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文档简介

1、学习目标学习目标 了解尿液干化学分析仪发展史、结构及检测了解尿液干化学分析仪发展史、结构及检测原理原理 掌握尿液干化学检验中各项目的原理、方法掌握尿液干化学检验中各项目的原理、方法 重点掌握尿液干化学检验中的注意事项及临重点掌握尿液干化学检验中的注意事项及临床意义床意义 掌握干化学检查过程中应注意的问题掌握干化学检查过程中应注意的问题 现代尿液分析仪类型现代尿液分析仪类型 干化学分析仪检验干化学分析仪检验 全自动尿沉渣分析仪全自动尿沉渣分析仪 流式细胞术分析仪流式细胞术分析仪 影像式尿沉渣影像式尿沉渣尿干化学试带测试原理、临床尿干化学试带测试原理、临床应用级及质量控制应用级及质量控制主要内容主

2、要内容 干化学尿液分析仪试剂干化学尿液分析仪试剂带检测原理带检测原理 干化学尿液分析仪检验干化学尿液分析仪检验的干扰因素及质量控制的干扰因素及质量控制 干化学尿液分析仪检验干化学尿液分析仪检验的临床应用的临床应用历史回顾历史回顾 1616世纪:英国物理学家世纪:英国物理学家Robert BoyleRobert Boyle发明石蕊试发明石蕊试纸,用于测定溶液纸,用于测定溶液pHpH 19371937年:费格尔利用年:费格尔利用“蛋蛋白质误差(白质误差(protein protein errorerror)原理,首次发明)原理,首次发明了测定尿蛋白的一种单颜了测定尿蛋白的一种单颜色反应,此发明奠定

3、了以色反应,此发明奠定了以后发展浸入即读(后发展浸入即读(Dip-Dip-and-Readand-Read)干化学试带的)干化学试带的基础基础 19561956年:联合尿糖、蛋白、年:联合尿糖、蛋白、pHpH等的多联试纸问世,从等的多联试纸问世,从3-43-4个项目组合到九十年代的尿个项目组合到九十年代的尿液液1010项干化学试带,已经达项干化学试带,已经达到比较理想的境地到比较理想的境地 19701970年起,用于判读尿试带年起,用于判读尿试带颜色变化的半自动化仪器问颜色变化的半自动化仪器问世世 19801980年年: :具有自动进样,点具有自动进样,点滴,试带传输和打印功能的滴,试带传输和

4、打印功能的全自动尿干化学分析仪问世全自动尿干化学分析仪问世历史回顾历史回顾历史回顾历史回顾-中国中国 19661966年:北京协和医院检验年:北京协和医院检验科生产出科生产出1212种用于测定尿液种用于测定尿液中化学成分的试纸,包括尿中化学成分的试纸,包括尿蛋白、尿糖、酮体、胆红素、蛋白、尿糖、酮体、胆红素、pHpH、潜血等项目、潜血等项目 19801980年,北京协和医院与美年,北京协和医院与美国国AmesAmes公司签订双方协作计公司签订双方协作计划,首次从美国引进一批自划,首次从美国引进一批自动化和半自动化检验设备动化和半自动化检验设备中级医刊,1966年特刊8项目半自动尿液干化学分析仪

5、 近代尿液分析仪近代尿液分析仪 19851985年,国内不少厂家如桂年,国内不少厂家如桂林医疗电子仪器厂等引进日林医疗电子仪器厂等引进日本京都第一化学或日本荣研本京都第一化学或日本荣研化学的技术,生产化学的技术,生产8 8项的干项的干化学试带生产线化学试带生产线 然后还引进了然后还引进了MA-4210MA-4210等型等型号的尿液分析仪号的尿液分析仪 进入上世纪进入上世纪9090年代以后,尿年代以后,尿液干化学分析仪器和试带已液干化学分析仪器和试带已经扩展为经扩展为1010项至项至1111项项MA-4210尿液化学尿液化学分析仪分析仪近代尿液分析仪近代尿液分析仪Clinitek 500型半自动

