石榴皮提取物的大孔树脂纯化及其抗氧化性能

1、第25卷增刊1农业工程学报V ol.25Supp.1 1422009年6月Transactions of the CSAE Jun.2009石榴皮提取物的大孔树脂纯化及其抗氧化性能张立华1,2,张元湖1,安春艳1,杨雪梅1(1.作物生物学国家重点实验室,山东农业大学生命科学学院,泰安271018;2.枣庄职业学院农学系,枣庄277019摘要:为开发石榴皮资源提供技术支持,从D101、AB-8和DA-2013种大孔吸附树脂中筛选出D101树脂,进一步研究D101对石榴皮提取物中多酚和总黄酮的纯化工艺。所得最佳纯化工艺为:上柱液浓度5m g/mL,pH5,上柱液体积180mL,上柱液流速80mL/

2、h,以60%乙醇溶液为洗脱液,洗脱流速80mL/h,洗脱液体积为100mL。在此条件下,多酚和总黄酮的含量由30.43%和17.12%分别提高到53.55%和35.71%。同时对纯化前后的抗氧化活性进行了比较研究。结果表明,石榴皮提取物经纯化后清除二苯基三硝基苯肼自由基(DPPH·和抗油脂过氧化能力都强于粗提物。关键词:石榴皮,多酚,黄酮,大孔树脂,纯化,抗氧化作用doi:10.3969/j.issn.1002-6819.2009.z1.029中图分类号:Q946.84文献标识码:A文章编号:1002-6819(2009Supp.1-0142-06张立华,张元湖,安春艳,等.石榴皮提

3、取物的大孔树脂纯化及其抗氧化性能J.农业工程学报,2009,25(Supp.1: 142-147.Zhang Lihua,Zhang Yuanhu,An Chunyan,et al.Purification technology of extracts from pomegranate peel with macroporous absorbent resin and their antioxidant abilityJ.Transactions of the CSAE,2009,25(Supp.1:142-147.(in Chinese with English abstract0引言多酚和

4、黄酮类化合物为石榴皮的主要活性成分,其中多酚约占石榴皮干质量的10%20%1,总黄酮约占6%8%2。国内外大量研究表明,石榴皮提取物具有多种生物活性,表现极强的清除多种自由基作用3和抗油脂氧化作用4,具有抑制低密度脂蛋白的氧化和抑菌活性5,还能够防止动脉粥样硬化、降血脂降血压、抑制血管紧张素转换酶活性等对血液循环系统的保护作用6,能抑制乳腺癌、前列腺癌和口腔癌等癌细胞的增生等功能7。因此,石榴皮多酚和黄酮有望在食品、医药和化妆品等领域得到广泛应用。石榴皮提取物的生物活性与其中多酚和黄酮的纯度具有显著的相关性,石榴皮粗提物中除多酚和黄酮之外还含有其他成分,因此,为提高石榴皮提取物的利用价值,粗提

5、物需要进一步的纯化。大孔树脂具有选择性强、吸附容量大、吸附速度快、解吸容易、成本低等优点,近年来在天然产物分离纯化中的应用越来越多,如董娟娥等8用大孔树脂纯化杜仲叶黄酮,大孔树脂还被用于纯化石榴皮多酚9和茶树花多酚10,均具有较理想的纯化效果。由于多酚和黄酮在化学特性上存在较大的相似性,在用乙醇等有机溶剂从石榴皮中提取多酚或黄酮时,2种收稿日期:2008-07-28修订日期:2009-05-08基金项目:山东省教委科技计划项目(No.32476及泰安市大学生科技创新计划项目(No.2007D004作者简介:张立华(1969-,男,山东枣庄人,博士研究生,主要从事植物活性成分的提取分离及农产品保

6、鲜贮藏研究。泰安作物生物学国家重点实验室,山东农业大学,271018。Email:chinazhanglh通讯作者:张元湖(1963-,男,教授,博士,博士生导师,主要从事植物次生代谢及分子调控研究。泰安作物生物学国家重点实验室,山东农业大学,271018。Email:yhzhang9 成分都会被提取出来,张茜等9在纯化石榴皮提取物时,只得到了多酚成分,忽略了黄酮成分,造成资源的浪费。如能同时提取和纯化多酚和黄酮,可使石榴皮资源得到充分利用,具有重要的意义。但迄今为止,用大孔吸附树脂同时纯化石榴皮多酚和总黄酮的研究还未见报道。本文以兼顾多酚和总黄酮的提取纯化为宗旨,以石榴皮的乙醇提取物为原料,

