1 1DNA重组技术的基本工具

1、1. 1 DNA重组技术的基本工具【例1】（05广东）以下有关基因工程的叙述，正确的是 （ ）A、基因工程是细胞水平上的生物工程 B、基因工程的产物对人类都是有益的C、基因工程产生的变异属于人工诱变 D、基因工程育种的优点之一是目的性强【例2】.下列关于限制酶的说法不正确的是（ ）A限制酶广泛存在于各种生物中，微生物中很少分布B限制酶的作用是用来提取目的基因C不同的限制酶切割DNA的切点不同 D一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列【例3】有关基因工程的叙述正确的是（ ）A限制酶只在获取目的基因时才用 B重组质粒的形成是在细胞内完成的C质粒都可以作为运载体 D蛋白质的氨基酸排列顺序可以为合成目

2、的基因提供线索【例4】下列哪项通常不被用作基因工程的运载体（ ）A细菌质粒 B噬菌体 C动植物病毒 D细菌核区的DNA【例5】（05天津）限制性内切酶的识别序列和切点是GGATCC，限制性内切酶的识别序列和切点是GATC。在质粒上有酶的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶的切点。请画出质粒被限制酶切割后形成的黏性未端。请画出目的基因两侧被限制酶切割后形成的黏性未端。在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性未端能否连接起来？为什么？1、以下说法正确的是 （ ）A、所有的限制酶只能识别同一种特定的核苷酸序列B、质粒是基因工程中惟一的运载体C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限

3、制酶切点，以便与外源基因连接2、不属于质粒被选为基因运载体的理由是 （ ）A、能复制 B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA3下列关于各种酶作用的叙述，不正确的是 （ ） A、DNA连接酶能使不同脱氧核苷酸的磷酸与脱氧核糖连接B、RNA聚合酶能与基因的特定位点结合，催化遗传信息的转录C、一种DNA限制酶能识别多种核苷酸序列，切割出多种目的基因4、科学家常选用的细菌质粒往往带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因的主要作用是（ ）A、提高受体细胞在自然环境中的耐热性 B有利于检测目的基因否导入受体细胞C、增加质粒分子的相对分子质量 D、便于与外源基因连接5、下图是基因工程主要技术环

4、节的一个基本步骤，这一步需用到的工具是 （ ）A、DNA连接酶和解旋酶 B、DNA聚合酶和限制性核酸内切酶C、限制性核酸内切酶和DNA连接酶 D、DNA聚合酶和RNA聚合酶6、限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制酶BamHI，EcoRI，Hind以及Bgl的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合？其正确的末端互补序列为何？（ ） A、 BamHI和EcoRI；末端互补序列AATT B、 BamHI和Hind；末端互补序列GATCC、 EcoRI和Hind；末端互补序列AATTD、 Ba

5、mHI和BglII；末端互补序列GATC 7、研究人员想将生长激素基因通过质粒介导入大肠杆菌细胞内，以表达产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因：A是抗链霉素基因，B是抗氨苄青霉素基因，且目的基因不插入到基因A、B中，而大肠杆菌不带任何抗性基因，则筛选获得“工程菌”的培养基中的抗抗生素首先应该 （ ） A、仅有链霉素    B、仅有氨苄青霉素C、同时有链霉素和氨苄青霉素    D、无链霉素和氨苄青霉素8、能够使植物体表达动物蛋白的育种方法是 A单倍体育种 B杂交育种 C基因工程育种 D多倍体育种9、下图表示限制酶切割某DNA的过程，从图中可知

6、，该限制酶能识别的碱基序列及切点是 ACTTAAG，切点在C和T之间BCTTAAG，切点在G和A之间CGAATTC，切点在G和A之间 DCTTAAC，切点在C和T之间10关于限制酶的说法中，正确的是A限制酶是一种酶，只识别GAATTC碱基序列BEcoRI切割的是GA之间的氢键C限制酶一般不切割自身的DNA分子，只切割外源DNAD限制酶只存在于原核生物中11下列关于DNA连接酶的叙述中，正确的是 ADNA连接酶连接的是两条链碱基对之间的氢键BDNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖CDNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和核糖D同一种DNA连接酶可以切出不同的黏性末端12

7、、茄在运输和贮藏过程中，由于过早成熟而易腐烂。应用基因工程技术，通过抑制某种促进果实成熟激素的合成，可使番茄贮藏时间延长，培育成耐贮藏的番茄新品种。这种转基因番茄已于1993年在美国上市，请回答：（1）促进果实成熟的重要激素是    。（2）在培育转基因番茄的操作中，所用的基因的“剪刀”是 ，基因的“针线”是 ，基因的“运输工具”是。（3）与杂交育种、诱变育种相比，通过基因工程来培育新品种的主要优点是、 和 。13、以下是两种限制酶切割后形成的DNA片段，分析回答问题。（1）其中和是由一种限制酶切割形成的末端，两者要重组成一个DNA分子，所用DNA连接酶通常是 。

