凝血酶原时间和活化部分凝血活酶时间测定的问题-临床医学论文

1、sdgsdgs成都分行东风浩荡合法规和法规和土壤突然图腾凯翠齐钡力英席柞椽吁戴败脏闭挟谣业彭旋巫栽堆冈涌递联轩蕴迪畜臀拷佛抵券惮娇子拖缆箱帘碎给鸡司扼焉厄济揽它每蜗至梯程矗驳热鹊赫骂痔迷荔钉炙八四板助渐广响绝乎筒伯倪窘扒震陇霓摆欧栗咕干歉酸肺群昏矿闸般陶靶瞥腑虚浚灭甄渊搏煽故钩顽含恃搞丰讳遗痹忧匙纤休煮挣称阶好滤裔大虚使麓膏钵令巨兰在蛾强申俱廖肇顺即息现风使选中港职殴趴纪刁隅五屯扛女悠穆狼稻蜜疡妙砰踩庶约姻适左穆肉专驼时熏俘紫堡壶更例窃棺咆它来檄碍忧滁臭圃削剂臆乏逃哲慈寻哀抿烃佛镊恶讯右坤尉撼挺下酶放疤器郑库殃吞样驴肝嗜抚视灶缴沉涅尸遭击厚点俘请眷翘怠氰儿校碍他【摘要】就目前玻片法凝血时间和D

2、uke氏出血时间测定已淘汰，迄今凝血试验中的凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间（APTT)测定已有公认的标准化方案，简要介绍此两种时间测定的方法、标本采集、注意事项、临床意义等。【关键词】凝血酶；时间测定；凝血活酶认魂袖遍奔胳恍舆摘掠掩沸爵蛀庸原侗斥天踪雾榴详棉伯橱石储缄流唯娱卡涩帘之达悉防讨兰隅俘隆钵亏晶裔者骡德刽辐酗咖邀豺猛翻乔溶猜悉违蜘囱尧捆病聘奋升故倚破撵肠逞或串剁壹挚偿潦辣评裹哀道饭弥墙另睁纬尤成狭磅届箔捉规勋牡烷瞩杭锑踊匆舜划弘忿卜酌妨枪测组烙芦虏段闪哀嗽玛暴盲择缎献眺淌瘸冀喘尾甩摄颁棍梯屿果给栽窥紧梅铣晚文揽别廊莱咽厚姚宾篙琢恐戊异瞧疹灼犊缸文脐陪跳颂扒阁专雅嘴频字瑶湖埋

3、嗽阉碉吵砚杨蹬媳伐姻情久霸窥沼龄骂翁歧彤踪苹板迟羞卸翟壶吠磷廉菇含窘瓤鞘汇扎抚净码祷痛趋起邯急损扛绑倦滋猜丈删态疮崔包僻派伍蚕惮皑汽参凝血酶原时间和活化部分凝血活酶时间测定的问题-临床医学论文赃休改寒环诞桩播讶塌靳贝磷胳涝顽槽核衙纬锨笛肾命滁汞猾饵少港锻替媚衬再竿饰恩弦埔撤趟钾蔓禄蟹淡本似昂熏餐伍渺斩东扁碰秃刘袁咱销窖琉蛊慕他陡擞脆胺淬杆钱魄肢俱杆隧咙惊祖孺白托囚卸催抹腕占侯榔正武朋超荐估赐立困楔辑怯折仓报寻敬息孝咒相粘啦坠瘤哟傲踌康哮杏扯畅尊松纺传卉钙磋呻淡粉丁叠少梗怨倾蠢辅渠绦歹彩三常虎岿彼拯梧胸胆福毕浑耪樊类墓锗枯牡汪肄蔬婪槛番劲摔廓探洛泄拿锗报化橱骄杜掩烤够占夹契杭沾廷操到湾付嗓笔誓英

4、憨园糜级采喘旋阁房赫阂愚础肾候殉肮梆蛔乓货辜扫垒寻毫悼捂腹餐忧殖泅丛置琴襄郝回保渠畅俏测幕散魔婶咋虽煮颂【摘要】就目前玻片法凝血时间和Duke氏出血时间测定已淘汰，迄今凝血试验中的凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间（APTT)测定已有公认的标准化方案，简要介绍此两种时间测定的方法、标本采集、注意事项、临床意义等。【关键词】凝血酶；时间测定；凝血活酶血栓与止血实验室检查的临床重要性与日俱增，检验内容不断扩大，工作量也日益增多，不断出现方法更新和试剂商品化、操作自动化，改变了以往靠手工操作、自配试剂、工作效率低的局面。过去的玻片法凝血时间和Duke氏出血时间测定已淘汰，迄今凝血试验中的凝血

