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文档简介

1、前言方法一：直接从细胞中提取、酶切特点：（1）、如果从基因组DNA获取目的基因 相对于目的基因的长度，基因组的DNA长度太大。 （2）、从染色体以外的遗传物质中获得目的基因是常用的做法方法二、化学合成法人工合成寡聚核苷酸技术：60bp 1.2元/bp 在60bp与120bp之间 6.8元/bp提供DNA合成服务的公司： 上海生工生物工程有限公司 上海英俊生物科技有限公司 上海华诺生物科技有限公司 北京奥科生物技术有限责任公司 等特点：1、 合成的产物是单链DNA2、 5、3末端均为羟基3、应用场合： 真核生物基因在原核中表达； 难以得到模板的情况；获得双链的方法：（1）、3末端部分反向互补，混

2、合后在DNA聚合酶作用下互为模板形成双链（2）分段合成法OH，先用激酶处理，使磷酸化连接酶OH，先用激酶处理，使磷酸化（3）、分段合成，结合PCR技术PCR方法三、PCR技术（1）、直接从原核微生物细胞或质粒中扩增目的片段（2）、引入突变a、引物5端引入b、定点突变，SOE技术c、易错PCR方法四、RT-PCR技术 针对真核生物基因不连续的特点，利用mRNA为核苷酸信息资源，用逆转录-PCR法获得目的基因AAAAAA 35T T TT T TComplimentary DNART：Reverse TranscriptaseSummary:1、细胞中提取；2、化学合成；3、PCR技术；4、RT-PCR前言n粘性末端、平整末端200多种限制性内切酶，

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