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文档简介
1、Myricetin Inhibits Adipogenesis in Human Adipose Tissue-derived Mesenchymal Stem Cells 姓名 陈珺 学号 30 内容n 简介n 研究目的意义n 试验方法n 结果与分析n 结论简介n杨梅黄酮是一个在各种食物,包括葱内发现的主要类黄酮,浆果,葡萄,红酒。大量的研究已经表明,杨梅黄酮具有抗氧化,抗炎,和抗癌作用。然而,虽然杨梅素的各种功能已得到很好的研究中体内,的影响在脂肪干细胞分化杨梅素仍下落不明。间充质干细胞n间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC),是一种具有自我复制能力和多向分化
2、潜能的成体干细胞。这种干细胞能够发育成硬骨、软骨、脂肪和其他类型的细胞。研究目的意义n虽然杨梅黄酮对细胞有很多功能效果,但是不知道杨梅素对干细胞分化是否有作用。在这项研究中,在这项研究中,我们对人体脂肪间充质干细胞(hAMSCs)到杨梅素(1-30M)期间成脂分化,以确定调节杨梅素对hAMSCs的脂肪分化的影响。 试验方法n1、细胞培养试验方法n2、脂肪诱导 间充质干细胞生长至汇合前诱导分化。成脂分化诱导培养hAMSCs14天中脂肪诱导培养基。经6天后,将细胞培养于只含有10FBS和在-MEM培养基1mM的胰岛素,并且其目的是每3天更换一次。试验方法n3、油红染色原理:原理:利用染料易溶于脂质
3、的性质,证明组织脂肪含量的多少。脂肪是呈红色的试验方法n4、MTT法n(测定杨梅素抑制脂肪生长量) MTT法又称MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法 。 使用酶标仪在540720nm波长处测得吸光度值,这个可以间接反映出活细胞数量。试验方法n5、RNA提取和实时定量荧光PCR(测定脂肪细胞分化的影响) PCR的条件是在95下10min热启动,随后15s45个循环,6010s,7230s的条件下进行。每个mRNA和正常的对比后发现违反了RPLP(酸性核糖体磷蛋白大酸性核糖体磷蛋白大亚基亚基)基因表达水平。此实验重复两次。结果与分析n1、杨梅素对hAMSC生存能力的影响结果与分析n2、杨梅素对脂肪形成的影响结果与分析n2、杨梅素对甘油三酯在人类脂肪细胞间充干细胞的影响结果与分析n3、杨梅素减少脂肪细胞特异性基因表达结果与分析n3、杨梅素减少脂肪细胞特异性基因表达结论n研究结果表明,杨梅黄酮抑制脂肪细胞分化 ,在脂肪细胞分化中,表达和修饰PPAR-基因,主脂肪形成的转录因子,发挥关键作用。降低脂质液滴的数量的结果表明杨梅素抑制hAMSCs成脂分化。此外,这些结果提供了一种新的对hAMSC分化,此结果不仅更深入地了解杨梅素对脂肪分化的影响,而且对调控干细胞分化有一定影响。此外,理解杨梅素对脂肪细胞
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