6、尿液干化学分析仪 Roche 2400全自动尿液干化学分析系统 近代尿液分析仪近代尿液分析仪Clinitek Atlas 全自动尿液干化学分析仪 迪瑞H800全自动尿液干化学分析仪 爱科来AUTION MAX AX-4280全自动尿干化学分析仪和iQ-200尿液有形成分分析仪连接运行尿干化学试带结构及组成试带构成试带构成 第一层尼龙膜起保护作用,第一层尼龙膜起保护作用,防止大分子物质的污染防止大分子物质的污染 第二层绒制层,包括碘酸盐第二层绒制层,包括碘酸盐层和试剂层,碘酸盐层可破层和试剂层,碘酸盐层可破坏坏VitcVitc等干扰物质,试剂层等干扰物质,试剂层与尿液所测定物质发生化学与尿液所测

7、定物质发生化学反应反应 第三层是固有试剂的吸水层,第三层是固有试剂的吸水层,可使尿液均匀,快速地浸入,可使尿液均匀,快速地浸入,并能抑制尿液流到相邻反应并能抑制尿液流到相邻反应区区 第四层选取尿液不浸润第四层选取尿液不浸润的塑料片为支持体的塑料片为支持体干化学检测原理干化学检测原理 不同型号尿干化学分析不同型号尿干化学分析仪使用配套的专用试带仪使用配套的专用试带 各试剂模块与尿中被测各试剂模块与尿中被测成分的反应呈现不同的成分的反应呈现不同的颜色变化,颜色的深浅颜色变化,颜色的深浅与尿中相应物质呈正比与尿中相应物质呈正比 空白块,固定块作用空白块,固定块作用检测参数检测参数 8项:PH、PRO

8、、GLU、KET、BIL 、URO、ERY、NIT 9项:增加WBC 10项:SG 11项:Vit C 肾病四联试带:PH、PRO、ERY、SG 糖尿病五联试带:PH 、PRO 、GLU、KET 、SG 肝病二联试带: BIL、URO测定原理测定原理 模块成分模块成分 吲哚酚酯吲哚酚酯 重氮盐重氮盐注意事项注意事项1.1. 本法主要检测粒细胞酯酶,本法主要检测粒细胞酯酶,不与淋巴细胞反应不与淋巴细胞反应2.2. 尿中含福尔马林、呋喃坦啶、尿中含福尔马林、呋喃坦啶、大量胆红素可致假阳性大量胆红素可致假阳性3.3. 高比重尿、高蛋白(高比重尿、高蛋白(5g/L)5g/L)、VCVC、尿中含头孢霉素

9、、庆大、尿中含头孢霉素、庆大霉素、四环素以及霉素、四环素以及硼酸硼酸、草、草酸可致假阴性酸可致假阴性注意事项注意事项4.4. 尿液标本应新鲜,尿液在尿液标本应新鲜,尿液在膀胱时间过长,或标本存膀胱时间过长,或标本存储时间过长,引起白细胞储时间过长,引起白细胞破坏,导致干化学阳性,破坏,导致干化学阳性,镜检阴性的假阳性出现镜检阴性的假阳性出现5.5. 综合酯酶、亚硝酸盐、镜综合酯酶、亚硝酸盐、镜检、结合临床分析结果检、结合临床分析结果6.6. 白细胞和红细胞白细胞和红细胞10/10/l l、亚硝酸盐和蛋白阴性,可亚硝酸盐和蛋白阴性,可以使用干化学过筛而不进以使用干化学过筛而不进行镜检行镜检 镜检

10、标准镜检标准 肾科及泌尿系病人肾科及泌尿系病人 以镜检作为诊断或疗效以镜检作为诊断或疗效依据的,如结石、结晶、依据的,如结石、结晶、肿瘤肿瘤 尿液外观异常时尿液外观异常时 依据医师指定要求做沉依据医师指定要求做沉渣镜检的标本渣镜检的标本。 注意事项注意事项 只要完全符合以下条件的可不进行显微镜只要完全符合以下条件的可不进行显微镜检查。检查。1.1.白细胞结果为阴性白细胞结果为阴性2.2.亚硝酸盐为阴性尿亚硝酸盐为阴性尿3.3.蛋白为阴性蛋白为阴性4.4.尿红细胞检查尿红细胞检查10/10/l l5.5.排除药物及其它因素的干扰排除药物及其它因素的干扰尿中白细胞试带法与镜检结果比较 试带法白细胞