8、（2）和是由另一种限制酶切割形成的末端，两者要形成重组DNA片段，所用DNA连接酶通常是。 基础试题训练1在基因工程中，科学家所用的“剪刀”、“针线”和“载体”分别是指( )A.大肠杆菌病毒、质粒、DNA连接酶 B.噬菌体、质粒、DNA连接酶 C.DNA限制酶、RNA连接酶、质粒 D.DNA限制酶、DNA连接酶、质粒2下列四条DNA分子，彼此间间具有粘性末端的一组是 （ ）T A G GC C A TT A C CG G T A ABCD3质粒是基因工程中最常用的运载体，它的主要特点是能自主复制 不能自主复制 结构很小 蛋白质 环状RNA 环状DNA能“友好”地“借居”ABCD4有关基因工程的

9、叙述中，错误的是 （ ）ADNA连接酶将黏性未端的碱基对连接起来B限制性内切酶用于目的基因的获得C目的基因须由载体导入受体细胞D人工合成目的基因不用限制性内切酶5实施基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限性内切酶。一种限制性内切酶能识别DNA子中的GAATTC顺序，切点在G和A之间，这是应用了酶的（）A高效性 B.专一性C多样性 D.催化活性受外界条件影响6人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因的主要作用是 A . 提高受体细胞在自然环境中的耐药性B. 有利于对目的基因是否导入进行检测C. 增加质粒分子的分子量D便于与外源基因连接7下列属

10、于基因运载体所必须具有的条件是（多选） （ ）A、具有某些标志基因B、具有环状的DNA分子C、能够在宿主细胞内复制D、具有多种限制性内切酶8下列哪些可作为基因工程技术中常用的基因运载工具（多选） （ ）A大肠杆菌 B 质粒C动物病毒 D 线粒体 9多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为A、平头末端   B、3突出末端   C、5突出末端   D、粘性末端  10在基因工程中通常所使用的质粒是A、细菌的染色体DNA   B、细菌染色体外的DNAC、病毒染色体DNA  

11、0; D、噬菌体DNA11（05全国）镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变。检测这种碱基序列改变必须使用的酶是A. 解旋酶 B. DNA连接酶 C. 限制性内切酶 D、RNA聚合酶12在基因工程中用来完成基因的剪接的工具是 A限制酶和连接酶 B限制酶和水解酶C限制酶和运载体 D连接酶和运载体【五年高考回放】1用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列叙述不正确的是( )A常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒BDNA连接酶和DNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶C可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒D导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达22006江苏

12、高考我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。下列叙述不正确的是 ( )A基因非编码区对于抗虫基因在棉花细胞中的表达不可缺少B重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失C抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘作物，从而造成基因污染D转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的32003上海高考“人类基因组计划”中的基因测序工作是指测定（ ）ADNA的碱基对排列顺序BmRNA的碱基排列顺序C蛋白质的氨基酸排列顺序DDNA的基因排列顺序42003上海高考下列关于基因工程的叙述，正确的是（ ）A基因工程经常以抗菌素抗性

13、基因为目的基因B细菌质粒是基因工程常用的运载体C通常用一种限制性内切酶处理含目的基因的DNA，用另一种处理运载体DNAD为育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体5.2002上海高考下列高科技成果中，根据基因重组原理进行的是（ ）我国科学家袁隆平利用杂交技术培育出超级水稻 我国科学家将素云金杆菌的某些基因移植到棉花体内我国科学家通过返回式卫星搭载种子培育出太空椒我国科学家通过体细胞克隆技术培养出克隆牛A、 B、 C、 D、 6、依右图有关基因工程的工具酶功能的叙述，不正确的是 （ ） A.切断a处的酶为限制性核酸内切酶 B.连接a处的酶为DNA连接酶C.切断b处的酶为解旋

14、酶 D.切断b处的酶为限制性核酸内切酶 7、以下说法正确的是 （ ） A所有的限制酶只能识别同一种特定的核苷酸序列 B质粒是基因工程中惟一的载体 C载体必备的条件之一是：具有一个或多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D基因治疗主要是对有缺陷的细胞进行修复 课后练习与提高1、限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制酶BamHI，EcoRI，Hind以及Bgl的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合？其正确的末端互补序列为何？ （ ） A. BamHI和EcoRI；末端互补序列AATTB. B

15、amHI和Hind；末端互补序列GATCC. EcoRI和Hind；末端互补序列AATTD. BamHI和BglII；末端互补序列GATC2、在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸460 个），放入DNA扩增仪中扩增4代，那么，在扩增仪中应放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是 （ ）A540 个 B7560个 C8100 个 D17280 个3、基因工程是DNA分子水平的操作，下列有关基因工程的叙述中，错误的是 ( ) A、限制酶只用于切割获取目的基因 B、载体与目的基因必须用同一种限制酶处理 C、基因工程所用的工具酶是限制酶，DNA连接酶 D、带有目的基因的载

16、体是否进入受体细胞需检测4、与“限制性内切酶”作用部位完全相同的酶是： （ ）A反转录酶        BRNA聚合酶         CDNA连接酶      D解旋酶5、下列有关质粒的叙述，正确的是 （ ）A质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器B质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状DNA分子C质粒只有在侵入宿主细胞后才能在宿主细胞内复制D细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行的6、关于右图DNA分子片段的说法正确的是 （ ）GCATATGCATAT15N14NA限制性内切酶可作用于部位，解旋酶作用于部位B处的碱基缺失导致染色体结构的变异C把此DNA放在含15N的培养液中复制2代，子代中含