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文档简介
1、植物组织中可溶性糖含量的测定实验报告10 科四 谭晓东20102501024一、实验目的掌握蒽酮比色法测定可溶性糖含量的提取和方法原理；掌握分光光度计中标准曲线制作的使用程序。二、实验原理植物组织中的糖（包括还原糖和非还原糖）可以与浓硫酸反应生成糠醛，糠醛和蒽酮反应可以生成蓝绿色络合物，在625nm 处有最大光吸收值。三、实验材料大白菜叶片与叶柄四、实验步骤1. 可溶性糖的提取大白菜叶柄和叶片各0.5g 鲜重，研磨+ 10ml 80% 乙醇80度水浴30mi n过滤后定容至25ml2.标准葡萄糖液的配制（200ug/ml ）葡萄糖浓度020406080100（ ug/ml ）标准匍萄糖液 吸取
2、量（ ml）00.10.20.30.40.5蒸馏水（ ml ）10.90.80.70.60.5蒽酮（ ml ）5混匀，沸水浴 10min ，冷却后在 625nm下比色3.样品液显色和比色0.1ml 提取液 +0.9ml蒸馏水冷却后对照标准曲线比色五、实验结果1.葡萄糖标准曲线葡萄糖液浓406080100度（ ug/ml20）吸光度0.1310.2360.3070.4450.536标准方程：y=184.6x-1.973R=0.99402.根据标准曲线测到，叶片的吸光度是0.249，葡萄糖浓度为43.96ug/ml，含糖量为13.82% ; 叶柄的吸光度为0.276 ，葡萄糖浓度为49.01ug/
3、ml ，含糖量为15.41%六、分析与讨论植物体内的可溶性糖和淀粉均是光合作用产物。可溶性糖以蔗糖为主，是植物糖类运输的主要形式，其次是葡萄糖、果糖、麦芽糖、戊糖和糖苷等。可溶性糖在硫酸作用下生成糖醛或羟甲基糠醛化合物，糖醛或羟甲基糠醛可与蒽酮作用形成蓝绿色络合物（糖醛衍生物），在一定波长范围内，其颜色的深浅与糖含量有定量关系，在 625 nm 波长下的吸光值与可溶性糖含量成正比。由于蒽酮与可溶性糖反应的呈色强度随时间变化，故必须在反应后立即在同一时间内比色。该实验方法简便，灵敏度高，可溶性糖含量在 30 卩 g 左右就能进行测定，所以可作为测定微量可溶性糖之用。该法的特点是几乎可以测定所有的
4、碳水化合物，不但可以测定戊糖与己糖含量，而且可以测所有寡糖类和多糖类，其中包括淀粉、纤维素等（因为反应液中的浓硫酸可以把多糖水解成单糖而发生反应） ，所以用蒽酮法测出的碳水化合物含量水化合物总量 .在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下，实际上是溶液中全部可溶性碳，用蒽酮法可以一次测出总量，省去许多麻烦 ，因此，有特殊的应用价值?但在测定水溶性碳水化合物时，则应注意切勿将样品的未溶解残渣加入反应液中，不然会因为细胞壁中的纤维素、半纤维素等与蒽酮试剂发生反应而增加了测定误差.此外 ，不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同，果糖显色最深 ，葡萄糖次之 ，半乳糖、甘露糖较浅 ，五碳糖显色更浅 ，故测定糖的混合物时 ，常因不
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