11、(试带法白细胞(- -)试带法白细胞(试带法白细胞(+ +) 镜检白细镜检白细胞(胞(- -)正常标本正常标本白细胞破坏、标本久置、白细胞破坏、标本久置、低渗尿、高低渗尿、高pHpH尿、漏检尿、漏检白细胞白细胞镜检白细镜检白细胞(胞(+ +)试带失效、高渗尿、抗试带失效、高渗尿、抗生素、错误识别:滴虫、生素、错误识别:滴虫、鳞状上皮裸核型,排斥鳞状上皮裸核型,排斥等等(+ +)临床意义临床意义 白细胞增多主要见于泌尿系白细胞增多主要见于泌尿系炎症炎症 肾盂肾炎、膀胱炎、尿道炎、肾盂肾炎、膀胱炎、尿道炎、前列腺炎,肾小球肾炎前列腺炎,肾小球肾炎 中性粒细胞见于急性炎症中性粒细胞见于急性炎症 淋巴

12、细胞、单核细胞见于肾淋巴细胞、单核细胞见于肾移植、慢性炎症、新月形肾移植、慢性炎症、新月形肾小球肾炎、抗癌药物引起的小球肾炎、抗癌药物引起的间质性肾炎间质性肾炎 嗜酸性细胞见于过敏性炎嗜酸性细胞见于过敏性炎症、变态反应引起的泌尿症、变态反应引起的泌尿系炎症系炎症 急性肾小管坏死,可见急性肾小管坏死,可见单核细胞减少或消失单核细胞减少或消失 女性生殖系统炎症分泌女性生殖系统炎症分泌物污染物污染Vit C概述概述 人、灵长类和豚鼠不能合人、灵长类和豚鼠不能合成成 VCVC的阈值的阈值14mg/L14mg/L 通过消化道需能吸收通过消化道需能吸收 通过尿液排出,其重吸收通过尿液排出,其重吸收机制和葡

13、萄糖基本一致机制和葡萄糖基本一致 摄入摄入45mg/L,45mg/L,血液中血液中6mg/L6mg/L 模式模式 左旋抗坏血酸左旋抗坏血酸 左旋脱氢抗坏血酸左旋脱氢抗坏血酸 测定方法测定方法 同时测定:二硝基苯肼同时测定:二硝基苯肼比色法和高效液相色谱比色法和高效液相色谱法法 测定左旋抗坏血酸:干测定左旋抗坏血酸:干化学法和二氯靛酚蓝化学法和二氯靛酚蓝检测原理检测原理 模块组成:模块组成:2,6-2,6-二氯靛酚钠、中性红、亚甲基绿磷酸二氢二氯靛酚钠、中性红、亚甲基绿磷酸二氢钠、磷酸氢二钠钠、磷酸氢二钠 VCVC含有含有1 1,2-2-烯二醇,在酸性条件使氧化态粉红色烯二醇,在酸性条件使氧化态

14、粉红色2,6-2,6-二二氯靛酚还原为无色的氯靛酚还原为无色的2 2,6-6-二氯二对酚胺二氯二对酚胺注意事项注意事项 在碱性环境中不稳定,标本在碱性环境中不稳定,标本要新鲜,及时测定,防止被要新鲜,及时测定,防止被细菌破坏细菌破坏 只对左旋抗坏血酸反应只对左旋抗坏血酸反应 PH4.0PH4.0时,内源性酚和巯基时,内源性酚和巯基化合物如半胱氨酸、硫代硫化合物如半胱氨酸、硫代硫酸钠使结果偏高酸钠使结果偏高 着重反映饮食着重反映饮食VCVC含量,反映含量,反映体内体内VCVC营养状况,营养状况,VCVC低见于低见于摄入不足或抗坏血酸病,长摄入不足或抗坏血酸病,长期增高与结石形成有关期增高与结石形

