非诺贝特对高脂饮食诱导胰岛素抵抗大鼠血浆脂联素和内脂素的影响

1、r 研究简报r非诺贝特对高脂饮食诱导胰岛素抵抗大鼠血浆脂联素和内脂素的影响王丽萍, 王佑民, 王文平(安徽医科大学内分泌代谢病研究所#第一附属医院内分泌科, 安徽合肥 230022胰岛素抵抗(i nsuli n resistances , I R 是肥胖和2型糖尿病的重要病理生理特征。非诺贝特是过氧化物酶体增殖物激活受体-A 激动剂, 具有抗炎、改善胰岛素抵抗和调节脂肪因子分泌的作用1。本研究观察非诺贝特对高脂饮食诱导胰岛素抵抗大鼠的糖代谢、脂联素和内脂素的影响, 探讨非诺贝特改善胰岛素抵抗的可能机制。1 材料与方法1. 1I R 大鼠模型的建立及分组 45只6wk 龄普通级SD 大鼠(购自安

2、徽安立实验动物公司 适应性喂养1wk 后, 随机分为2组:普通对照组(NC , n =15, 高脂饮食组(HF, n =30 。NC 给予普通饲料, HF 给予高脂饲料。大鼠自由进食和饮水。12w k 后, H F 随机分为非诺贝特组(FF, n =15 和高脂对照组(HC , n =15 。FF 给予非诺贝特(购自法国利博福尼公司 30mg #kg -1#d -1灌胃, NC 、H C 给予蒸馏水灌胃4wk 。1. 2 生化指标、脂联素和内脂素测定 12wk 时, 2组大鼠各10只, 禁食8h , 眼内毗静脉窦采血2m ; l 16wk 时, 大鼠禁食8h , 下腔静脉采血分离血浆, -20

3、e 保存。采用酶法测定空腹血糖(FB G ; 采用放射免疫法测定空腹胰岛素(F INS , 购Effects of fenofi b rat e on adiponectin and visfati n pl a s m a concentrations i n rats w it h li p id -induced in -sulin resist anceWANG L-i p i n g , WANG You -m in, WANG W en -p i n g(Instit u te of E ndocrinology and M etabo lism; A nhuiM edical U

4、ni -versity, the F irs t Affiliated H o s p ital of A nhui M e d ical Univers it y, H e f ei 230022, China 中国图书分类号:R-332; R 344; R 4461112; R 587110513; R 58912; R 977115文献标识码:A 文章编号:1001-1978(2008 01-0139-02关键词:非诺贝特; 胰岛素抵抗; 脂联素; 内脂素K ey word s :fenofi brate ; i nsuli n resistance ; adi ponecti n ;

5、v i sfati n收稿日期:2007-08-13, 修回日期:2007-10-14基金项目:安徽省教育厅重点资助课题(No2006K J 089A作者简介:王丽萍(1981-, 女, 硕士生, 研究方向:糖尿病与肥胖症, Te:l E-m a i :l m ayjiazhutao 126. co m; 王佑民(1964-, 男, 教授, 硕士生导师, Te:l E-m ai:l youm i nw ang 21cn . co ml yzed stru ctural iso m erizati on of the d i m er i

6、zati on initi ation s i te ofH I V-1J.B ioche m ist ry , 2002, 41(50:14762-70. 13M ah m ood N,J haum eer L S, Sa m pson J , et a. l An t-i H I V acti vityand m echan i s m of acti on ofm acrocyclic d i a m i de SRR-SB3J.J P har m Pharmacol , 1998, 50(12:1339-42.14H el d si nger A, Sh ar m een L . Fu

7、n cti on al recons tit u tion of lost acti vityof ch e m icall y cross -li nked orm utan tm oloney m uri ne l euke m i a virusnucl eocaps i d p rot eins by tran s -co mp le m entation J .Arc h Virol ,2001, 146(12:2385-400.15H uangM , M aynard A, Tu rp i n J A, et a. l Ant-i H I V agen ts t hat se -l

8、 ecti vel y target retroviral nucleocaps i d p rotei n zi n c fi ngers w ithout affecting cellu l ar z i nc fi nger p rotei ns J .J M e d Ch e m , 1998, 41(9:1371-81.E stablish m ent of a screen i ng m ethod for H I V -1NCp7i nhi bitorsWANG Yun -hua , WANG Ru-i r u i , YANG L i u -m eng , Li Jian -f

9、eng , XU W e-i m i n g , Z H E NG Yong -tang1, 31, 31221(1. K ey Laboratory of A ni m alM odels and H u m an D iseaseM echan is m s , and Laboratory of M olecular Imm unopharmacology,K un m ing Institute of Z oo logy, Chi nese A cade my of Sciences, K un m ing 650223, China; 2. Instit u te of M e d

10、ical B iology, Chinese A cade my of M e d ical S ciences , Kun m ing 650231, China ;3. Graduate Schoo l of Ch i nese A cade my of S ciences , B eijing 100039, Ch i naAbstrac t :A i m Th is study a i m ed to expressH I V-1N Cp7(nu -cati on . Z i nc e jecti on ac ti v ity ofH 2O 2and AT-2w as ana l y

11、zed by cleo capsi de pro tein p7 and estab lish a m ethod screen i ng for i n -TSQ z i nc ion i ndicator . Furthe r , the zi nc ejection acti v ity o fK IZ -h i bito rs . M ethods NCp7prote i n cod i ng sequence was amp lified C M ser i es compounds w as a lso ana lyzed . Re s u lts Z i nc e jecti o