7、选用被广泛使用的D101型大孔吸附树脂对其纯化工艺进行了研究,为大规摸纯化石榴皮多酚和黄酮类化合物提供一种新的生产工艺。同时对石榴皮提取物纯化前后的抗氧化活性进行了比较研究,以期为石榴皮多酚和黄酮的开发利用提供理论参考。1材料与方法1.1材料石榴果皮:新鲜的石榴果实采自山东枣庄,剥取的石榴皮晾干,粉碎后过40目筛备用。大孔树脂:经预处理的DA201、D101和AB-8等大孔树脂购自天津海光化工有限公司。1.2仪器与试剂UV-2550紫外可见分光光度计(日本岛津,旋转蒸发器RE-52AA(上海亚荣生化仪器厂,实验室高剪切分散乳化机FA25(上海弗鲁克流体机械制造有限公司。玻璃层析柱(1.5cm&

8、#215;20cm。DPPH·、儿茶素、没食子酸和芦丁标准品均为Sigma 公司产品,其他试剂均为国产分析纯。1.3分析方法1.3.1多酚含量测定采用Folin-Ciocalteu试剂比色法4,以没食子酸(GA为标准品。1.3.2黄酮含量测定采用Al(NO33-NaNO2比色法2,以芦丁为标准品。增刊张立华等:石榴皮提取物的大孔树脂纯化及其抗氧化性能1431.3.3油脂过氧化值测定参照文献11中的方法,准确称取2g 混匀(必要时过滤的样品,置于250mL 碘瓶中。加30mL 三氯甲烷-冰乙酸(三氯甲烷冰乙酸=23,V /V 混合液,使样品完全溶解。加入1mL 饱和碘化钾溶液,紧密塞好

9、瓶塞,并轻轻振摇0.5min ,然后在暗处放置3min 。取出加100mL 水摇匀,立即用0.002mol/L 硫代硫酸钠标准液滴定。至淡黄时,加1mL 淀粉指示液,继续滴定至蓝色消失为终点。取同量三氯甲烷冰乙酸溶液、碘化钾溶液、水,按同一做法,做试剂空白试验。过氧化值计算公式:X =(A -B ×N ×0.1269×100/M (1式中X 样品的过氧化值,%;A 样品消耗硫代硫酸钠标准溶液毫升数;B 试剂空白消耗硫代硫酸钠标准溶液毫升数;N 硫代硫酸钠标准溶液的摩尔浓度;M 样品质量,g ;0.12691mol/L 硫代硫酸钠1mL 相当于碘的克数。1.3.4D

10、PPH自由基清除能力测定参照Yokozawa 文献12中的方法并加以改进,操作方法为:向3mL 吸光度值为1.5的DPPH ·甲醇溶液中加入一定量的试样(空白对照用等量重蒸水代替,总体积用蒸馏水补充至4mL 用力摇匀后于室温下放置30min ,再用光径1cm 比色皿中测定DPPH ·混合溶液在517nm 处吸光值(A 517,用2.5mL 甲醇与0.5mL 试样混合液调仪器零点,以扣除试样本身颜色的影响。自由基清除率(%=(A 0-A 样·A 0-1×100(2式中A 0空白对照的吸光值;A 样试验样品的吸光值。每种试样加入一系列的量,以作出曲线方程求出

11、达到50%清除率时所需样品的浓度(即IC 50,用IC 50来比较不同样品对DPPH ·自由基清除能力的大小。1.4试验方法1.4.1多酚和黄酮的提取工艺 1.4.2树脂纯化工艺 1.4.3树脂静态吸附与解吸试验分别称取DA201、D101和AB-8型3种预处理过的大孔吸附树脂各2g ,置于100mL 锥形瓶中,并加入50mL 已知浓度为5mg/mL 的石榴皮粗提物样品液,在25恒温水浴锅中吸附过夜,取一定量样品液用于测定其中多酚和黄酮的含量;静态吸附后,过滤除去石榴皮粗提物溶液,树脂用蒸馏水洗净,置于100mL 锥形瓶中,加入50mL 无水乙醇,于相同条件下解吸,取一定量解吸液测其