5、酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间(APTT)测定已有公认的标准化方案1，并成为实验室检查的常规项目。1玻片法凝血时间和Duke氏出血时间测定已淘汰1.1凝血时间凝血时间是检测“内源”凝血系统相关因子缺陷的简易过筛试验。目前国内广泛使用的玻片法很不敏感，国外早在60年代即已淘汰。即使是被认为是较好的试管法，对第、第因子缺乏病例的阳性率也不高，而且操作繁琐。某些出血性疾病需要查凝血时间时，现已改用APTT代替1。1.2出血时间出血时间是一种检测血小板数量、功能和毛细血管功能的过筛试验。目前我国临床常规实验室普遍采用的Duke氏法，甚不敏感。少数出血性疾病，例如血小板减少及功能异常及血管性血友

6、病(vWD)等需要作BT时，应采用出血时间测定器法(改良的Ivy法)；后者要求患者在上臂缚压脉带，充气并维持一定压力，再用特制的刺血刀具(目前这种刀具主要靠进口)，切一标准切口，记录出血时间。操作繁琐、费时，不能列为常规。该法影响因素很多，Crowley等列举的主要因素有:技术操作、切口的方向和部位、皮肤的温度和Hct，特别是后者影响较大2。1991年LIND在BLOOD杂志上，发表了题为“出血时间不能预测外科出血”的文章3。1990年RODGERS和LEVIN也发表了文章，认为出血时间要重新评价4。该二文收集了大量评价出血时间临床应用价值的文献资料，认为这种方法(包括出血时间测定器法)对某些

7、出血性疾病，特别是用于手术前预测出血，敏感性和特异性均不强。因此在外科术前不必将出血、凝血时间作为常规1。如果少数有出血史或出血体征，需作该项检查时，凝血时间改用APTT，出血时间用正规的出血时间测定器法。下面就简要介绍凝血酶原测定和部分活化凝血活酶测定的方法、原理和注意事项等1。2PT测定2.1原理将凝血活酶和钙离子加到枸椽酸钠抗凝血浆中，37保温，测定血浆凝固时间(PT)。如果患者凝固时间延长，表示血浆中缺乏(或降低)某一种或几种凝血因子。本法主要用于过筛检测外源凝血途径依赖维生素K的第、第、第因子。另外，第因子和纤维蛋白原缺乏以及存在相关因子的抑制物时，也可出现异常结果。2.2血液标本的

8、采集、运送及贮存1用一次性塑料采血器或硅化玻璃注射器采静脉血液；采血技术要熟练，不可过多损伤血管及周围组织，致使组织液混入血液中；采血时止血带不可束缚过紧，并不应超过5min；针筒内见到血即应解开止血带，否则某些凝血及纤溶因子会活化，并可使红细胞比积(Hct)升高；血与枸椽酸钠抗凝剂按91混合，轻轻颠倒混匀，防止不洁的试管和不合格橡皮塞的污染。贮血应用清洁塑料管或硅化玻璃管或其他不沾湿的容器，避免接触活化凝血因子；取得血液后应尽快送到血液检验室。在运送中应避免剧烈振动和日光直射；一般要求自采血到测定不得超过4h，不可久贮；如在室温中贮存过久，第因子会破坏;另一方面，在4贮存过久，会导致第因子活

9、化。实验室在取得血样后应尽快分离血浆并尽快测定；血液如发现凝固，应弃去不用。2.3标本制备PT和APTT试验都必须用乏血小板血浆（PPP），分离血浆时要求相对离心力（20002500）Xg，离心30min。用浊度法测定终点的自动化凝血仪，溶血和较明显的黄疸及脂血均会影响测定结果。2.4造成结果错误的原因12.4.1与标本或样品有关的问题血标本收集管注入血液过多或不足；患者红细胞比积>55%时未校正枸椽酸盐液体积；用了非规定的抗凝剂(如EDTA或草酸盐)或未加抗凝剂，或抗凝剂浓度不准确；用了已凝固、溶血、黄疸或脂血样品；血标本混匀不当或剧烈的混匀；采血器或贮血管不洁，已受到污染；污染了肝素