12、n fro m plas m id H I V-1pBRU 2. The PCR product w as i nserted i nto acti v ities o fH 2O 2and AT-2cou l d be m easured and so m e ofK IZ -the pe t 28a expression vector . Po siti ve clone w as se l ected and C M compoundsm i ght e j ec t t he zi nc ion from NCp7prote i n . Con -transfor m ed into

13、E . co li BL21DE3. Ce lls we re cu lt ured i n LB c l usion s The me t hod can be app lied to screen fo r inh i bito rs of m ed i u m and i nduced w ith IPTG. NCp7w as pur ified by Q sepha -H I V-1N Cp7prote i n . rose H. P . and fo llo w ed by SP sepharose H. P . chro m atography . K ey words :H IV

14、-1; N Cp7; expression ; purifica ti on ; i nh i b itors ; T he purity o f the N Cp7prote i n reached above 90%afte r purif-i screeni ngTab 1 I R i nd i ca tors a m ong t wo goupsafter 12w eeks of high fa t d i etGroup NC HF*自解放军总医院科技开发中心; 采用酶联免疫法测定脂联素(购自R&D公司 、内脂素(购自ADL 公司 。胰岛素抵抗指数HOMA-IR =l n(F

15、PG F I N S /2215 。1. 3 统计学处理 实验数据以x ? s 表示, 胰岛素经对数转换后进行分析, 两组间比较用配对t 检验; 3组比较用单因素方差分析(ANOVA 和S NK 检验; 以上统计均用SPSS 1310完成。2 结果2. 1 高脂饲料对大鼠HOM A -I R 的影响 高脂饮食12wk 后, 高脂饮食组FBG 、F I N S 、HOM A-I R 均高于N C(P <0105, T ab 1。FBG /mmol #L -1FI NS /mI U #L -1155. 03? 1. 2934. 18? 1. 70306. 38? 0. 89*53. 99?

16、1. 60*n HO M A -I R 1. 96? 0. 74*2. 73? 0. 55P <0105v s NC group2. 2 非诺贝特对HOM A -I R 、ad i ponec ti n 、visfati n 的影响 经非诺贝特治疗4wk , FF 的FBG 、F I N S 、HOM A-I R 、v isfa tin 均比HC 下降(P <0. 05, FF 的血浆脂联素含量高于HC(P <0105; FF 和NC 上述指标差异无显著性(P >0105, T ab 2 。Tab 2 I R i nd i ca tors and adi pose fa

17、ctors among t hree goups after 4w eeks of treat m ent w ith fenofi bra te (n =15Group NC HC FF*FBG /mmol #L -14. 96? 0. 857. 44? 2. 48#6. 07? 1. 27*FI NS /mI U #L -148. 44? 1. 85#74. 47? 2. 52*25. 54? 1. 55HOMA-I R 2. 21? 0. 653. 24? 1. 09#1. 87? 0. 49*Ad i ponecti n /mg #L -12. 30? 0. 651. 29? 0. 3

18、5#2. 39? 0. 67*V isfati n /L g #L -1699. 41? 89. 21763. 05? 86. 83#640. 80? 75. 93*P <0105vs H C group ; #P <0105vs NC3 讨论目前认为高脂饮食引起的IR 动物模型与人肥胖时的I R 状态相似1。高脂喂养SD 大鼠12w k 出现HOMA-I R 升高, 即I R 大鼠模型成功建立。FF 组经非诺贝特治疗4w k , I R 得到改善, 并伴有血浆内脂素浓度下降, 脂联素浓度升高。脂肪组织是内分泌器官, 分泌脂联素、内脂素等多种脂肪细胞因子。本实验中HC 血浆脂联素含

19、量低于NC 血浆脂联素含量。经非诺贝特处理的大鼠血浆脂联素明显上升, 提示脂联素可能参与非诺贝特改善胰岛素抵抗2。脂联素可能为治疗肥胖及肥胖相关性疾病提供新的药物作用靶点。在肥胖症和2型糖尿病等病理状态3, 4, 血浆内脂素及腹部脂肪组织内脂素mRNA 水平均上调。本实验中HC 大鼠血浆内脂素水平高于N C , 非诺贝特降低大鼠血浆内脂素水平, 提示非诺贝特可能通过参与调控内脂素的表达和分泌活动而调控IR 。综上, 本实验发现, 在高脂饮食引起的I R 模型中, 非诺贝特调节脂肪因子表达, 可能是非诺贝特改善胰岛素抵抗的机制。参考文献:1 田爱平, 郭赛珊, 申竹芳, 等. 高脂饲料与胰岛素抵

20、抗动物模型J.中国药理学通报, 2006, 22(3:267-9.1 T ian A P , Guo S S , Sh en Z F . Ins u lin resistant an i m alm od el es -tabli shed by h i gh fat d ietJ.Chin Phar m acolBu ll , 2006, 22(3:267-9.2 C hoiK C, Ryu O H, L ee K W, et a. l E ffect of PPAR -a l pha and-ga mm a agon ist on the exp res s i on of visfati n, C o mm un , 2005, 336(3:747-53.3 H ai der D G , Sch i nd l er K , SchallerG, et a. l Increased p l as m a v i sfa -ti n concentrati on s i n m or b idly obese sub jects are redu ced aft er gas -tri c band i ngJ.J C li n EndocrinolM etab , 2006, 91(4:1578-81.4 Sandeep S, V el m urugan K,