12、中多酚和黄酮的含量,并按下面的公式计算吸附量、吸附率、解吸率、回收率,以比较不同树脂对石榴皮多酚和黄酮的吸附和解吸特性。吸附量(mg/g=(0-e ×V 0/m (3吸附率(%=(0-e ×100/0(4解吸率(%=d ×100/(0-e (5回收率(%=d ×100/0(6式中0提取物溶液中多酚或黄酮质量浓度,mg/mL ,e 上清液中多酚和黄酮的质量浓度,mg/mL ,d 解吸液的多酚和黄酮质量浓度,mg/mL ,V 0提取物溶液体积,mL ,m 树脂质量,g 。1.4.4树脂吸附条件的优化1上柱液pH 值对吸附效果的影响将预处理好的D101树脂,装

13、入1.5cm×20.0cm 的层析柱中,L/D =13。用水洗涤平衡后上柱,上柱条件:流速160mL/h ,粗提物初始浓度5.0mg/mL ,上柱液体积V =160mL ,上柱液pH 值分别为2.0、3.0、4.0、5.0、6.0。检测漏出液多酚和黄酮含量,考察上柱液pH 值对树脂吸附石榴皮多酚和黄酮的影响。2上柱液浓度对吸附效果的影响吸附条件:最佳pH 值由1.4.4中1确定,粗提物样液初始浓度分别为0.4、1、1.6、2.2、2.8、3.4、5mg/mL 。按照1.4.3下条件进行静态吸附,检测上清液多酚和黄酮含量,考察上样液浓度对树脂吸附石榴皮多酚和黄酮的影响,分别以上样液粗提

14、物浓度为横坐标、多酚和黄酮吸附量为纵坐标绘制静态吸附曲线。3树脂的静态及动态吸附特性称取250mg 石榴皮提取物,用70%乙醇溶解并定容至50mL ,配制成浓度为5mg/mL 的溶液,置于100mL 锥形瓶中,加入5g 预处理过的D101大孔吸附树脂,25水浴吸附,每隔1h 取上清液,测定其中多酚和黄酮的质量浓度,绘制吸附动力学曲线。由1.4.4确定的最佳吸附条件进行上柱,分部收集漏出液(每管收集20mL,测定漏出液中多酚和黄酮含量,以上柱液体积mL 为横坐标,漏出液多酚和黄酮浓度e 为纵坐标,绘制动态穿透吸附曲线。1.4.5树脂洗脱条件的优化1乙醇浓度对洗脱的影响称取250mg 石榴皮提取物

15、,用70%乙醇溶解并定容至50mL ,配制成浓度为5mg/mL 的溶液,置于100mL 锥形瓶中,加入5g 预处理过的D101大孔吸附树脂,25水浴过夜吸附。分别用浓度为20%、40%、60%、70%、80%、100%乙醇溶液洗脱。测定洗脱液中多酚和黄酮的含量,考察乙醇浓度对洗脱效果的影响。2洗脱液体积对洗脱的影响按1.4.4确定的最佳吸附条件进行上柱,吸附之后,用1BV 水快速淋洗树脂柱。洗脱条件:洗脱液由1.4.4中1确定,洗脱流速80mL/h 。分部收集洗脱液,测定多酚和黄酮的含量,绘制动态解吸曲线,考察洗脱液体积对洗脱效果的影响。3洗脱流速对洗脱的影响按1.4.4确定的最佳吸附条件进行

16、上柱,吸附之后,用40mL 水快速淋洗树脂柱。洗脱条件:洗脱液由1.4.4中1确定,洗脱液体积由1.4.4中2确定,洗脱流速分别为80、160、240、320mL/h 。收集洗脱液,测定多酚和黄酮的含144农业工程学报2009年量,计算解吸率,考察洗脱流速对洗脱效果的影响。1.4.6花生油强制氧化处理采用SCHALL 烘箱法,准确称量50g 花生油置于锥形瓶中,将粗提物、纯化物和儿茶素对照等样品分别按1mg/g 的用量加入到油脂中,同时设置空白对照,然后用高剪切分散乳化机乳化3min 使样品与油脂充分混匀,之后置于(65±1的烘箱内强化氧化,每天定时搅拌一次,并交换它们在烘箱中的位置

17、,每隔24h 取样1次,测定其过氧化值。2结果与分析2.13种树脂的吸附与解吸特性的比较评价一种树脂性能的优劣,主要看它对某种物质的吸附量和解吸率2个参数,前者反映树脂的吸附能力,后者反映吸附之后能否被充分洗脱下来。从表1可以看出对于多酚和黄酮,D101型大孔吸附树脂在吸附容量上都优于其他2种树脂;吸附率也最高,达到33.96%和33.13%;对多酚的解吸率最高,对黄酮的解吸率较低,这可能与其适合的表面结构、较高的比表面积及较小的孔径有关。综合考虑多种因素,3种树脂中D101是适合同时纯化石榴皮多酚和黄酮的树脂,因此,选择D101树脂来同时纯化石榴皮中的多酚和黄酮。表13种树脂的物理性能及吸附

