中药化学成分提取分离方法

1、1第二章第二章中药化学成分提取分离方法中药化学成分提取分离方法 2一、中药化学成分的提取一、中药化学成分的提取 ( (一一) )溶剂提取法溶剂提取法v依据：化学成分的溶解性（极性）依据：化学成分的溶解性（极性）v关键：提取溶剂的选择关键：提取溶剂的选择v溶剂的选择原则：相似相溶的原则，溶剂的选择原则：相似相溶的原则， 价廉、易得、无毒、安全等。价廉、易得、无毒、安全等。v提取方法：浸渍法、渗漉法、煎煮法、提取方法：浸渍法、渗漉法、煎煮法、 回流提取法、连续回流提取法。回流提取法、连续回流提取法。 3常用提取溶剂性能特点常用提取溶剂性能特点 提取溶剂提取溶剂 性能特点性能特点 适宜提取成分适宜提

2、取成分 提取方法提取方法强极性溶剂强极性溶剂 溶解范围广溶解范围广 生物碱盐生物碱盐 水水 穿透能力强穿透能力强 苷类苷类 煎煮法煎煮法 易得、安全易得、安全 糅质糅质 糖类糖类 渗漉法渗漉法 氨基酸氨基酸 蛋白质蛋白质 4v 有些苷类成分的酶解有些苷类成分的酶解v 有些脂溶性成分溶解不完全有些脂溶性成分溶解不完全 v 水提液易发霉、变质水提液易发霉、变质v 水溶性杂质多，过滤困难水溶性杂质多，过滤困难v 沸点高，浓缩困难沸点高，浓缩困难5 亲水性有机溶剂亲水性有机溶剂 （和水可任意混溶）（和水可任意混溶） 溶解范围广溶解范围广 除多糖、除多糖、 渗滤法渗滤法 水溶性杂质溶出少水溶性杂质溶出少

3、 蛋白质外蛋白质外 浸渍法浸渍法 乙醇乙醇 可抑制酶的活性可抑制酶的活性 大多数大多数 回流法回流法 提取液不易发霉、变质提取液不易发霉、变质 化学成分化学成分 连续回流法连续回流法 大部分可回收利用大部分可回收利用 均可溶解均可溶解 但有挥发性、易燃烧但有挥发性、易燃烧6甲醇甲醇 溶解特点与乙醇相似，但有毒溶解特点与乙醇相似，但有毒丙酮丙酮 溶解性能同乙醇，但沸点低、易挥发，溶解性能同乙醇，但沸点低、易挥发， 不常于提取溶剂；对色素溶解性好，不常于提取溶剂；对色素溶解性好， 常用于分离、精制。常用于分离、精制。7亲脂性有机溶剂亲脂性有机溶剂 对化合物溶解选择性较强对化合物溶解选择性较强 水溶

4、性杂质少、易纯化水溶性杂质少、易纯化 连续回流法连续回流法 挥发性大、易燃烧挥发性大、易燃烧 回流法回流法有毒、价格昂贵，有毒、价格昂贵， 对提取设备要求高对提取设备要求高 苷元苷元 穿透力较弱，提取时间长穿透力较弱，提取时间长 某些苷类某些苷类作为提取溶剂不常用作为提取溶剂不常用 游离生物碱游离生物碱 。8 乙醚乙醚 bp.35bp.35，极易燃，极易燃 氯仿氯仿 bp.61bp.61、d 1.48d 1.48，不易燃，毒性大，不易燃，毒性大 对生物碱溶解性好对生物碱溶解性好 苯苯 bp.80.1bp.80.1，毒性大，毒性大 石油醚石油醚 沸程沸程30306060、60609090、 90

5、90120 120 脱脂、脱色脱脂、脱色 9（二）水蒸气蒸馏法（二）水蒸气蒸馏法 适用于挥发性成分（主要适用于挥发性成分（主要 是挥发油）的提取是挥发油）的提取（三）二氧化碳超临界流体萃取技术（三）二氧化碳超临界流体萃取技术（COCO2 2-SFE-SFE）COCO2 2-SFE-SFE ：以超临界流体作为萃取：以超临界流体作为萃取介质的一种提取新技术。介质的一种提取新技术。超临界流体超临界流体：处于临界温度（：处于临界温度（TcTc）、临界压力）、临界压力（PcPc）以上，介于气体与液体之间）以上，介于气体与液体之间的流体。的流体。 10特点特点：具有液体和气体的双重特性，：具有液体和气体的