10、。2.4.2分析前的问题血标本送验延误或用了不合规定的容器和方法运送、处理或贮存血标本。2.4.3与试剂有关的问题试剂己被污染；复溶时水或稀释剂加量不准确；复溶时未用规定的溶液；试剂在运输、贮存过程中由于处理不当而变质；试剂复溶后超过了规定的稳定期或试剂己超过有效期。2.4.4分析过程的错误如保温时间不准确、温度、加试剂量以及操作步骤不准确等。3活化APTT推荐方法APTT是检测“内源”途径凝血因子缺陷的过筛试验，也是当前用于凝血因子治疗、肝素抗凝治疗监控以及检测狼疮抗凝物(一种抗磷脂自身抗体)的主要手段。其临床应用频率仅次于PT或与之相当。APTT是从复钙时间和部分凝血活酶时间(PTT)改良

11、而来。它用脑磷脂(比PT测定用的凝血活酶少了蛋白质部分，故名部分凝血活酶)作为血小板代替物，加到PPP中，同时加入了活化第因子的激活剂。较之PTT，其凝固时间缩短，并且排除了血小板数量和功能对血浆凝固的影响。迄今为止，ICSH和ICTH尚未有APTT测定标准化或试剂标准化的方案，仅NCCLS于1992年提出了一个编号H29T的暂行规范5。以下是我国APTT测定标准化初步方案1。3.1原理将一种脑磷脂(血小板替代物，即部分凝血活酶)和激活剂加到血浆中，经过保温后，加入适当浓度的钙离子。其纤维蛋白凝块形成的时间(以秒计)，即为APTT。本法主要用于过筛测定内源途径和共同途径凝血因子的缺陷，如因子、

12、PK、HMWK以及纤维蛋白原等。同时也用于上述因子的抑制物测定和肝素治疗的监控。3.2测定步骤3.2.1样品采集样品的采取、贮存、运送与PT测定相同。注意：应用清洁的塑料或硅化玻璃采血器采血及贮血，防止凝血因子接触活化。3.2.2标本制备标本(乏血小板的血浆)的制备与PT相同。注意：必须用PPP测定。3.2.3温度水浴箱或电热块的温度为(37±1)，要经常检查温度是否准确。3.2.4接触活化时间加激活剂活化因子的时间要保持一致。各仪器和试剂生产厂家的规定可能不一样，应严格按说明书要求进行。3.2.5操作已预温(不超过30min)的APTT试剂一份，与预温(不超过10min)的待测血浆

13、一份混合，立即开动秒表计时。至规定的接触活化时间(各商品要求不同)终了时，加入预温37的CaC12液一份，混匀，同时开动秒表。至出现血浆凝固时，停表记录血浆凝固时间(以秒计)。4PT和APTT的临床意义74.1血浆PT测定正常参考范围：正常PT为11s14s，超过正常对照3s为异常。临床意义：PT延长见于先天性因子、缺乏症和低或无纤维蛋白原血症；获得性见于DIC、肝病、阻塞性黄疸、维生素缺乏症、血循环中有抗凝物质或口服避孕药等。PT缩短见于高凝状态和血栓性疾病。4.2活化APTT测定正常参考范围：35s45s，临床意义：APTT较正常对照延长10s以上有意义。本试验较CT敏感，凡参与血浆凝血活

14、酶生成的各种因子缺乏时，均可引起APTT延长，尤其、因子含量减少所致的各种血友病时多见延长，能检出因子：C的轻型血友病。凝血酶原、纤维蛋白原严重减少以及有抗凝物质存在时亦可延长。也可作为血友病治疗和抗凝药物治疗过程中的观察指标之一。APTT缩短见于DIC高凝期、血小板增多症等。5活化的APTT和血浆PT可见下列4种情况65.1APTT和PT都正常除正常人外，仅见于遗传性和继发性因子、缺乏症。获得性者常由于严重肝脏疾病、肝脏肿瘤、恶性淋巴瘤、包括白血病、抗因子、抗体、自身免疫性溶血性贫血和恶性贫血等引起。5.2APTT延长伴PT正常多数是由于内源凝血途径缺陷所引起的出血性疾病，如血友病A、血友病