18、与解吸特性的比较Table 1Comparison of physical and adsorption-desorption properties of three resins树脂型号比表面积/m 2·g -1平均孔径/nm化合物吸附能力/mg·g -1吸附率/%解吸率/%回收率/%多酚 5.7930.5383.2325.41DA20118010-13黄酮 1.9323.8585.7540.92多酚 6.4433.9687.6729.78D101480-55010黄酮 2.6933.1377.3551.26多酚 2.4430.7681.7425.14AB-8480-52

19、013-14黄酮5.8324.0086.3741.472.2D101树脂吸附条件的优化2.2.1上样液pH 值对吸附效果的影响 由图1可以看出,样液pH 值为5时,D101树脂对多酚和总黄酮的吸附容量均达到最大,这是由于在弱酸性条件下,具有酚羟基结构的多酚和黄酮均以分子状态存在,可以凭借范德华力与树脂发生物理吸附作用13,但是酸性也不能过大,否则吸附容量反而会下降。 图1上样液pH 值对吸附效果的影响Fig.1Effects of sample pH values on adsorption经测量粗提物溶液的pH 值为5.32,与试验所得最佳pH 值接近,因此,粗提物溶液无需调pH 值,直接上

20、柱。2.2.2上样浓度对吸附效果的影响图2为25时D101树脂对多酚和黄酮的吸附等温线,即上样液浓度对吸附效果的影响,对多酚和黄酮的吸附量都随着上样液浓度增大而增大。在上样浓度较低时增长的速度较快,随上样浓度提高增长的速度减慢,上样液浓度过大可能使溶液过饱和而成为糊状,堵塞树脂孔隙而影响吸附和解吸13。因此,上样液粗提物浓度为5mg/mL是较适宜的浓度。图2上样液浓度对吸附效果的影响Fig.2Effects of sample concentration on adsorption2.2.3上样液流速对吸附效果的影响树脂装柱体积40mL ,流速分别为40、80、160、240mL/h ,测定室

21、温条件下D101树脂对石榴皮中多酚和黄酮的动态吸附效果,结果发现,随着上样液流速的增加,多酚物质的吸附量反而降低,这是由于当上样液流速过大时,多酚和黄酮还未能扩散到树脂的内表面,就被冲出柱子,从而造成吸附量下降。但流速过低又会影响到生产效率,会使生产周期延长,提高生产的成本。综合考虑,上料液流速以80mL/h 较为适宜。2.2.4D101树脂的静态及动态吸附特性由图3静态吸附动力学曲线可以看出,D101树脂对粗提物中的多酚的吸附量在2h 时即趋于饱和,而对黄酮的吸附量在4h 时才趋于饱和;这表明D101树脂与两类物质的亲和力有差别,对多酚的吸附力更强。为同时提高两类物质的吸附量,在静态吸附时吸

22、附时间宜选择5h ,使多酚和黄酮都能够充分吸附。当上柱条件为流速160mL/h 、粗提物浓度5mg/mL 、增刊张立华等:石榴皮提取物的大孔树脂纯化及其抗氧化性能145pH5.3时,其动态穿透吸附曲线如图4所示,当上柱液体积为180mL 时,漏出液中多酚的浓度基本达到动态平衡,而黄酮在160mL 时就达到动态平衡。因此选择180mL 的粗提物溶液上柱。 图325下多酚和黄酮的静态吸附动力学曲线Fig.3Static curve of adsorption kinetics of polyphenols andflavonoids at 25 图4D101树脂动态穿透吸附曲线Fig.4Curve

23、 of dynamic breakthrough adsorption of D101resin2.3D101树脂洗脱条件的优化2.3.1洗脱剂浓度对洗脱效果的影响 以不同浓度的乙醇溶液为洗脱液,以洗脱液中多酚和黄酮的浓度做指标,考察解吸液浓度对解吸效果的影响,结果见表2,乙醇溶液的体积分数为60%时,洗脱液中多酚含量为最高;以80%乙醇溶液作解吸液时,黄酮含量达到最高。60%的乙醇洗脱时洗脱液中黄酮含量与最高值相差较小,故选择体积分数60%乙醇溶液为洗脱液。表2不同浓度乙醇对石榴皮多酚和黄酮的解吸效果Table 2Desorption efficiency of different conc

