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文档简介
1、现在SNP的常用检测方法主要有:Taqman法、质谱法、芯片法、测序法。 Taqman法:准确性高,适合于大样本、少位点,价格比较贵; 质谱法:准确性高,适合于大样本、多位点(能检测25个位点); 芯片法:准确性较低,适合于超多位点分析; 测序法:非常准确,但是价格也非常的高,但是对于少样本、超多位点还是非常好的选择。SNP检测方法汇总分析SNP的方法有许多种,本文收集目前还在用的方法,按通量从高到低排列:全基因组测序这是最贵的方法,但也是看SNP最全的方法大概一个人样本,花2万元外显子组测序外显子组测序,也可以得到较全面的SNP信息大概一个人样本,花1.5万元随着人全基因组测序的价格降到2万
2、元左右,外显子组测序会很快退出市场全基因组SNP芯片原理,核酸杂交,荧光扫描Illumina和Affymetrix都有很著名的全基因组SNP芯片,例如:Affymetrix: CytoScan,SNP 6.0,Illumina: 660,中华,450K等SNP芯片,在20005000元每样本,还是比全基因组测序的2万元一个样本的价格要低质谱法原理,精确测量PCR产物的分子量,就可以知道SNP位点上是A/C/G/T中的哪一个Sequenome MassArray法测中等通量的SNP位点是十分准确的单个位点、单个样本的费用约2元人民币无需预制芯片、预订荧光探针,只要合成常规的PCR引物就
3、可以做实验了如果测几十个点,到上百个点,是很方便的方法SNPseq法此方法为天昊公司所创,一次测几百个位点原理:用Goldgate法做出针对某些位点的多重PCR片段高通量测序,数据分析得到SNP位点结果SNPlex中等偏高通量的方法,一次几十个位点原理:用末端特异的引物做多重PCR,把模板进行扩增基于毛细管电泳,把片段分离开,读颜色SNaPshot中等通量的方法设计3'位挨着目标位点的探针用双脱氧的荧光标记ddNTP做一个碱基的延伸毛细管电泳,看延伸的这个碱基是什么颜色Taqman法Taqman原理,如果要找原理,请回复“荧光”两字Taqman方法,一次一管测一个位点通量最低,但是结果可靠原理:设计与SNP位点互补的荧光探针,其中一个标VIC(红色荧光基团),另一个标FAM(绿色荧光基团),同时分别有淬来基团吸光Taq酶有5'->3'的外切酶活性,如果探针粘有模板上,就被切碎探针被切碎后,荧光基团与淬灭基团分离,发出荧光。看荧光颜色,就可以知道SNP位点上是什么碱基ArrayTape法基于Taqman原理用塑料卷代替微孔板,用水浴锅代替PCR仪,提供通量费用降到0.7元/SNP/样本以下OpenArr
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