15、成有关 维生素维生素C C含量的高低对血红蛋含量的高低对血红蛋白、葡萄糖、胆红素、尿胆白、葡萄糖、胆红素、尿胆原、亚硝酸盐及白细胞产生原、亚硝酸盐及白细胞产生负干扰负干扰 尤其注意酮体阳性,葡萄糖尤其注意酮体阳性,葡萄糖阴性或葡萄糖干化学和班氏阴性或葡萄糖干化学和班氏结果不一致时结果不一致时半胱氨酸比色法测定比色法测定VC 使用活性碳将抗坏血酸氧化成氧化型,与使用活性碳将抗坏血酸氧化成氧化型,与2 2,4-4-二二硝基苯肼结合成红色脎,脎溶解于硫酸,比色硝基苯肼结合成红色脎,脎溶解于硫酸,比色尿干化学检测的原理尿干化学检测的原理方法比较方法比较-尿干化学法尿干化学法 优点:标本用量少;优点:标

16、本用量少;速度快;项目多;重速度快;项目多;重复性好、准确性高;复性好、准确性高;适用大批量标本筛查适用大批量标本筛查 缺点缺点 不能替代对病理性标本的不能替代对病理性标本的显微镜检查,对白细胞、显微镜检查,对白细胞、管型和结晶的检查属于间管型和结晶的检查属于间接检查接检查 很难判断红细胞形态特征很难判断红细胞形态特征 测定蛋白以白蛋白为主,测定蛋白以白蛋白为主,故不适于肾病患者故不适于肾病患者 易受药物、外源性物质易受药物、外源性物质或人为因素影响,出现或人为因素影响,出现假阳性或假阴性假阳性或假阴性 亚硝酸盐只能检查出有亚硝酸盐只能检查出有硝酸盐还原酶的细菌硝酸盐还原酶的细菌 多联试带保存

17、和使用要多联试带保存和使用要求高求高筛查的目的筛查的目的 检出异常标本和排除健康标检出异常标本和排除健康标本,本, 特别是避免假阴性。特别是避免假阴性。 对假阳性可通过镜检进一步对假阳性可通过镜检进一步排除排除质量控制质量控制 标本必须新鲜,最好标本必须新鲜,最好2 2小时内完成,过久影响结果小时内完成,过久影响结果 避免混入阴道分泌物混入尿标本,否则,引起白避免混入阴道分泌物混入尿标本,否则,引起白细胞假阳性细胞假阳性 了解病人饮食及用药情况了解病人饮食及用药情况试剂带要求试剂带要求 一定要在失效期内一定要在失效期内 避光、防潮、干燥保存避光、防潮、干燥保存 使用时一次只取出所需使用时一次只

18、取出所需要的试剂带,并立即盖要的试剂带,并立即盖紧,多余试剂带不可放紧,多余试剂带不可放回容器内回容器内 打开盖子后不能再放冰打开盖子后不能再放冰箱箱 不可合并各瓶中的试不可合并各瓶中的试剂带。剂带。 不可触摸试剂带上各不可触摸试剂带上各反应检测块。反应检测块。质量控制质量控制 操作严格、操作严格、规范、正确规范、正确 2 2种浓度质控种浓度质控液液临床应用临床应用全自动尿沉渣分析仪种类种类 流式细胞术尿沉渣分析仪 流式细胞术尿沉渣分析仪流式细胞术尿沉渣分析仪 流式细胞计数仪原理和流式细胞计数仪原理和电阻抗相结合电阻抗相结合 影像式尿沉渣分析系统影像式尿沉渣分析系统 流式细胞分析技术和粒流式细