24、entration of ethanol solvent on polyphenol and flavonoids of pomegranate peel乙醇溶液浓度(V V/%多酚/mg·mL -1总黄酮/mg·mL -1200.710.2140 1.710.7460 2.62 1.2570 2.08 1.2580 1.96 1.271001.061.092.3.2洗脱液体积对洗脱效果的影响由图5可以看出,2种成分解吸的趋势十分一致,洗脱峰较集中、无拖尾。60%乙醇仅20mL 时就开始洗脱石榴皮多酚和黄酮,到40mL 时洗脱多酚的浓度就已达到最大值为0.325mg/mL

25、,以后洗脱速率开始下降,当洗脱液达100mL 时石榴皮多酚和黄酮基本洗脱完全。被解吸的多酚和黄酮主要集中于2080mL ,100mL 可将多酚和黄酮完全洗脱,洗脱液用量少、洗脱效率高。图5D101树脂动态解吸曲线Fig.5Dynamic elution curve of D101resin2.3.3洗脱液流速对洗脱效果的影响流速对洗脱效果的影响结果见图6。流速对洗脱效果有明显的影响,两者成反比例关系,这可能是流速对洗脱剂与吸附在树脂上的石榴皮多酚和黄酮间的交换速率进行影响所致。流速为40mL/h 时,解吸率接近100%;而流速为160mL/h 时,解吸率只有70%。这可能是因为流速太快,洗脱剂

26、未能与被吸附的多酚和黄酮进行充分作用而将其从大孔树脂的吸附位点上置换出来,而流速太慢会使作业周期延长。因此,从本试验来看,60%乙醇洗脱流速宜控制在80mL/h为宜。图6洗脱液流速对洗脱效果的影响Fig.6Effect of elution rate on elution efficiency2.4D101大孔树脂对石榴皮多酚和黄酮的纯化效果按照上述试验确定的最佳上柱和洗脱条件对粗提物进行纯化验证试验,结果见表3。粗提物中多酚和黄酮的含量为30.43%和17.12%,经纯化之后分别增加至53.55%和35.71%,纯度分别提高了23.12和18.59个百分点。从上述试验结果可看出,石榴皮中多酚

27、和黄酮具有相似的吸附和解吸特性,采用大孔树脂很难将二者分离,但可将二者同时纯化。2.5石榴皮粗提物及纯化物的抗氧化活性2.5.1对DPPH 自由基的清除能力DPPH ·(二苯三硝基苯肼是一种有机自由基,具146农业工程学报2009年 有稳定性好、操作简便等优点,近年来被广泛应用于评价物质的抗氧化活性或筛选自由基清除剂。图7所示为石榴皮提取物纯化前后清除DPPH ·自由基能力的比较,从图中的结果看出在试验体系中相同的添加量,纯化物对DPPH ·自由基的清除率比粗提物高,但比儿茶素低。为更科学地比较不同样品对自由基的清除力,依据它们的曲线方程推算了各自的半抑制浓度(I

28、C 50,分别为粗提物29.9g/mL 、纯化物25.8g/mL 、儿茶素对照15.2g/mL ,IC 50的值越小自由基清除力越强,因此,它们对DPPH ·自由基清除能力的强弱顺序为:儿茶素对照>纯化物>粗提物。另外,同一样品随浓度增加自由基清除率提高,也表现出剂量效应关系。表3石榴皮及其提取物中多酚和黄酮的含量Table 3Contents of polyphenols and flavonoids in pomegranatepeel and its extracts %活性成分多酚黄酮石榴皮16.54 6.75粗提物30.4317.12纯化物53.5535.71

29、图7不同样品对DPPH ·自由基清除力的比较Fig.7Comparisons of scavenging activity on the 1,1-diphenyl -2-picrylhydrazyl free radical (DPPH ·of different samples2.5.2对食用油脂的抗氧化作用脂质过氧化是导致油脂酸败的主要原因。油脂在氧化初期主要形成氢过氧化物,从而导致其过氧化值(POV 的增高,因此,POV 是油脂过氧化程度的表征,POV 越高表明油脂的过氧化程度也就越高。图8所示为几种样品添加量为1mg/g 抗花生油氧化作用的比较,在65强化氧化的条件

