戒毒胶囊质量标准的研究

1、戒毒胶囊质量标准的研究         09-09-02 15:02:00     编辑：studa20              作者：靳怡然，杜英峰，许慧君，郭玮，袁志芳，张兰桐 【摘要】  目的建立戒毒胶囊的质量标准。方法采用薄层色谱（TLC）法对戒毒胶囊中的金银花、丹参、黄芩、栀子、白芍、人参、熟地黄进行定性鉴

2、别；采用高效液相色谱（HPLC）法对制剂中的绿原酸进行含量测定。色谱条件：用C18分析柱，以乙腈-0.4%磷酸溶液（12:88）为流动相，检测波长为327 nm，进样量为20 l。结果薄层色谱中，供试品溶液色谱在与对照药材或对照品相应位置上出现相同颜色的斑点，阴性对照无干扰；高效液相色谱中，绿原酸在1.829.10 g·ml-1范围内线性关系良好（r=0.999 7），平均回收率为99.09%。结论薄层色谱法呈现斑点清晰、特异性强，可用于戒毒胶囊的鉴别；高效液相色谱法简便快速、精密度高、准确度好，可用于该药的质量控制。 【关键词】  戒毒胶囊； 薄层色谱； 高效液相色谱；

3、绿原酸Abstract：ObjectiveTo establish the quality standard for Jiedu Capsules.MethodsFlos Lonicerae,Radix Salviae Miltiorrhizae,Radix Scutellarine,Fructus Gardeniae,Radix Paeoniae Alba,Radix Ginseng and Radix Rehmanniae were identified using TLC.The content for chlorogenic acid in Jiedu Capsules was det

4、ermined with HPLC.HPLC analytical method was carried out using a C18 column and a mixture containing 12 volume of acetonitrile and 88 volume of 0.4% phosphoric acid solution as the mobile phase.The detection wavelength was set at 327 nm.ResultsSpots obtained from the test solutions had the same colo

5、r in reference solution and medical material in the same location,and the bland solution had no interference. The linear range of albiflorin was from 1.82 to 9.10 g·ml-1(r=0.999 7),the average recovery was 99.09%.ConclusionIn TLC,the spots are very clear and specific to identify the herbal medi

6、cine in Jedu Capsules.HPLC is simple,quick,high precise and accurate for  the quality control of Jiedu Capsules.Key words：Jiedu Capsules;  TLC;  HPLC;  Chlorogenic acid    戒毒胶囊处方为治疗吸食阿片类成瘾者的临床经验方，戒毒胶囊是依据中医理论，结合多年的临床用药经验研制的，并且在研制该制剂时，进行了相关药理学等多方面研究，以期发挥中医中药优势，为阿片类毒瘾

7、者提供疗效确切、服用安全的中药新制剂，由金银花、黄芩、栀子、丹参、黄芪等13味药制成。本实验采用TLC和HPLC建立鉴别和含量测定方法，以期为戒毒胶囊的质量控制提供实验方法。1  仪器与试药1.1  仪器Waters 高效液相色谱仪（美国）：510泵，2487 紫外检测器；色谱工作站（Empower 色谱工作站)；TCQ-250 超声波清洗器9北京医疗设备二厂）。1.2  试药绿原酸对照品及对照药材（均购自中国药品生物制品检定所）；戒毒胶囊（自制）。缺味阴性样品按处方分别配成相应的缺位处方药，模拟制剂工艺，加相应辅料制备。药材均购自石家庄药材站，并经生药鉴定。乙腈

8、为色谱纯，超纯水，其余试剂均为分析纯。2   方法与结果2.1  定性分析2.1.1  金银花的鉴别1取本品内容物2 g，加甲醇20 ml，超声处理10 min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5 ml使溶解，作为供试品溶液。取金银花对照药材0.2 g，照“供试品溶液的制备”项下同法操作制备对照药材溶液。另取绿原酸对照品，加甲醇制成每毫升含1 mg的溶液，作为对照品溶液。再取缺金银花的阴性样品，同供试品溶液的制备方法，制成阴性对照溶液。吸取上述4种溶液各10 l，分别点于同一块硅胶G薄层板上，以醋酸丁酯-甲酸-水（7.5:3.5:1.5）的上层溶液为展开剂，展

9、开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。阴性对照色谱无干扰。见图1。2.1.2  丹参的鉴别取本品内容物12 g，加乙醚200 ml，超声处理10 min，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯1 ml使溶解，作为供试品溶液。取丹参对照药材1 g，照供试品溶液制备项下同法操作，作为对照药材溶液。另取丹参酮A对照品，加醋酸乙酯溶解并制成每毫升含2 mg的溶液，作为对照品溶液。再按处方工艺制备缺丹参阴性对照，再按“供试品溶液的制备”制成阴性对照品溶液。吸取上述4种溶液各10 l，分别点于同一块硅胶G薄层板上，以苯-醋酸