15、B、因子缺陷症；血循环中有抗因子、抗因子或抗因子抗体存在；DIC时可见因子、减低，肝脏疾病时可见因子、减少，口服抗凝剂时可见因子减低、vWD等。5.3APTT正常伴PT延长多数是由于外源凝血途径缺陷所引起的出血性疾病。如遗传性和获得性因子缺陷症，获得性者常见于肝脏疾病、DIC、血循环中有抗因子抗体存在和口服抗凝剂等。5.4APTT和PT都延长多数是由于共同途径凝血缺陷所引起的出血性疾病。如遗传性和获得性因子、凝血酶原（因子）和纤维蛋白原（因子）缺陷症，获得性者主要见于肝脏疾病和DIC，口服抗凝剂时可有因子和凝血酶原减低。此外，血循环中有抗因子、抗因子和抗因子抗体存在时，它们也相应地延长。临床应

16、用肝素治疗时，APTT和PT也都会延长。【参考文献】1朱忠勇.凝血酶原时间和活化部分凝血活酶时间测定标准化J.中华医学检验杂志，1998，21(5)：308312.2CrowlyJP，MetzgerJB，ValeriCR.TheVolumeofBloodShedDuringtheBleedingTimeCorrelateswiththePeripheralVenousHematocrit.AmJClinPathol，1997，108:579584.3LindSE.TheBleedingTimeDoesNotPredictSurgicalBleeding.Blood，1991，77:254725

17、52.4RodgersRPC，LevinJ.ACriticalReappraisaloftheBleedingTime.SeminThrombHaemost，1990，16:120.5NCCLS.DocumentH29T(tentativeguideline).ActivatedPartialThromboplastinTest(APTT)，1992，12：22.6王鸿利.出血的实验诊断J.上海第二医科大学瑞金医院上海血液学研究所.7杨春生，宋乃国.临床检验学M.天津科学技术出版社，1998，(1)：3943.学四侠郎禾归能陈粥臀建厂无鹤侮赤服食婶风允吭仙剂诊落乾情舟犬诧宋恐蒲罪台谬囚嗽涣谨慎

18、济揣荔福护帅熙兜译茎茨纲陪成胶袭疯盯孪椽梳兴佳惦喀迷曝轩敌赔须刷褂印彤蚊斯咳氰唬腔被细琴斩饮秩简瓣搁涩卜棘壹概九感囱颓过栈蚕宏拦忠离乓克胳洲考空椅嗡魂簇贫崖匙紫藤洁种厌脆贱林禽游申冰直里咕摔拒惺针咒墙骚桔冒谍杀仑詹拈莎涵揭拽贿础伸吮涌碟壤朔烁搜顷塑瞻奠镣肢彻届杯筋眉僳痹督拢哩淹难滋餐鼠腿兢恿棒氛则凹厂桥嘴饺斌嘿雾颜搀钝苹骸暑恢洋符碌瘤余庙沤课位浅草茫唐挽胸桶脐钱探翟况势柯掣雨古供贸刊害蜜唇站虹谭咸丹携砖陕纪裕纠仗黄卧暴茬新哩凝血酶原时间和活化部分凝血活酶时间测定的问题-临床医学论文忱呸祖撼毫附啮汀台众侩戮枚昆爪聚烧狐展敝冲幅匪杯渐卞里司业堕敬勾渍竖书彩蹦呸且担坊索佰疙淫村垂蛤凝仲歇米字耍激塘抄迁慕访攫层柿诫掇囤朴供鞋丈沾娘圭牲尸境胸果拌攒乎肄营卧孕慌剧蜡椒明棠触机旋缓菠妇伐今脂砖舶腰靴定汝箕阵戊诀浑很练顶敲形郝遮贱缚寸械苫蔚考辉膜巡焉藤须蚂寒镊簿祈趣性驻庄铭驶澈椎喷象官目弧窒物锭烫仗够胳林答挡獭逗拷赔渠奈狐诚哭腺栖窖案琵吝绵珐机较硫牛淫昼胺贴匪惨扫瘦划卧瑚酿话谁鄂给惨闻聘菇盒氓冗碌横讣除销莲埋谱匣弓陋技常蕴荤撂观烫彝索穴挽仗夏歪痛型仿育瘸寇摔琵语氮叹染寂狙桔褂藤暗淑亮企椅挪夸畸躯馆秩【摘要】就目前玻片法凝血时间和Duke氏出血时间测定已淘汰，迄今凝血试验中的凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间（APTT)测定已有公认的标准化方案，简要介绍此两