30、下,随时间的延长各处理的POV 都不断升高,粗提物、纯化物和儿茶素处理的POV 都比空白对照低,三者均具有抗花生油氧化作用,其中纯化物的抗氧化作用明显比粗提物强,但比儿茶素样品弱。即它们抗油脂氧化的强弱顺序为:儿茶素>纯化物>粗提物。张茜等9以猪油作底物研究了石榴皮提取物的抗氧化作用,也表明石榴皮提取物具有较好的抗油脂氧化作用。石榴皮提取物经大孔树脂纯化之后抗油脂氧化能力明显提高,这与纯化物中多酚和黄酮含量的提高密切相关。王芳等14用AB-8型大孔树脂纯化桑叶黄酮提取物,纯化后也提高了对猪油的抗氧化作用。图8在强化氧化条件下花生油过氧化值的变化Fig.8Variations of

31、peroxide value (POVof treated peanut oilsamples under accelerated conditions3结论1从3种树脂中筛选出D101型树脂;上柱条件为:上柱液浓度5mg/mL ,最佳pH5,上柱体积180mL ,上柱液流速80mL/h ;解吸条件为:洗脱液选择体积分数60%乙醇溶液,洗脱液流速80mL/h ,洗脱液体积为100mL 时可充分洗脱。2纯化后,多酚含量由30.43%提高到53.55%,黄酮含量由17.12%提高到35.71%,二者纯度分别提高了23.12和18.59个百分点。3纯化物清除DPPH 和抗油脂过氧化能力明显增强,这与

32、纯化后多酚、黄酮含量提高相一致,表明多酚和黄酮是石榴皮提取物发挥抗氧化能力的主要物质。参考文献1贾冬英,姚开,谭薇,等.石榴皮多酚提取条件的优化J.林产化学与工业,2006,26(3:123-126.2许宗运,蒋慧,吴静,等.石榴皮和石榴渣总黄酮含量的测定J.中国农学通报,2003,19(3:73-75.3Zhang Lihua,Li Lingling ,Zhang Yuanhu,et al.In vitroantioxidant activities of fruits and leaves of pomegranateJ.Acta Horticulturae ,2008,765:31-34

33、.4Iqbal S,Haleem S,Akhtar M,et al.Efficiency ofpomegranate peel extracts in stabilization of sunflower oil under accelerated conditions J.Food Research International,2008,41(2:194-200.5Negi P S,Jayaprakasha G K.Antioxidant and antibacterialactivities of Punicagranatum peel extractsJ.Journal of Food

34、Science,2003a ,68(4:1473-1477.6Singh R P ,Chidambara M K N ,Jayaprakasha G K.Studieson the antioxidant activity of pomegranate (Punicagranatum peel and seed extracts using in vitro modelsJ.Journal of Agricultural and Food Chemistry ,2002,50(1:8l -86.7Negi P S,Jayaprakasha G K,Jena B S.Antioxidant an

35、danti-mutagenic activities of pomegranate peel extractsJ.Food Chemistry ,2003b,80(3:393-397.8董娟娥,梁宗锁,张康健,等.大孔吸附树脂一次性分离杜仲叶中杜仲总苷和杜仲黄酮的研究J.农业工程学报,2006,22(7:154-158.9张茜,贾冬英,姚开,等.大孔吸附树脂纯化石榴皮多酚J.精细化工,2007,24(4:345-349.10黄阿根,董瑞建,谢凯舟.茶树花多酚大孔树脂纯化工艺研究J.农业工程学报,2007,23(9:239-245.增刊 张立华等：石榴皮提取物的大孔树脂纯化及其抗氧化性能 147

36、 11 汤章城 现代植物生理学实验指南M 科学出版社， 1999： 12，191192 12 Yokozawa T, Dong E, Natagawa T, et al. In vitro and in vivo studies on the radical 2 scavenging activity of teaJ. J Agric Food Chem, 1998, 46(6：21432150 13 李伯廷，王 湘，李小进大孔吸附树脂在天然产物分离 中的应用J中草药，1990，21(8：4244 14 王 芳，励建荣，蒋跃明桑叶黄酮的提取纯化及对油脂 抗氧化活性的研究J中国粮油学报，2006

37、，21（4）： 106121 Purification technology of extracts from pomegranate peel with macroporous absorbent resin and their antioxidant ability Zhang Lihua1,2, Zhang Yuanhu1, An Chunyan1, Yang Xuemei1 (1. State Key Laboratory of Crop Biology, College of Life Sciences, Shandong Agricultural University, Tai 271018, China; an 2. Department of Agronomy, Zaozhuang Vocational College, Zaozhuang 277019, China Abstract: From three kinds of macroporous adsorbent resins including D101, AB-8 and DA-201, D101 resin was selected as a suitable material to purify the polyph