6、双重特性，如：密度与液体近似如：密度与液体近似 黏度与气体近似黏度与气体近似 对很多物质有很强对很多物质有很强扩散系数是液体扩散系数是液体 的溶解能力的溶解能力 的的100100倍倍中药提取常用的超临界流体中药提取常用的超临界流体 ：二氧化碳二氧化碳11 优点：优点： 1.1.临界温度（临界温度（TcTc=31.4=31.4）接近室温）接近室温, , 热敏成热敏成 分稳定分稳定. . 2. 2.临界压力（临界压力（Pc=7.37 MPaPc=7.37 MPa）不高）不高, , 易操作易操作. . 3. 3.本身呈惰性，与化合物不反应本身呈惰性，与化合物不反应. . 4. 4.价格便宜价格便宜.

7、 .12超临界流体萃取中药成分的主要优点：超临界流体萃取中药成分的主要优点： 1. 1. 可以在接近室温下工作，防止热敏成分可以在接近室温下工作，防止热敏成分 的破坏或逸散。的破坏或逸散。 2. 2. 萃取过程几乎不用有机溶剂，萃取物中萃取过程几乎不用有机溶剂，萃取物中 无溶剂残留，对环境无污染。无溶剂残留，对环境无污染。 3. 3. 提取效率高，节约能耗。提取效率高，节约能耗。13 二中药化学成分分离与精制方法二中药化学成分分离与精制方法分离依据分离依据 分离方法分离方法 分离原理或特点分离原理或特点 二相萃取法二相萃取法 逆流分溶法（逆流分溶法（CCDCCD） 液滴逆流色谱法（液滴逆流色谱

8、法（DCCCDCCC） 高速逆流色谱法（高速逆流色谱法（HSCCCHSCCC） 液液- -液分配柱色谱液分配柱色谱 正相色谱和反相色谱正相色谱和反相色谱 加压液相色谱法加压液相色谱法 正相色谱和反相色谱正相色谱和反相色谱 快速色谱快速色谱 低压液相色谱（低压液相色谱（LPLCLPLC） 中压液相色谱（中压液相色谱（MPLCMPLC） 高压高压( (效效) )液相色谱法（液相色谱法（HPLCHPLC） 分配系数（分配系数（K K）差异）差异 14 溶解度差异溶解度差异溶剂沉淀法溶剂沉淀法水提醇沉法（水水提醇沉法（水/ /醇法）醇法） 除去多糖、蛋白质等水溶性杂质除去多糖、蛋白质等水溶性杂质醇提水

9、沉法（醇醇提水沉法（醇/ /水法）水法） 除去树脂、叶绿素等脂溶性杂质除去树脂、叶绿素等脂溶性杂质醇醇/ /醚（丙酮）法醚（丙酮）法 皂苷的纯化（除去脂溶性杂质）皂苷的纯化（除去脂溶性杂质）酸酸/ /碱法碱法 生物碱的分离纯化生物碱的分离纯化 碱碱/ /酸法酸法 酸性成分（如苷元）的分离纯化酸性成分（如苷元）的分离纯化试剂沉淀法试剂沉淀法钙、钡、铅盐沉淀法钙、钡、铅盐沉淀法 酸性成分的分离酸性成分的分离生物碱沉淀试剂沉淀法生物碱沉淀试剂沉淀法 生物碱的分离纯化生物碱的分离纯化结晶及重结晶结晶及重结晶 化合物的进一步精制化合物的进一步精制溶解度差异溶解度差异15 物理吸附（表面吸附）物理吸附（表

