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文档简介
1、基因扩增实验乂称 PCR实验,其特点是能将微量的 DNA大幅增加,PCR是分 子生物学研究和实验的常规方法,广泛应用于生物学各个领域,如: 检验艾 滋病、 乙型肝炎、禽疫病,癌基因的检测和诊断, DNA 指纹、个体识别、亲子 鉴别及法医 物证,动、植物检疫,动物及其衍生产品检测,动物饲料、化装品、 食品卫生检测, 转基因作物与转基因微生物检测等。基因扩增实验室乂称 PCR 实验室,实验室原那么上分为四个单独的工作区域 , 前 两区为扩增前区, 后两区为扩增后区。 扩增前区与扩增后区应严格分开。 实验 材料、 试剂、记录纸、笔、清洁材料等,只能从扩增前区流向扩增后区,即从试 剂准备区 - 样品处
2、理区 -扩增区 -扩增产物分析区,不得逆向流动。实验室的气流也应从扩增前区流向扩增后区,不得逆向流动。各匸作区域应设置缓冲间,工 作间与缓冲间之间 宜安装连锁装置。不同功能的核酸检验工作区应是分隔独立的1:作室,并有明显的标志,各区间不能直通。各区之间如果是紧密相连,需安装 物品传递窗。每个匸作区域的顶部应安装紫外灯,紫外灯的波长为254 nm,安装数量为每20 m2安装一支40W 的紫外灯。实验室较为理想的布局模式为有一个专用走廊,试剂准备区、标本制备区、扩增区和产物分析区很标准地排列在一起,前三个区各有一个缓冲间,可供换工作服和工作鞋使用,顶上可装一紫外灯。内实验区域设为正压或常压状态,缓
3、冲间内设为负压状态 可上设一抽风装置 ,使这三个区的空气流向为由实验区域 内向夕卜, 缓冲间内通向内实验室和走廊的门可安装一利 | 连锁装置,当一个门翻开 时,另一门必须处于关闭状态,防止出现两个门同时翻开的情况。产物分析区可 不设缓冲间,但应设为负压状态装一个排风扇即可,使空气流向山外向内,以防止扩增产物的随空气流出。每一区域都须有明确的标记,工作按试剂准备区、标本制备区、扩增区至产物分析区单一流向进行,各区的仪器设备包括工作服、鞋、实验记录本和笔等都必须专用。如果无法作到以上模式,以下根本要求必须做到:1、四个区域必须是相互独立的;2、各区的仪器设备及各种物品必须是专用的;3、 各区完全独
4、立,缓冲间可有可无。如为一个区套一个区的模式,区间不能直通,应有缓冲间,供换工作服及鞋子用,并保证两个区域间始终处于完全的分隔PCR实验室可开展工程状态;4、产物分析区应安装排风扇或其它抽风装置,维持负压。实验室空调通风系统设计及压力控制各个区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、人流与气流,形成单向流程 的 保护屏障,防止实验之间的相互干扰,防止核酸气溶胶对实验过程造成污染产 生假 性结果。 PCR 实验室并没有严格的净化要求,但是为防止各个实验区域间 交义污染 的可能性,宜采用全送全排的气流组织形式。同时,要严格控制送、排 风的比例以 保证各实验区的压力要求。实验室装修实验室的墙体,包括顶棚,应结构牢固、气密性好;所有阴角
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