儿童PID免疫学改变

1、儿童PID免疫学改变    原发性免疫缺陷病（primary immunodeficiencydisorders， PID） 是一组少见而重要的免疫系统症候群， 其病因复杂， 无论是免疫活性细胞（如 T 细胞、 B 细胞、 吞噬细胞等）还是免疫应答分子（如细胞因子、 免疫球蛋白、 补体等）缺陷均可造成免疫功能失衡， 使机体抗感染免疫功能低下， 甚至并发自身免疫性疾病和肿瘤， 故在临床上对严重感染患儿的免疫功能检测尤为重要。 本研究对 76 例PID 患儿的免疫指标进行检测分析， 旨在加强临床儿科医师对该类疾病的认识， 提高临床诊治水平。1 对象与方法11

2、 对象收集上海交通大学医学院附属新华医院门诊和病房收治的 PID 患儿 76 例， 其中普通变异性免疫缺陷病（CVID）20 例， 细胞免疫缺陷病 10 例，联合免疫缺陷病 11 例， 低丙种免疫球蛋白血症 25例， 中性粒细胞减少症 3 例， 选择性 IgA 缺乏症（IgAD） 3 例， DiGeorge 综合征（DGS） 2 例， 共济失调毛细血管扩张症（AT）2 例。 诊断和分类标准参照 2009 年免疫学会国际联合会（International Unionof Immunological Societies， IUIS） PID 分类委员会公布的方案1。12 方法回顾性分析 PID 患

3、儿相关免疫功能的实验室检测结果。 检测指标包括血清免疫球蛋白（IgG、IgA、 IgM）、 T 细胞亚群（CD3、 CD4、 CD8、 CD4CD8）、 CD19细胞， 部分 CVID 患儿检测 IgG 亚类（IgG1、 IgG2、 IgG3、 IgG4）、 NK 细胞（CD16CD56） 百 分 比 及 T 细 胞 功 能 亚 群 及 活 化 指 标（CD4CD45RA、 CD4CD45RO、 CD8CD45RA、CD8CD45RO、 CD4HLA-DR）。13 统计学分析采用 SPSS140 软件进行统计学分析， 数据以均数 ± 标准差（x ± s）表示。 两组间比较用

4、秩和检验， P 005 为差异有统计学意义。2 结果21 PID 患儿体液免疫功能变化本组患儿中， CVID 及联合免疫缺陷病患儿的 IgG 均较正常值明显降低， 尤以 CVID 降低更为明显， 且伴 IgA 及 CD19细胞明显降低， 而联合免疫缺陷病患儿的 CD19细胞均值则增高达4580。 IgA 降低除见于 CVID 外， 主要见于 IgAD及 AT， 尤其是 IgAD 的 IgA 水平显著低于正常，仅为 005 gL； 中性粒细胞减少症患儿的免疫球蛋白不低反而均升高。 低丙种球蛋白血症患儿的IgG、 IgA 及 CD19细胞均降低。 见表 1。 本组 7 例CVID 患 儿 的 Ig

5、G 亚 类 的 检 测 结 果 显 示 ， IgG1、IgG3 均较同年龄正常值降低 ， 有 5 例 IgG2 降低 ，IgG4 均正常。 见表 2。22 PID 患儿 T 淋巴细胞亚群变化本组患儿中， 细胞免疫缺陷病、 联合免疫缺陷病及 DGS 患儿的 CD3、 CD4及 CD8T 细胞降低； 中性粒细胞减少症患儿的 CD4T 细胞及 CD4CD8比例有所降低； AT 患儿的 CD4 CD8比例也降低。 见表 3。23 CVID 患儿 NK 细胞和 T 淋巴细胞功能亚群及活化的变化对 8 例 CVID 患儿进行 NK 细胞及 T 淋巴细胞功能亚群及活化的检测， 其中 5 例患儿 CD4 CD

6、8比 例 倒 置 （CD4 CD8 09） 。 与 对 照 组 相 比 ，CVID 患儿 CD4HLA-DR和 CD8CD45ROT 细胞比例明显升高， CD4CD45RAT 细胞比例明显降低， 差异均具有统计学意义（P 均 001）。 CD4CD45RO、CD8CD45RA和 CD16CD56与对照组之间的差异均无统计学意义（P 均 005）。 见表 4。3 讨论PID 患儿大多存在 B 细胞功能障碍。 本组患儿中， 体液免疫功能主要检测了免疫球蛋白水平和CD19B 细胞， 两项检查均反映了 B 细胞的功能状态。 CD19 是一种相对分子质量为 95 000 的糖蛋白， 表达于所有 B 细胞

7、表面。 作为 B 细胞表面辅助因子之一， CD19 与其相应配体分子结合后， 提供协同刺激信号以使 B 细胞活化， 并调节其功能。PID 患儿抗体缺陷可能是 B 细胞本身发育障碍， 如抗体缺乏性免疫缺陷病往往出现抗体和（或）CD19B 细胞减少甚至缺如； 也可能与正常 B 细胞不能接受有缺陷的 T 辅助细胞的协同信号刺激有关。PID 中 CVID 发病率较高， 本院以往统计的近30 年的 PID 发病数为 93 例， 其中 CVID 22 例， 占2372。 本组中 CVID 及联合免疫缺陷病患儿 IgG均较正常值降低， 尤以 CVID 降低更为明显， 且伴有 IgA 及 CD19B 细胞明显

