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文档简介
1、 斐林试剂斐林试剂苏丹苏丹橘黄色橘黄色红色红色砖红色沉淀砖红色沉淀紫色紫色苏丹苏丹 双缩脲试剂双缩脲试剂鉴定物质鉴定物质试剂试剂实验现象实验现象还原性糖还原性糖脂肪脂肪蛋白质蛋白质淀粉淀粉 碘碘 蓝色蓝色 l实验原理实验原理实验材料的选择实验材料的选择材料的选择材料的选择材料的处理材料的处理还原性糖的鉴定还原性糖的鉴定脂肪的鉴定脂肪的鉴定含还原糖高,色浅含还原糖高,色浅如苹果和梨如苹果和梨含脂肪多,色浅含脂肪多,色浅如花生如花生浸泡浸泡34小时小时/蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定含蛋白质多,色浅含蛋白质多,色浅黄豆或鸡蛋清黄豆或鸡蛋清黄豆需浸泡黄豆需浸泡1-2天,天,鸡蛋清要先稀释鸡蛋清要先稀释淀粉
2、的鉴定淀粉的鉴定含淀粉多,色浅,含淀粉多,色浅,如马铃薯如马铃薯/白色或近白色,避免颜色的干扰白色或近白色,避免颜色的干扰选材选材l实验流程实验流程(步骤步骤)1.可溶性还原糖可溶性还原糖 制备组织样液:制备组织样液:制浆:去皮、切块、研磨,制浆:去皮、切块、研磨,过滤:(用单层纱布)过滤:(用单层纱布)取液:取液:(mL)显色反应显色反应 现象:现象: (用前混匀用前混匀)5065.C水浴水浴加热加热2min还原糖的检测和观察:还原糖的检测和观察:还原糖的检测结果还原糖的检测结果2.脂肪的鉴定脂肪的鉴定 取材:花生种子(浸泡取材:花生种子(浸泡h),去皮,将子叶削成薄片),去皮,将子叶削成薄
3、片 制片:制片:选取选取最薄的最薄的薄片移至载玻片中央薄片移至载玻片中央在薄片上滴加在薄片上滴加苏丹苏丹(或苏丹或苏丹) 染液染液2 3滴,滴,染色染色min滴加体积分数为滴加体积分数为50%的酒精的酒精溶液溶液12滴,洗滴,洗去浮色去浮色(多余的苏丹多余的苏丹 )吸去余液,滴吸去余液,滴1-2滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片临时装片显微观察:显微观察: 先低倍镜下找到已着色的薄片,后用高倍镜观察先低倍镜下找到已着色的薄片,后用高倍镜观察现象:现象:有被染成有被染成橘黄色橘黄色(或红色或红色)的脂肪微粒的脂肪微粒脂肪的检测结果脂肪的检测结果脂肪微粒脂肪微粒3.蛋白质
4、的鉴定蛋白质的鉴定 选材与制备选材与制备组织样液:组织样液:黄豆组织样液(或鸡蛋蛋清稀释液)黄豆组织样液(或鸡蛋蛋清稀释液)显色反应显色反应现象:现象:无色无色紫色或紫红色紫色或紫红色(创设碱性条件创设碱性条件)(提供提供Cu2+)蛋白质的检测结果蛋白质的检测结果4.淀粉的鉴定淀粉的鉴定取材:马铃薯匀浆取材:马铃薯匀浆检测:检测:碘液碘液2滴滴现象:现象: 摇匀后变成蓝色摇匀后变成蓝色比较项比较项目目试剂及成试剂及成分分原理原理溶液浓度溶液浓度方法方法加热加热与否与否结结果果可溶还可溶还原糖的原糖的鉴定鉴定斐林试剂斐林试剂NaOHNaOH和和CuSOCuSO4 4砖砖红红色色沉沉淀淀蛋白质蛋白
5、质的鉴定的鉴定双缩脲试双缩脲试剂剂NaOHNaOH和和CuSOCuSO4 4溶溶液液呈呈紫紫色色4、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同?、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同?新配制新配制的的Cu(OH)2溶液溶液在碱性在碱性环境下环境下的的Cu2+NaOH浓度为浓度为0.1g/mLCuS04浓度为浓度为0.05g/mLNaOH浓度为浓度为0.1g/mLCuS04浓度为浓度为0.01g/mL先把先把NaOH溶液和溶液和CuSO4溶液溶液混合混合,而后而后立即使用立即使用。先先加入加入Na0H1mL,然,然后后再加再加CuS044滴,摇匀。滴,摇匀。(不能过量不能过量)水浴水浴加热加热不不需需要要问题探讨问题探讨:1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时,为什么要留出、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时,为什么要留出一部分样液?一部分样液?作对照作对照2、使用双缩脲试剂时为什么、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加液只能加34滴而不能滴而不能过量?过量? 过量的双缩脲试剂过量的双缩脲试剂B B会与试剂会与试剂A A反应,使溶液呈蓝色,反应,使溶液呈蓝色,而掩盖生成的紫色。而掩盖生成的紫色。3、为什么斐林试剂要现配现用,不能放置太久
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