香菇多糖的提取制备_第1页
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文档简介

1、香菇多糖的提取制备 一、实验目的 掌握水溶醇沉法分离多糖类化合物的原理和方法。 二、实验原理 在组织中，多糖多与蛋白质以共价相结合，所以在生化产品制备工艺中，往往第一步多用酶降解蛋白质部分或用碱使多糖蛋白质间的键裂开，以促进多糖在提取时的溶解。碱性提取可避免多糖中硫酸基团水解而破坏。现多采用碱性提取的同时用蛋白质水解酶处理组织。提取液中存在的蛋白质可用普通蛋白质沉淀剂使之沉淀，也可用其他方法使变性沉淀，如适当调pH和加热等。三、操作要点 1.预处理：取干香菇，捣碎。 2.提取：将捣碎的干香菇置于不锈钢反应锅中，在搅拌的条件下加67倍量水混匀，加热至90，搅拌保温60 min，降温至40时转移到

2、40水浴保温；并加入适量蛋白水解酶液，pH值为自然(Ph64)，搅拌反应60 min，然后迅速升温到90-100，灭活1min降温后纱布过滤，收集滤液。 3.浓缩：将以上滤液置于解压浓缩罐中，然后解压浓缩至l/5体积时，停止浓缩。 4.沉淀：将浓缩液置于搪瓷缸中在搅拌的条件下，加1倍量乙醇，然后静置过夜。过滤得沉淀物，滤液再加3倍量乙醇，得沉淀物。 5.二次沉淀：将沉淀物置于搪瓷缸中，加约70倍量的水，搅拌均匀，在猛烈搅拌下，滴加0.2mol/l几氢氧化十六烷基三甲基胺水溶液，逐步调PH至128时产生大量沉淀，离心，沉淀用乙醇洗涤，收集沉淀。 6.除蛋白：沉淀用氯仿、正丁醇洗涤去蛋白，水层加3倍量乙醇沉淀，收集沉淀。 7.洗涤：沉淀依次用甲醇、乙醚洗涤，收集沉淀。 8.干燥：将沉淀置真空干燥器干燥，即为香菇多糖。四、思考题 1.有没有其他方法

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