汉防己甲素白蛋白微囊含量测定研究

1、    汉防己甲素白蛋白微囊含量测定研究        提要用二阶导数紫外分光光度法测定汉防己甲素白蛋白微囊中汉防己甲素含量，可排除囊材的干扰，测得微囊中汉防己甲素的含量为(37.88±0.302)%(n=5)。方法操作简便、易行，结果准确可靠。 关键词汉防己甲素白蛋白微囊二阶导数紫外分光光度法STUDY ON QUANTITATION OF TETRANDRINE ALBUMIN MICROCAPSULESLi FengqianLu BinChen Wenbin*

2、(School of Pharmacy,The First Hospital*,West China University of Medical SciencesChengdu 610041)ABSTRACTA convenient method for deter-mination of tetrandrine albumin microcapsules was developed by means of second derivative ultraviolet spectrophotometry. The method involves dissolving spray dried al

3、bumin microcapsules in 0.1 mol/L HCl solution, and the interference of wall materials can be eliminated. The mean drug content of microcapsules was (37.88±0.302)%.This method was simple, rapid and accurate.Key WordsTetrandrine,Albumin microcapsule,Second derivative ultraviolet spectrophotometry

4、汉防己甲素(tetrandrine,TET)是从防己科植物粉防己的干燥块根中提取的双苄基异喹啉生物碱，具有消炎、镇痛、抗肿瘤及降血压等广泛的药理作用1。TET极有希望成为理想的抗肺动脉高压药物2。为了降低TET的毒性，延缓药物的释放，延长药物在肺动脉中的滞留时间，以生物降解的白蛋白为囊材，对TET用喷雾干燥工艺制成微囊，以提高其抗肺动脉高压作用。药物经微囊化后，测定包入的药物量，常需采用适当手段使药物从囊材中提取后测定。白蛋白微囊中药物的测定有四种方法3：直接测定法是通过测定介质及洗涤液中残留药量，根据质量守恒原理测定白蛋白微囊中药物的含量，但误差较大；放射性标记法可直接测定，但受药物的可标记

5、性和放射性污染所限制；消解微囊后测定，用酸或碱水解囊材，可能会破坏药物；以酶降解囊材则会因酶降解物引起干扰而对测定结果带来误差。现用TET白蛋白微囊可溶于HCl中的特点，以HCl液为对照，测定白蛋白微囊中汉防己甲素的含量。结果比较满意。1仪器与材料Beckman-DU 640型紫外分光光度计(美国)；AE-200型电子天平(德国)。汉防己甲素对照品(中国药品生物制品检定所)；汉防己甲素白蛋白微囊(自制)；牛血清白蛋白(BSA，上海丽珠东风生物技术有限公司)，空白白蛋白微囊(自制)；HCl溶液(0.1mol/L)。2测定方法2.1定量方法及测定波长的选择取适量TET对照品及牛血清白蛋白，加HCl

6、溶液，配成一定浓度的溶液，以HCl溶液作空白，在200400nm波长范围内进行扫描(1)，可见BSA对TET的测定明显存在干扰。经试验，BSA在288nm和293nm处二阶导数振幅之差几乎为零(2)。故选择288nm和293nm处二阶导数振幅之差的绝对值，即峰谷矩(H)进行定量分析。Fig 1Zero derivative spectrumFig 2Second derivative spectrum1 BSA2 TET2.2标准曲线精密称取TET对照品约12mg，置于100ml量瓶中，加HCl溶液振摇，使溶解，并稀释至刻度，摇匀，即配成一定浓度的对照贮备液。取贮备液0.2、0.4、0.8、1

7、.2、1.8ml于25ml量瓶中，用HCl溶液定容。以HCl液作空白，分别测定288nm和293nm处二阶导数的振幅值，计算H，以H对标准稀释液的浓度(c)进行回归，浓度在1085g/ml范围内线性良好，其回归方程为：c=2.3008×103H-0.8657r=0.99992.3稳定性考察取标准曲线项下的各标准稀释液，分别在不同时间内测定H值。结果发现，H值在2d内几乎不发生变化，最大浓度变化值不超过原浓度的1.6%。2.4背景材料考察在HCl溶液加入适量TET标准贮备液，然后加入高、中、低比例的空白微囊，按“2.2”项下要求测得TET的平均回收率为101.27%。由此可见，背景材料

8、对微囊含量测定无干扰。2.5回收率试验模拟含量测定的条件，在HCl溶液中加入适量空白白蛋白微囊和汉防己甲素各标准贮备液适量于100ml量瓶中，加入HCl溶液使之完全溶解，定容，过滤、弃初滤液，取续滤液5ml，移入25ml量瓶中，稀释至刻度，测定282nm和293nm处二阶导数的峰谷矩，代入回归方程，计算汉防已甲素的百分含量，结果见表1。Table 1Results of recovery test(n=3)Blank micrcapsules(mg)TET added(g/ml)TET measured(g/ml)Recovery±SD(%)22.910.46310.17897.28

9、±0.010223.145.18245.00999.62±0.514723.080.85280.50699.57±0.16452.6微囊中药物含量测定精密称取汉防己甲素白蛋白微囊适量，按“2.5”项下，测定结果见表2。 Table 2TET content of albumin microcapsules(n=3)Totalmicrocapsules(mg)HConcentrationmeasured(g/ml)Drugcontent(%)Mean content±SD(%)71.30.023753.6637.6372.50.024054.3537.48

10、70.80.023853.8938.0937.88±0.30271.60.024154.5838.1172.20.024355.0438.123讨论 采用氯仿回流法提取明胶-羧甲基纤维素钠微囊中TET，然后经薄层扫描法进行含量测定4，受展开条件及展开剂用量等多种因素的影响，操作与结果难于控制。考虑到TET可与稀盐酸成盐而溶解，且白蛋白喷雾干燥微囊具有一定的水溶性，故选择HCl溶液作为测定介质，用二阶导数法可不受囊材的干扰，测定方法简便易行，结果准确可靠。九五国家科技攻关项目(96-906-02-17)作者简介：李凤前华西医科大学1997级博士研究生陆彬通讯联系人作者单位：李凤前陆彬华西医科大学药学院成都 610041陈文彬华西医科大学药学院附一院成都 610041参考文献1蔡德海.粉防己碱的药理研究进展.中草药，1994，25(11)6102王怀良，刘可及，金鑫等.汉防己甲素对犬缺氧性肺动脉高压模型血流动力学的作用及对血气水平的影响.中国医科大学学报，1994，23(4)