食品中亚硝酸盐的测定

1、食品中亚硝酸盐的测定（盐酸萘乙二胺分光光度法）一、实验目的1.明确亚硝酸盐在食品中的作用以及限量标准。2.掌握盐酸萘乙二胺法测定食品中亚硝酸盐的原理、操作步骤、注意事项二、实验原理样品经沉淀蛋白质，除去脂肪后，在弱酸条件下硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色的染料，与标准系列比较定量。 三、仪器1. 722分光光度计若干，提前20min打开预热2. 组织绞碎机，菜刀，砧板1-2套3. 50mL烧杯 500mL烧杯 3L大烧杯 2个/组1个/组2个4. 电炉2个5. 托盘天平1个/组6. 200mL容量瓶 500mL容量瓶 1个1个/组7. 恒温水浴锅1-2个8. 25m

2、L具塞比色管 10个/组9. 滴管，漏斗，滤纸，吸小球，1个/组10. 玻璃棒，温度计，标记笔，标签纸若干四、试剂（所用试剂，除另有规定外，均为分析纯试剂。）1.亚铁氰化钾溶液：称取106.0g亚铁氰化钾K4Fe6(CN)3H2O，用水溶解后，稀释至1000mL。分装，1瓶/大组2乙酸锌溶液：称取22.0g乙酸锌Zn(CH3C00)22H20，加3 mL冰乙酸溶于水，并稀释至100mL。分装，1瓶/大组3、饱和硼砂溶液：称取5.0g硼酸钠(Na2B0710H20)，溶于100 mL热水中，冷却后备用。分装，1瓶/大组4、对氨基苯磺酸溶液(4g/L)：称取0.4 g对氨基苯磺酸，溶于100 mL

3、 20的盐酸中，置棕色瓶中混匀，避光保存。分装，1瓶/大组5、盐酸萘乙二胺溶液（2g/L）：称取0.2克盐酸萘乙二胺，溶于100毫升水中，避光保存。有致癌作用分装，1瓶/大组6、亚硝酸钠标准溶液（0.2g/L）：精密称取0.1000g于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠，加水溶解移入500ml容量瓶中，并稀释至刻度。此溶液每ml相当于200g亚硝酸钠。分装，1瓶/大组7、亚硝酸钠标准使用液（0.2g/mL）：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液5.00毫升，置于200毫升容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于5微克亚硝酸钠。分装，1瓶/大组8. 蒸馏水1瓶/组五、实验步骤1、样品的处理：（1）取样

4、：取适量的火腿肠，放入搅碎机内搅碎。准确称取5.0克经绞碎、混匀的样品，置于50毫升烧杯中。（2）沉淀蛋白质：加12.5mL硼砂饱和溶液，搅拌均匀，以70左右的水约300mL将样品洗入500mL容量瓶中，置沸水浴中加热15min，取出后冷却至室温。一面转动一面加入5毫升亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5mL乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质，（3）过滤：加水定容，放置0.5h，除去上层脂肪，清液用滤纸过滤，弃去初滤液30mL，滤液备用。 2 标准曲线的绘制精密吸取0.00, 0.20, 0.40, 0.60, 0.80, 1.00, 1.50, 2.00, 2.50mL亚硝酸钠标准使用液(相当于0、1、2、

5、3、5、7、10、12.5g亚硝酸钠)，分别置于50mL比色管中.各加2mL对氨基苯磺酸溶液(4g/L)，混匀，静置3-5min后各加入1mL 0.2盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混匀，静置15min，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度A，绘制标准曲线。 3 试样的侧定精密吸取按40.0mL样液于50mL比色管中。以下按标准曲线测定方法依次加入其它试剂。加水稀释至刻度，混匀，静置15min，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度A。同时做试剂空白。 六、数据记录管号012345678样液A538七、数据处理按下式计算：AX = 1000 v1 m 1000 V2 式 中 :X 试样中亚硝酸盐的含量， mg/kg；V1 测定时所取溶液体积，mL；V2 试样处理液总体积，mL； m 试样质量，g；A试样测定液中亚硝酸盐的质量，g；部分食品中亚硝酸盐的限量标准（以NaNO2计）品 名 限量标准 mg/kg 食盐（精盐）、牛乳粉 2 香肠（腊肠）香肚、酱腌菜、广式腊 肉 20 鲜肉类、鲜鱼类、粮食 3 肉制品、火腿肠、灌肠