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文档简介

1、痰涂片镜检操作规范痰涂片镜检操作规范 宁波市疾病预防控制中心 平国华一、标本的来源与收集 初诊时留取标本数量v以三份标本的阳性检出例数作为100,留取一份标本的阳性检出例数占全部阳性例数的80,留取两份标本的阳性检出例数占全部阳性检出例数的95。不同痰液涂片阳性率表(仅供示例) 性质 例数 阳性数 阳性率 干酪样痰 55 36 65.5% 血性痰 46 16 34.8% 粘液性痰 529 56 10.6% 水样痰 92 7 7.6%二、痰标本制作前的准备(一)、脱脂玻片(一)、脱脂玻片95%乙醇浸泡)乙醇浸泡)(二)、竹签(二)、竹签(三)、痰涂片模板(三)、痰涂片模板脱脂玻片脱脂玻片95%的

2、乙醇浸泡后晾干备用的乙醇浸泡后晾干备用痰涂片摸板痰涂片摸板10mm20mm的椭圆的椭圆 于玻片右于玻片右2/3的中心的中心使用铅笔在磨砂面上标记使用铅笔在磨砂面上标记三、痰涂片的制作v标本静置消毒标本静置消毒v确保标本编号一致初诊确保标本编号一致初诊3个、治疗或随访个、治疗或随访2个)个)v轻轻打开盖子轻轻打开盖子v挑取标本中脓样或可疑部分挑取标本中脓样或可疑部分v按照模板,从椭圆形中心开始,从里按照模板,从椭圆形中心开始,从里外外里,里,反复多次涂抹,稍晾,待痰膜水分挥发部分,反复多次涂抹,稍晾,待痰膜水分挥发部分,视痰膜厚薄程度,再次挑取适量痰液,涂至满视痰膜厚薄程度,再次挑取适量痰液,涂

3、至满意为止循环覆盖)意为止循环覆盖)不得使用火焰加热的方法加速痰膜干燥不得使用火焰加热的方法加速痰膜干燥太厚太厚 适宜适宜 太薄太薄痰膜的厚薄痰膜的厚薄v水样痰的涂法水样痰的涂法v 可用反复多次覆盖法,实在挑取不到什么可用反复多次覆盖法,实在挑取不到什么东西,先用吸管吸取适量标本标本一定要静东西,先用吸管吸取适量标本标本一定要静置),稍晾时间较长),再用竹签涂抹均匀置),稍晾时间较长),再用竹签涂抹均匀致满意致满意v涂抹完的标本自然干燥后,再火焰固定涂抹完的标本自然干燥后,再火焰固定5秒秒内来回内来回4次)次)v初染时碱性复红与细胞壁的分枝菌酸结合v脱色时脱色液不能将碱性复红从抗酸菌细胞壁上洗

4、脱v抗酸菌的染色保持初染的颜色v复染提供背景对比五、本卷须知v加热固定后待彻底冷却加热固定后待彻底冷却v染液覆盖整个痰膜染液覆盖整个痰膜v染架要平衡染架要平衡v玻片间保持一定距离玻片间保持一定距离v冲洗用背面冲洗法冲洗用背面冲洗法v脱色时人不能离开脱色时人不能离开背面冲洗背面冲洗脱色脱色讨论1):痰盒正确否?right?那一种可以接受?讨论2滴加染液和加热讨论2滴加染液和加热讨论2滴加染液和加热附件仅供参考)六、评价痰涂片v位置位置v大小大小10mm20mm)v厚薄刚好透过报纸的厚薄刚好透过报纸的5号字体,镜下每个视号字体,镜下每个视野野20个左右细胞)个左右细胞)v染色肉眼看天蓝色染色肉眼看

5、天蓝色,无红无红/紫色斑块)紫色斑块)v零落(零落(10%痰膜面积)痰膜面积)单一的抗酸菌单一的抗酸菌“V”- 字形字形成簇的抗酸菌复染太浓造成的影响复染太浓造成的影响适宜的复染适宜的复染涂片检查视野顺序涂片检查视野顺序镜检:在淡蓝色背景下,抗酸杆菌呈红色,其它细菌和细胞呈蓝色 涂片结果报告标准(萋尼氏抗酸菌染色法)阴性 300 视野 0条报告菌数 300 视野 18条 阳性1 100视野 39条 阳性2 10视野 19条阳性3 每视野 19条阳性4 每视野 10条如何进行痰涂片质量控制痰标本收集:标本性状的控制加强于医生沟通)3份痰标本1即时痰、2夜间痰、3晨间痰)痰标本保存不能当日检查的保

6、存于冰箱防液化)染液控制用之前过滤一下一周一次)如何进行痰涂片质量控制v室内质控室内质控v抽查复检当日抽查复检当日10%的涂片,自查或互查的涂片,自查或互查v选取结果可疑的涂片复查,尤其是只看到一条选取结果可疑的涂片复查,尤其是只看到一条的或只在一处视野看到细菌的或只在一处视野看到细菌v选择痰阳病人有阴性结果的涂片选择痰阳病人有阴性结果的涂片v记录结果记录结果1-8条涂片条涂片玻片的保存v使用显微镜附带的镜油,或者是购买的镜油immersion oil),而不是香柏油cedar oil),则不需使用二甲苯,直接使用镜头纸擦拭即可v干燥后的玻片,按实验室序号及涂片编号放置在玻片盒中,存放在阴凉干燥环境中。处于潮湿炎热的环境中抗酸菌易于褪色。痰细菌学检查工作经常被忽视痰细菌学检查工作经常被忽视v人员不稳定,培训不足v实验室设备不足,更新较慢v不注意总结与提高如何提高痰细菌学检查在专业人员心目中如何提高痰细菌学检查在专业人员心目中地位地位v加强自身专业技术素质v保证痰细菌学检查工作质量v应用标准、统一的技术规范v注意积累、总结工作经验v不断

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