10、面吸附） 无选择性、吸附无选择性、吸附 可逆、可快速进行，应用较多可逆、可快速进行，应用较多 硅胶硅胶 极性吸附剂极性吸附剂 氧化铝氧化铝 极性吸附剂极性吸附剂 吸附性差别吸附性差别 活性炭活性炭 非极性吸附剂非极性吸附剂 化学吸附化学吸附 有选择性、吸附牢固或不可有选择性、吸附牢固或不可 逆、洗脱难，逆、洗脱难， 应用较少应用较少 半化学吸附半化学吸附 吸附力介于上述二者之间吸附力介于上述二者之间吸附性差别吸附性差别 16碱性氧化铝对酚酸类（黄酮、蒽醌）的吸附碱性氧化铝对酚酸类（黄酮、蒽醌）的吸附酸性硅胶对生物碱的吸附酸性硅胶对生物碱的吸附聚酰胺聚酰胺 （氢键吸附）（氢键吸附）大孔吸附树脂大

11、孔吸附树脂吸附原理（范德华引力或产生氢键）吸附原理（范德华引力或产生氢键） 分子筛原理（本身多孔性结构的性质决定的）分子筛原理（本身多孔性结构的性质决定的）吸附性差别吸附性差别 17透析法透析法 ( (半透膜膜孔的半透膜膜孔的分子筛作用分子筛作用) )凝胶滤过法凝胶滤过法 ( (三维网状三维网状结构的分子筛作用结构的分子筛作用) ) 超滤法超滤法 ( (分子大小不分子大小不同引起的扩散速度的同引起的扩散速度的差别差别) ) 超速离心法超速离心法 ( (溶质在溶质在超速离心作用下沉降超速离心作用下沉降性的差别性的差别) ) 蛋白质的脱盐精制蛋白质的脱盐精制 蛋白、多糖的分离及蛋白、多糖的分离及

12、小分子化合物的分离小分子化合物的分离 大分子化合物精制分离大分子化合物精制分离 同上同上 分子大小差别分子大小差别 18离子交换树脂法离子交换树脂法 氨基酸、生物碱、氨基酸、生物碱、 有机酸的分离有机酸的分离阳离子交换树脂阳离子交换树脂阴离子交换树脂阴离子交换树脂 离解程度不同离解程度不同19常用色谱分离方法介绍常用色谱分离方法介绍 ： 吸附色谱吸附色谱吸附剂吸附剂 分离原理分离原理 吸附规律吸附规律 应应 用用 硅胶硅胶 吸附原理吸附原理 弱酸性、极性吸附剂弱酸性、极性吸附剂 广泛（酸、碱及广泛（酸、碱及 化合物极性越大、化合物极性越大、 中性成分均可）中性成分均可） 吸附能力强（难洗脱）吸

13、附能力强（难洗脱） 溶剂极性越小，吸附力越强溶剂极性越小，吸附力越强 氧化铝氧化铝 吸附原理吸附原理 碱性、极性吸附剂碱性、极性吸附剂 碱性、中性成分碱性、中性成分 吸附规律同上吸附规律同上 （酸性成分与铝络合（酸性成分与铝络合）活性炭活性炭 吸附原理吸附原理 非极性吸附剂非极性吸附剂 从稀水溶液中富集微量物质从稀水溶液中富集微量物质 吸附规律与上相反吸附规律与上相反 脱色（脂溶性色素）脱色（脂溶性色素） 20 聚酰胺聚酰胺 氢键吸附氢键吸附 酚羟基数目多，吸附力强酚羟基数目多，吸附力强 能形成分子内氢键者，吸附力下降能形成分子内氢键者，吸附力下降 黄酮、蒽醌的芳香化程度高黄酮、蒽醌的芳香化程

14、度高 吸附力增强吸附力增强 水洗脱力弱水洗脱力弱21大孔吸附树脂大孔吸附树脂 吸附原理吸附原理 非极性化合物易被非极性树脂非极性化合物易被非极性树脂 吸附吸附-糖与苷的分离糖与苷的分离分子筛原理在分子筛原理在溶剂中溶解度增大，吸附力溶剂中溶解度增大，吸附力 下降（从水提液富集苷类）下降（从水提液富集苷类） 非极性树脂，极性小的溶剂洗脱力强非极性树脂，极性小的溶剂洗脱力强 22液液- -液分配色谱（分配原理）液分配色谱（分配原理）类类 型型 固定相固定相 流动相流动相 应应 用用正相色谱正相色谱 水水 BAW BAW系统系统 极性、中极性物质分极性、中极性物质分离离 （以（以PPCPPC为例）为