8、下降。 低丙种球蛋白血症患儿 IgG、 IgA 均降低， 而 B 细胞极少甚至缺如， 其 CD19B 细胞明显降低（ 2）。 中性粒细胞减少症患儿的 Ig 不低反而升高。 提示 CVID、 联合免疫缺陷病、 低丙种球蛋白血症不同程度的存在 B 细胞发育和活化障碍， 这导致 B 细胞功能缺陷， 从而使抗体产生障碍。 3 例 IgAD 及 2 例 AT患儿 IgA 降低， 尤其是 IgAD 患儿的 IgA 明显低于正常， 仅为 005 gL， 与文献报道一致3， 4。IgG 根据其重链结构不同分为 IgG1、 IgG2、IgG3 和 IgG4 4 种 亚 型 ， 其 中 IgG1 占 总 IgG

9、的70。 在 CVID 患儿， 由于 B 细胞功能受损， 其重链形成产生差异。 本组 20 例 CVID 患儿中 7 例进行了 IgG 亚型检测， 结果 7 例 IgG1 和 IgG3 均较正常降低， 5 例 IgG2 降低。 以往研究表明， IgG1 和IgG3 不仅有抗蛋白抗体的作用， 还有抗人类多种脂多糖抗原的作用， 两者在诱导补体介导的杀伤或对吞噬细胞介导的清除荚膜菌的作用较强。 本组 7 例 IgG1 低下的患儿， 临床上均有反复感染症状， 与上述推论相符。 IgG2 和 IgG4 主要是抗细菌脂多糖的抗体， 两者缺乏的患者对有荚膜的细菌易感， 血清 IgG2 浓度在临床上常作为对感

10、染易感性的标志。 因此 CVID 患者血清 IgG 亚类缺陷与感染有关， 其易感性与 IgG 亚类的综合变化有关， 临床上对 IgG 亚类的检测有助于判断其临床易感性5。T 细胞亚群中 CD3 代表总 T 细胞 ， 为成熟 T细胞膜上 T 细胞抗原识别受体（TCR）复合物的一个重要组成部分。 CD3 阳性细胞又可分为 CD4和CD8细胞。 CD4细胞为辅助 诱导性 T 细胞， CD8细胞主要为细胞毒性 T 细胞。 一般而言， CD3、CD4细胞及 CD4 CD8比例降低提示细胞免疫功能受损。 本组病例中， 细胞免疫缺陷病、 联合免疫缺陷病及 DGS 患儿的 CD3、 CD4细胞均降低。DGS

11、是由于胸腺发育不全导致的 T 细胞系列缺乏所致， 根据其细胞免疫缺陷的严重程度不同， 可分为不完全性和完全性 2 种。 本组 2 例 DGS 的CD3、 CD4和 CD8T 细胞均值均有所降低 ， 提示其可能属于不完全性 DGS。 CVID 虽被归于体液免疫缺陷范畴， 但近年来发现部分患儿同时存在 T细胞调节功能失常。 本组 CVID 患儿的 CD4T 细胞有所降低， 而 CD8T 细胞有所增加 ， 导致 CD4CD8比例降低， 提示其发病机制可能与 T 细胞对 B细胞的辅助功能不足而抑制功能加强有关。 联合免疫缺陷病（CID）是 PID 种最严重的一种， 其在细胞介导的免疫反应和抗体产生方面

12、均有严重的缺陷， 导致患儿易产生各种严重的及条件致病微生物的感染。 本组 CID 患儿 CD3、 CD4和 CD8T 细胞均降低， 尤以 CD3、 CD4更为明显。CD45RA 和 CD45RO 是 CD45 （ 白细胞共同抗原）的两种异型， 均属 I 型跨膜蛋白， 广泛存在于白细胞表面， 其胞浆均具有酪氨酸磷酸酶活性，在淋巴细胞的发育成熟、 功能调节及信号转导中具有重要意义。 CD45RAT 细胞被称为初始 T 淋巴细胞， 即未致敏 T 细胞； 而 CD45ROT 细胞被称为记忆 T 细胞， 具有辅助诱导作用6， 7。 本组 8 例CVID 患儿中， CD8CD45ROT 细胞比例明显升高，

13、CD4CD45RAT 细胞比例明显降低 。 文献报道 ，CVID 患者可出现 CD45R 异型分布的异常， Richards等8分析了 8 例 CVID 患者 CD4和 CD8T 细胞中CD45RA 和 CD45RO 的变化 ， 发现 7 例患儿存在CD45RA 和 CD45RO 表达的异常 ， 其中 4 例患者CD45RO 的表达是增加的 ， 与本研究结果基本一致。 我们推测， CD8CD45ROT 细胞比例升高， 在接受外界抗原刺激时， 可迅速启动 CTL 细胞的杀伤功能， 体内的免疫格局向细胞免疫偏移； 同时CD4CD45RAT 细胞比例的降低， 使得辅助 B 细胞产生抗体的 Th2 细胞减少， 导致体液免疫受损。HLA-DR 是 MHC-II 类分子， 是活化 T 淋巴细胞的表面标志。 本研究发现， CVID 患儿 CD3T 淋巴细胞表面 HLA-DR 的表达高于正常对照组， 这与国外很多报道相一致91