液少许加5AgN03试剂,出现白色沉淀(在毛细管中作)。(19)溴酚兰试验:将试液滴于滤纸上,喷洒0.1溴酚兰的乙醇液立即在兰色背景上显黄色斑色。    8、酚类与鞣质    (20)三氯化铁试验,取中性或酸性液3滴,置试管中,加1FeCL3溶液1滴,出现兰、绿、紫色,表明可能含有酚类或鞣质(必要时可加热)。(21)明胶沉

7、淀试验,取供试品水溶液,过滤,加入明胶试液l2滴,出现混浊或白色沉淀可能有鞣质。(22)取试液lml,加0.1盐酸小檗碱溶液23滴,如变混浊有沉淀表明可能有鞣质。(23)于滤纸上滴加试液,用三氯化铁铁氰化钾试剂喷洒,有明显兰色,表明有酚类存在。 9、生物碱(24)试品酸性水溶液加碘化铋钾试剂产生棕色沉淀或混浊为阳性反应。(25)试品酸性水溶液,加碘一碘化钾试剂产生橙红色沉淀或混浊为阳性反应。    (26)试品中性水溶液与苦味酸试剂作用产生黄色沉淀,或混浊为阳性反应。(27)试品酸性水溶液加磷钨酸试剂产生白色沉淀或混浊为阳性反应。 10、强心甙

8、    (28)亚硝酰铁氰化钠反应(1egal反应):将试品溶于23滴吡啶中,加入03亚硝酰铁氰化钠溶液12滴,再滴加10NaOH溶液呈红色,渐渐消退。(29)3、5二硝基苯甲酸试验(Kedde氏反应),将试品少许加乙醇数滴溶解,加入Kedde试剂,呈紫色。 注:(28)、(29)为五元不饱和内酯环反应。 三氯化铁冰醋酸反应  (Keller-Kiliani反应) 取试液lml加0.5FeCl3,醋酸溶液1m1,沿管壁滴加H2SO41m1,二液面间出现棕色环(或其它颜色),冰醋酸层呈绿色兰色。(2脱氧糖反应,杂质多时不明显,最好分离纯化后再作)注:甾体母核反应见(15)、(16)。11、蛋白质、多肽及氨基酸(31)双缩尿  (Biuret)试验:取试样1,加入1NaOH溶液l2滴,滴

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