15、例）反相色谱反相色谱 ODSODS 20.2 20.2 105105 1mg 1mg左右左右制备用高压液相色谱（制备用高压液相色谱（HPLCHPLC） 5mg 5mg中压液相色谱中压液相色谱 ( MPLC ) 5.05( MPLC ) 5.0520.2 20.2 105 100mg105 100mg低压液相色谱低压液相色谱 ( LPLC ) 5.05 ( LPLC ) 10mg105 10mg24葡聚糖凝胶色谱葡聚糖凝胶色谱 类类 型型 原原 理理 溶胀溶剂溶胀溶剂 应应 用用葡聚糖凝胶葡聚糖凝胶 分子筛分子筛 水水 多糖、多肽、多糖、多肽、 （大（大小）小） 蛋白质分离蛋白质分离 羟丙基羟丙

16、基 分子筛分子筛 水、极性水、极性 适于不同类型适于不同类型葡聚糖凝胶葡聚糖凝胶 （糖苷）（糖苷） 有机溶剂有机溶剂 吸附原理吸附原理 或二者的混合溶剂或二者的混合溶剂 （苷元）（苷元） 化合物分离化合物分离25离子交换吸附树脂离子交换吸附树脂 树脂类型树脂类型 原原 理理 应应 用用阳离子交换树脂阳离子交换树脂 离子交换离子交换 从酸水溶液中吸附碱性从酸水溶液中吸附碱性 成分（生物碱）成分（生物碱） 强酸性（强酸性（R-SO3-H+） 阳离子阳离子 除去酸性、中性成分除去酸性、中性成分弱酸性（弱酸性（-COO-H+）阴离子交换树脂阴离子交换树脂 离子交换离子交换 从碱水溶液中吸附酸性从碱水溶

17、液中吸附酸性 成分（有机酸）成分（有机酸）强碱性（强碱性（RN+(CH3)3CI-） 阴离子阴离子 除去碱性、中性成分除去碱性、中性成分弱碱性弱碱性 (伯、仲、叔胺伯、仲、叔胺)26三、结构研究三、结构研究化合物纯度的判定方法化合物纯度的判定方法1 1结晶均匀、一致。结晶均匀、一致。2 2熔点明确、敏锐（熔点明确、敏锐（0.51.00.51.0）3 3TLC (PPC):TLC (PPC):三种以上不同展开剂展开，三种以上不同展开剂展开， 均呈现单一斑点。均呈现单一斑点。4 4HPLCHPLC、GCGC也可以用于化合物纯度的判断。也可以用于化合物纯度的判断。27（二）四大光谱在结构测定中的应用

18、（二）四大光谱在结构测定中的应用v紫外紫外 可见光谱（可见光谱（UV -VISUV -VIS） 共轭共轭体系特征体系特征v分子中电子跃迁（从基态至激发态）。分子中电子跃迁（从基态至激发态）。 n-n-* *、-* * 跃迁可因吸收紫外光及跃迁可因吸收紫外光及可见光所引起，吸收光谱将出现在光的紫可见光所引起，吸收光谱将出现在光的紫外区和可见区（外区和可见区（200200700nm700nm） 200nm 400 700nm200nm 400 700nm 紫外区（紫外区（UVUV） 可见区（可见区（VISVIS） 28 应用：应用：v推断化合物的骨架类型推断化合物的骨架类型 共轭系统。共轭系统。v

19、取代基团的推断。如加入诊断试剂推断黄取代基团的推断。如加入诊断试剂推断黄酮的取代模式（类型、数目、排列方式）酮的取代模式（类型、数目、排列方式）v用于含量测定（以最大吸收波长作为检测用于含量测定（以最大吸收波长作为检测波长进行含量测定）。波长进行含量测定）。29 红外光谱（红外光谱（IRIR）分子中价键的伸缩及弯曲振动所引起的吸收而测分子中价键的伸缩及弯曲振动所引起的吸收而测得的吸收图谱，称为红外光谱。得的吸收图谱，称为红外光谱。4000 3600 3000 1500 1000 625cm-1特征频率区特征频率区 指纹区指纹区特征官能团的鉴别特征官能团的鉴别 化合物真伪的鉴别化合物真伪的鉴别