10、乙酯（19:1）为展开剂，展开，取出，晾干，在日光下直接检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显一相同的暗红色斑点；阴性在相应位置无干扰。见图2。2.1.3  黄芩的鉴别取本品内容物1 g，加甲醇20 ml，超声处理20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20 ml超声使溶解，加到已处理好的AB-8型吸附树脂柱（内径1.5 cm，长20 cm，湿法装柱）上，用水30 ml洗脱，弃去洗脱液，再用30乙醇30 ml洗脱，弃去洗脱液，继用80乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇1 ml使溶解，作为供试品溶液。取黄芩对照药材1 g，按

11、供试品溶液制备项下操作制成对照药材溶液。取黄芩苷对照品，加甲醇制成每毫升含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液。按处方工艺制备缺黄芩阴性对照，再按“供试品溶液的制备”制成阴性对照品溶液。吸取上述4种溶液各10 l，分别点于同一块含4醋酸钠的羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5:3:1:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1三氯化铁乙醇溶液供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。在与对照品色谱相应的位置上，显一相同颜色的斑点。阴性在相应位置无干扰，见图3。图1  戒毒胶囊中金银花的薄层色谱图（略）   

12、  图2  戒毒胶囊中丹参的薄层色谱图 （略）                     2.1.4    栀子的鉴别1取本品内容物2 g，加75乙醇20 ml，超声处理20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水10 ml超声使溶解，加水饱和的正丁醇振摇提取3次，10 ml/次，合并正丁醇液，用水洗涤3次，10 ml/次，弃去水洗液，将正丁醇液

13、置水浴上蒸干，残渣加乙醇1 ml使溶解，作为供试品溶液。取栀子对照药材1 g，照对照药材溶液制备项下的方法同法操作，作为对照药材溶液。另取栀子苷对照品，加乙醇制成每毫升含4 mg的溶液，作为对照品溶液。按处方工艺制备缺栀子阴性对照，再按“供试品溶液的制备”制成阴性对照品溶液。吸取上述4种溶液各5 l，分别点于同一块硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水（5:5:1:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇（510）溶液，在105 加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。在与对照品色谱相应的位置上，显一相同颜色的斑点。阴性在相应位置无干扰，见图4

14、。图3  戒毒胶囊中黄芩的薄层色谱图 （略）          图4  戒毒胶囊中栀子的薄层色谱图  （略）                    2.1.5    白芍的鉴别1取本品4 g，加乙醇20 ml，超声处理10 min，滤过，滤液蒸干，残

15、渣加水20 ml超声使溶解，加到已处理好的AB-8型吸附树脂柱（内径1.5 cm，长20 cm，湿法装柱）上，用水30 ml洗脱，弃去洗脱液，再用20乙醇30 ml洗脱，弃去洗脱液，继用70乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇1 ml使溶解，作为供试品溶液。取白芍对照药材2 g，同法制成对照药材溶液。按处方工艺制备缺白芍阴性对照，再按“供试品溶液的制备”制成阴性对照品溶液。    吸取上述3种溶液各10 l，分别点于同一块硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸（40:5:10:0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5香草醛硫酸溶液，在105 加热至斑点显

16、色清晰。阴性对照色谱无干扰，见图5。2.1.6  人参的鉴别1取本品4 g，加氯仿40 ml，置水浴中加热回流1h，弃去氯仿液，残渣挥去氯仿，加水0.5 ml拌匀湿润后，加水饱和的正丁醇40 ml，超声处理30 min，滤过，滤液加3倍量氨试液，摇匀，放置分层，取上层液蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，作为供试品溶液。取人参对照药材，照供试品溶液制备项下同法操作制备对照药材溶液。取人参皂苷Rb1、Re和Rg1对照品，加甲醇分别制成每毫升各含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液。按处方工艺制备缺人参阴性对照，再按“供试品溶液的制备”制成阴性对照品溶液。吸取上述6种溶液各10 l，分别点于同

17、一块硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-正丁醇-水（2:1:4:2）的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10硫酸乙醇溶液，在105 加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点。阴性在相应位置无干扰，见图6。2.1.7  熟地黄的鉴别2取本品10 g，加水50 ml，煮沸1 h，趁热滤过，滤液放冷后，加醋酸乙酯25 ml振摇提取，分取醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，作为供试品溶液。另取熟地黄对照药材1 g，同法制成对照药材溶液。按处方工艺制备缺熟地黄阴性对照，再按“供试品溶液的制备”制成阴性对照品溶液。吸取上述3种溶液各10 l，分别点于同一块硅胶G薄层板上，以甲苯-醋酸乙酯（1:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2，4-二硝基苯肼试液，在105加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性在相应位置无干扰，阴性对照色谱无干扰，见图7。图5