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文档简介
1、2020版药典微生物限度计数一耐胆盐革兰阴性菌2020版本药典(1) 菌种及菌液制备1)菌液制备将铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、沙门菌分别 接种在胰酪大豆腺琼脂培养基上,35°C条件下培养24小时,将新鲜 培养物用PH7.0的0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的菌悬液。(2) 控制菌检查方法适用性试验控制菌检査用培养基的适用性检查项目包括促生长能力、抑制 能力及指示特性的检查,各培养基的检查项目及所用的菌株见表1。表1控制菌检査用培养基的促生长能力.抑制能力和指示特性控制菌培养基特性试验菌耐胆盐革兰阴肠道菌增菌液体培养基促生长能力大肠埃希菌、铜绿性菌假单胞菌抑制能力金黄色
2、葡萄球菌紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基促生长能力+人肠埃希菌、铜绿指示能性假单胞菌沙门菌RV沙门菌增菌液体培养基促生长能力乙型副伤寒沙门菌抑制能力金黄色葡萄球菌木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂促生长能力+乙型副伤寒沙门菌培养基指示能性三糖铁琼脂培养基指示能性乙型副伤寒沙门菌耐胆盐革兰阴性菌检查方法适用性试验1、肠道菌增菌液体培养基促生长能力检查:分别接种不人于lOOcfii的人肠埃希菌和铜绿假单胞菌于被检培养基以及对照培养基中, 在35°C条件下培养24小时。2、肠道菌增菌液体培养基抑制能力检查:分别接种不大于 lOOcfh的金黄色葡萄球菌于被检培养基和对照培养基中,在35°C条件 下培
3、养48小时。3、紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基促生长能力检查:分别接种不大 于lOOcfU的大肠埃希菌和铜绿假单胞菌于被检培养基以及对照培养基 中,在35°C条件下培养18小时。4、紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基指示能性检查:分别接种不大于 lOOchi的大肠埃希菌和铜绿假单胞菌于被检培养基以及对照培养基中, 在35°C条件下培养18小时。5、紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基抑制能力检查:分别接种不大于 lOOchi的金黄色葡萄球菌于被检培养基和对照培养基中,在35°C条件 下培养24小时。(3)耐胆盐革兰氏阴性菌检査1)供试液制备和预培养供试品的控制菌检查按经方法适用性试验确认的方
4、法进行。取 供试品,用胰酪人豆豚液体培养基作为稀释剂制成1:10供试液,混 匀,在25°C条件下培养,培养时间使供试品屮的细菌充分恢复但不 增殖(2小时)。2)定性试验取相当于10ml供试品的上述预培养物接种至适宜体积90ml肠道 菌增菌液体培养基屮,35°C培养24小时后,划线接种于紫红胆盐葡 萄糖琼脂培养基平板上,35°C培养24小时。如果平板上无菌落生长, 判供试品未检出耐胆盐革兰阴性菌。3)定量试验选择和分离培养取相当于o.lg、O.Olg和O.OOlg供试品的预培养 物分别接种至9ml体积肠道菌增菌液体培养基中,35°C培养24小时。 上述每一培养物分别划线接种于紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基平板上,35°C培养24小时。 (具体流程见下页)单击头I下载2020版本药典其它资料O 34 0总评分4.9 文档量单击头像I
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