20、30羟基（酚羟基、醇羟基）羟基（酚羟基、醇羟基） 36003200 cm-1 游离羟基游离羟基 3600 cm-1 氢键缔合羟基氢键缔合羟基 34003200 cm-1 羰基羰基 16001800 cm-1酮酮 1710 cm-1酯酯17101735 cm-1芳环芳环 1600、1580、1500cm-1 有有23个峰个峰 双键双键 16201680 cm-1 两个化合物完全相同的条件两个化合物完全相同的条件 1 1、 特征区完全吻合特征区完全吻合 2、 指纹区也需完全一致指纹区也需完全一致 1H-NMR（核磁共振氢谱）（核磁共振氢谱）:信息参数：化学位移（信息参数：化学位移（）、）、峰面积、

21、峰裂分峰面积、峰裂分（s 、d、t、q、m）及偶合常数及偶合常数（）31v（1 1）化学位移（）化学位移（ppmppm）: : v与与1H1H核所处的化学环境（核所处的化学环境（1H1H核周围的核周围的电子云密度）有关电子云密度）有关v电子云密度大，处于高场，电子云密度大，处于高场，值小值小v电子云密度小，处于高场，电子云密度小，处于高场，值大值大320.9-C-CH3 1.8-C=C-CH32.1-COCH3 3.0-NCH3 3.7-OCH3 11 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0-COOH -CHO Ar-H -C=C-H 常见结构的化学位移大致范围常见结构的化学位移大致范围

22、（要求熟记）（要求熟记） (ppm) 推断化合物的结构（含推断化合物的结构（含1H1H核基团的结构）核基团的结构） 33（二）峰面积（二）峰面积: : 磁等同质子的数目磁等同质子的数目 用积分曲线面积（高度）表示用积分曲线面积（高度）表示（三）峰裂分及偶和常数（三）峰裂分及偶和常数: :磁不等同两个或两组磁不等同两个或两组1H1H核在一核在一定距离内相互自旋偶合干扰，定距离内相互自旋偶合干扰，发生的分裂所表现出的不同裂分发生的分裂所表现出的不同裂分 符合符合 n+1 n+1 规律规律 ( n = ( n = 磁等同质子的数目磁等同质子的数目 ) ) 用偶合常数（用偶合常数（J J）表示）表示

23、峰裂分的数目峰裂分的数目 峰裂分的距离峰裂分的距离 不同系统偶合常数不同系统偶合常数 (J Hz) (J Hz) 大小大小s s 单峰单峰 d d 双峰双峰 t t 三重峰三重峰 q q 四重峰四重峰 m m 多重峰多重峰 34 芳环芳环 J邻邻610Hz J间间 03Hz J对对01Hz 双键双键 J顺顺711 Hz J反反1218 Hz 饱和烃类相邻碳原子上质子偶合常数的大小饱和烃类相邻碳原子上质子偶合常数的大小 与两个氢原子之间的立体夹角与两个氢原子之间的立体夹角有关有关 35v=60=60 J = 2 J = 24 Hz4 Hzv=180=180 J = 9 J = 910 Hz10

24、Hzv 环己烷及其类似物相邻碳原子上质子的偶合环己烷及其类似物相邻碳原子上质子的偶合常数常数v JaaJaa 10 1013Hz ( =18013Hz ( =180) )vJae 2Jae 25Hz ( =605Hz ( =60) )vJeeJee 2 25Hz ( =605Hz ( =60) )361 1H-NMRH-NMR核磁共振辅助技术核磁共振辅助技术：（1 1）重氢）重氢 (D(D2 2O) O) 交换交换 推断活泼质子推断活泼质子（羟基）的存在与否（羟基）的存在与否（2 2）核增益效应（）核增益效应（NOENOE）：）：指在核磁共振中选指在核磁共振中选择性照射一种质子使其饱和，则与该