19、胞分析技术和粒子成像分析技术子成像分析技术影像式尿沉渣分析仪流式细胞术尿沉渣分析仪流式细胞术尿沉渣分析仪 光学检测系统光学检测系统 液压系统液压系统 电阻抗检测系电阻抗检测系统统 电子系统电子系统参数参数 荧光强度(荧光强度(FI):FI):反映细反映细胞染色质强度胞染色质强度 前向荧光脉冲宽度前向荧光脉冲宽度(FLWFLW):主要反映染色):主要反映染色质长度质长度 前向散射光强度(前向散射光强度(FscFsc):):成比例反映细胞大小成比例反映细胞大小 前向散射光脉冲宽度前向散射光脉冲宽度(FscwFscw):):反映细胞长度反映细胞长度 定量参数定量参数 WBC/WBC/l l、RBC/

20、 RBC/ l l 、EC/ EC/ l l 、CAST/ CAST/ l l 、 BACT/ BACT/ l l 、conductivityconductivity 标记参数标记参数 Path CASTPath CAST、SRCSRC、YLCYLC、X X TALTAL、SPERMSPERM等等 红细胞、白细胞红细胞、白细胞 isomorphic RBCisomorphic RBC、dysmorphicdysmorphic RBC RBC、Non-Non-LysedLysed RBC#,% RBC#,%、RBC-RBC-MFIMFI、 RBC-RBC-MFscMFsc、 RBC-FI-DWS

21、DRBC-FI-DWSD、WBC-WBC-MFscMFsc) ) FI-FI-FscFsc、Fscw-FlwFscw-Flw散点图散点图 红细胞:红细胞:FIFI极低极低, ,FscFsc大小不均大小不均 白细胞:白细胞:FIFI大大, , FscFsc较红细胞大较红细胞大 细菌:细菌:FSCFSC比白细胞和红细胞小比白细胞和红细胞小,FI,FI比比红细胞大红细胞大, ,比白细胞小比白细胞小 上皮细胞:均有细胞核上皮细胞:均有细胞核, ,主要分布在主要分布在Fscw-FlwFscw-Flw散点图左上角散点图左上角 管型:透明管型有极高的管型:透明管型有极高的FscwFscw 和低和低的的FLW

22、;FLW;病理性管型含有其他内容物,病理性管型含有其他内容物,有较高的有较高的FscwFscw和较高的和较高的FLWFLWFSCWFSC 酵母细胞和精子:较高的酵母细胞和精子:较高的FIFI,FscFsc在红细胞和白细胞之间在红细胞和白细胞之间; ;酵母的酵母的FSCWFSCW较精子的小较精子的小, ,将其区分开来将其区分开来 结晶出现在红细胞区域结晶出现在红细胞区域, ,草酸盐更草酸盐更靠近靠近FSC,FSC,尿酸盐和红细胞分不清尿酸盐和红细胞分不清FSCWFSC红细胞红细胞 80%80%的红细胞的红细胞Fsc84ch,Fsc84ch,称为称为非均一性血尿非均一性血尿 80%80%的红细胞的

23、红细胞Fsc126ch,Fsc126ch,称称为均一性血尿为均一性血尿 介于两者之间,混合性血尿介于两者之间,混合性血尿 结晶、真菌、结晶增多影响结晶、真菌、结晶增多影响结果结果 血尿伴菌尿,尿渗量血尿伴菌尿,尿渗量700mOsm/L,PH 7.0700mOsm/L,PH 7.0或放或放置时间过长,导致改变置时间过长,导致改变白细胞白细胞 存活的白细胞,存活的白细胞,FscFsc较强较强而而FIFI弱弱 死亡白细胞,死亡白细胞, FscFsc较弱而较弱而FIFI强强 白细胞前向散射光(白细胞前向散射光(FSC)FSC)强强, ,前向荧光(前向荧光(FIFI)弱,)弱,急性感染;否则急性感染;否则FSCFSC弱,弱,FIFI强慢性感染。强慢性感染。 利用利用WBC-WBC-MFscMFsc来判别白细来判别白细胞状态,结合白细胞定量胞状态,结合白细胞定量判断急性还是慢性感染判断急性还是慢性感染: :当其当其WBC-MFsc73.3WBC-MFsc73.3

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