25、质子在择性照射一种质子使其饱和，则与该质子在立体空间位置上接近的另一或数个质子信号立体空间位置上接近的另一或数个质子信号强度增高的现象。强度增高的现象。（3 3）溶剂位移：）溶剂位移：苯诱导位移苯诱导位移 由于溶剂分由于溶剂分子（苯）的接近，对化合物将发生不同的屏子（苯）的接近，对化合物将发生不同的屏蔽及去屏蔽作用，使质子化学位移发生变化蔽及去屏蔽作用，使质子化学位移发生变化的现象。的现象。371313C-NMRC-NMR（ 核磁共振碳谱核磁共振碳谱 ）：）： FT-NMR: FT-NMR: 即脉冲傅里叶变换核磁共振。其装即脉冲傅里叶变换核磁共振。其装置原理为采用强的脉冲照射使分子中所有的置原

26、理为采用强的脉冲照射使分子中所有的1313C C 核同时发生共振，生成在驰豫期内表现为核同时发生共振，生成在驰豫期内表现为指数形式衰减的正弦波信号（自由诱导衰减；指数形式衰减的正弦波信号（自由诱导衰减；FIDFID）经傅里叶变换即成为正常的）经傅里叶变换即成为正常的NMR NMR 信号。信号。38v随着脉冲扫描次数的增加及计算机的累加计随着脉冲扫描次数的增加及计算机的累加计算，算，1313C C信号将不断增强，噪音则越来越弱。信号将不断增强，噪音则越来越弱。v经过若干次的扫描及累加计算，最后即得到经过若干次的扫描及累加计算，最后即得到一张好的一张好的NMRNMR谱。由于该装置的出现及计算机谱。

27、由于该装置的出现及计算机的引入，才使得的引入，才使得1313C-NMRC-NMR用于有机化合物结构用于有机化合物结构研究成为可能。研究成为可能。v信息参数：化学位移（信息参数：化学位移（CC）、异核偶合常数）、异核偶合常数（JCHJCH）、驰豫时间（）、驰豫时间（T T1 1）39(1) (1) 化学位移：大致范围化学位移：大致范围 (C(C ） 0-200ppm0-200ppm 不同不同 1313C C 核核CC大小与大小与13C 核所处的化学环境（周围核所处的化学环境（周围电子云密度）有关电子云密度）有关 用于用于1313C C 核类型的推断核类型的推断 ( C ppm ) 150220(

28、 c=o) 200 150 100 50 0 c=c Ar 5080 (c-o) 饱和碳原子（饱和碳原子（060060） 主要结构主要结构1313C C 核核CC的大致范围的大致范围 ( ( 要求熟记要求熟记 ) ) 40常用常用1313C- NMRC- NMR测定技术及其特征：测定技术及其特征： (1) (1)质子宽带去偶（质子宽带去偶（BBOBBO）: : 也叫全氢去也叫全氢去偶（偶（COMCOM）. . 噪音去偶噪音去偶. . 采用宽频电磁辐射照射所有采用宽频电磁辐射照射所有1 1H H核使之饱和后测得的核使之饱和后测得的1313C- NMRC- NMR谱（即去掉所有氢核对碳核的偶合影响

29、）。谱（即去掉所有氢核对碳核的偶合影响）。41v特征：图谱简化，每个碳原子都为单峰，互不特征：图谱简化，每个碳原子都为单峰，互不重叠。重叠。v方便于判断碳信号的化学位移。方便于判断碳信号的化学位移。v伯、仲、叔碳峰增强，季碳为弱峰（照射伯、仲、叔碳峰增强，季碳为弱峰（照射1H1H核核产生产生NOENOE效应）效应）v无法区别碳上连接的无法区别碳上连接的1H1H核数目。核数目。42（2 2）偏共振去偶：（此法现已基本上被）偏共振去偶：（此法现已基本上被DEPTDEPT所替代）所替代）仅保留直接与碳原子相连仅保留直接与碳原子相连1H1H核对碳的偶合核对碳的偶合J 1CH（即去掉氢核对碳核的远程偶合

30、（即去掉氢核对碳核的远程偶合J 2CH J 3CH） 伯伯（-CH3) 表现为表现为 四重峰四重峰 （q）仲仲（-CH2-) 三重峰三重峰 (t)叔（叔（-CH-) 双峰双峰 (d) 季季（-C-） 单峰单峰 (s) 碳核（伯、仲、叔、季）类型的判断碳核（伯、仲、叔、季）类型的判断 43（3 3）DEPT (DEPT (无畸变极化转移增强法无畸变极化转移增强法) ) ：（为（为1313C- NMRC- NMR谱的一种常规测定方法）谱的一种常规测定方法） 通过改变照射通过改变照射1 1 H H核的脉冲宽度（或设定核的脉冲宽度（或设定不同的驰豫时间）使不同类型不同的驰豫时间）使不同类型1313C

31、C信号在谱图信号在谱图上呈单峰，并分别呈现正向峰或倒置峰上呈单峰，并分别呈现正向峰或倒置峰 44脉冲宽度脉冲宽度 峰的特征峰的特征=450 CH3 CH2 CH ( 代表正向峰代表正向峰)=900 CH =1350 CH3 CH CH2 （ 代表倒置峰代表倒置峰） 可用于区别伯（可用于区别伯（CHCH3 3）、仲（）、仲（CHCH2 2）、叔（）、叔（CHCH）碳信号与质子宽带去偶谱比较，还可以确定季碳信号与质子宽带去偶谱比较，还可以确定季碳（碳（-C-C-）信号）信号 45二维核磁共振谱（二维核磁共振谱（2 2D-NMRD-NMR谱）谱） 质谱（质谱（MSMS）: : 1 1确定分子量（高分

32、辨质谱确定分子量（高分辨质谱 可将分子量精可将分子量精确到小数点后三位）确到小数点后三位）, , 计算分子式。计算分子式。 2 2提供其他结构信息。如黄酮类，依碎片离提供其他结构信息。如黄酮类，依碎片离子峰可以确定子峰可以确定A-A-环环, B-, B-环的取代模式。环的取代模式。 3 3与标准图谱比较用于化合物的鉴别（相同与标准图谱比较用于化合物的鉴别（相同条件下，其裂解是符合一定规律的）。条件下，其裂解是符合一定规律的）。 4 4依裂解特征及碎片离子依裂解特征及碎片离子 推定或复核未知推定或复核未知化合物分子的部分结构。化合物分子的部分结构。 46质谱主要离子源的电离方式及特点：质谱主要离

33、子源的电离方式及特点： 电子轰击质谱（电子轰击质谱（EI-MSEI-MS）：目前常用。）：目前常用。但对于热敏成分及难于气化的成分但对于热敏成分及难于气化的成分（醇、糖苷、部分羧酸等）（醇、糖苷、部分羧酸等）大分子物质（多糖、肽类）难以气化大分子物质（多糖、肽类）难以气化 测不到分子离子峰测不到分子离子峰亦无法测得分子量亦无法测得分子量 47电离新方法电离新方法 （样品不必加热（样品不必加热 气化而直接电离）气化而直接电离） 化合物乙酰化或三甲基化合物乙酰化或三甲基硅烷化（硅烷化（TMSTMS化）化）制成热稳定性好的挥发制成热稳定性好的挥发性衍生物进行测定性衍生物进行测定 解决措施解决措施48

34、(1)(1)场解析质谱场解析质谱 FD-MSFD-MS(2)(2)快原子轰击质谱快原子轰击质谱 FAB-MSFAB-MS(3)(3)化学电离质谱化学电离质谱 CI-MSCI-MS(4)(4)电喷雾电离质谱电喷雾电离质谱 ESI-MSESI-MS(5)(5)基质辅助激光解吸电离质谱基质辅助激光解吸电离质谱( MALDI-MS )( MALDI-MS )(6)(6)场致电离场致电离 (FI-MS)(FI-MS)(7)(7)串联质谱（串联质谱（MS-MSMS-MS）49中药化学成分提取分离鉴别中药化学成分提取分离鉴别一般方法思考题：一般方法思考题： 1 1何谓有效成分及有效部位，二者有何区别？何谓有效成分及有效部位，二者有何区别？ 2 2中药化学成分二次代谢产物的生物合成途径中药化学成分二次代谢产物的生物合成途径 有哪些？其合成的化合物包括哪些类型？有哪些？其合成的化合物包括哪些类型？ 3 3中药化学成分的主要结构类型及性