临床微生物SOP粪便标本细菌学检验标准操作规程

1、百度文库-让每个人平等地提升自我11.目的规范粪便标本细菌学检验标准操作规程，确保检验结果准确可靠。2适用范围粪便培养。3.标本标本类型 粪便、直肠拭子。标本采集3.2.1自然排便采集 自然排便后，挑取其脓血、黏液部分23 g,液体粪便 取絮状物23ml，盛于灭菌容器内，或置于保存液（运送培养基）、增菌培养基 中送检。3.2.2直肠拭子 如不易获得粪便时，或排便困难病人及婴儿，可用直肠拭子采取，即以无菌棉拭用保存液或生理盐水湿润后，插入肛门内45cm（幼儿23cm）轻轻转动取出，插入卡-布（Cary- Blair）运送培养基内或无菌容器内送检。3.2.3粪便标本应立即送检，室温保存不能超过2小

2、时，如不能及时送检可以放人磷酸盐甘油（）或转运培养基，但不能超过24小时。培养艰难梭菌的标本保存于-20 C以下。培养沙门菌和志贺菌的标本应放置磷酸盐甘油溶液中保存。 保存弯曲杆菌和弧菌的标本，需加CaCb （100mg/L）试剂。标本拒收标准3.3.1粪便标本放置时间超过2小时。3.3.2送检的粪便标本混有尿液。3.3.3直肠拭子未置于运送培养基中。4.试剂、仪器革兰染液、氧化酶试剂、麦康凯平板。SS平板、TCBS平板及相关生化试剂等。 /VITEK鉴定系统；革兰阴性菌鉴定卡（GNI+）、革兰阴性细菌药敏卡（GNS、 革兰阳性细菌鉴定卡（GPI）、革兰阳性细菌药敏卡（GPS。真菌鉴定卡（YB

3、C） 药敏纸片、ATB板条等，有效期及储存条件参见试剂说明书。接种针、接种坏、电热灼烧器、显微镜、孵育箱、CO培养箱。诊断血清。5.细菌鉴定和药敏质控百度文库-让每个人平等地提升自我2参见质量管理程序6.检验步骤接收标本后，立即对标本进行编号、登记。涂片检查粪便标本因各种正常菌群含量甚多，仅以染色性和形态无法辨别 是否为病原菌。因此，粪便标本一般不作涂片检查。只有怀疑霍乱弧菌及菌群 失调所致腹泻时，才作直接涂片检查（观察动力和菌群比例）。培养621沙门一志贺菌培养参见沙门菌属检验标准操作规程、志贺菌属检 验标准操作规程。6.2.2致病性大肠埃希菌培养参见致病性大肠埃希菌检验标准操作规程。623

4、霍乱弧菌培养参见霍乱弧菌检验标准操作规程。624副溶血弧菌培养参见副溶血弧菌检验标准操作规程。625小肠结肠炎耶尔森菌培养参见耶尔森菌属检验标准操作规程。6.2.6空肠弯曲菌培养参见弯曲菌属检验标准操作规程。627金黄色葡萄球菌培养参见葡萄球菌属检验标准操作规程。6.2.8艰难梭菌培养取水样或黏液样粪便立即接种于环丝氨酸头抱西丁果糖 琼脂（简称CCFA平板上，并将粪便作102106稀释后定量接种。35E厌氧环境 下培养48小时后，选择粗糙型黄色茵落，移种于葡萄糖庖肉培养基作毒素测定； 同时制涂片，悬滴检查动力、革兰染色及生化鉴定。6.2.9真菌培养参见真菌检验标准操作规程。6.2.10气单胞菌

5、和邻单胞菌的培养参见气单胞菌属检验标准操作规程和邻单胞菌检验操作规程。6.2.11分枝杆菌培养参见分枝杆菌属检验标准操作规程。百度文库-让每个人平等地提升自我3根据临床要求分离弧菌分离致病性大肠埃希菌0577.操作流程SSSS XLXLD D或H HE E平3535C培养 181824h24h分离弯曲菌百度文库-让每个人平等地提升自我48结果报告查出肠道致病菌，报告其菌名和药敏结果9注意事项空肠弯曲菌是微需氧菌，初次分离时需5% - 10% C02和85%0痢疾病人要采集大量脓血标本另行培养。粪便标本有很多杂菌，但不能由此认为粪便标本的采集就无需注意杂菌污染, 为防止污染必须注意标本的采集方法

6、。10.临床意义正常情况下肠道中有多种细菌寄生，包括大量的厌氧菌、肠球菌、大肠埃希菌、肠杆菌、变形杆菌、粪产碱杆菌等。引起感染性腹泻的病原微生物有： 细菌性: 产毒素型腹泻，包括霍乱弧菌、肠毒素型大肠埃希菌等；侵袭型腹泻，包括志贺 菌、肠致病型大肠埃希菌和肠侵袭型大肠埃希等；食物中毒，包括沙门菌、金黄 色葡萄球菌、副溶血性弧菌、蜡样芽胞杆菌和肉毒梭菌等；伪膜性肠炎，包括艰 难梭菌或金黄色葡萄球菌；慢性腹泻，可能由结核杆菌引起。真菌性：念珠菌、 毛霉菌等。病毒性：轮状病毒等。11.危急值报告培养出霍乱弧菌、伤寒沙门菌、致病性大肠埃希菌0l57等及时按传染病报告，同时送CDC复核。参考文献1中国合

7、格评定国家认可委员会.CNAS - GL23:2008医学实验室质量和能力观察菌落特征及涂片、染色Campy-BACampy-BA 平板 3535C微需氧气培养 48h48hTCBSTCBS 平板山梨醇麦康凯双糖铁或三糖铁试验观察菌落形态及涂片、染色观察菌落特征及涂片、染色血清血鉴定血清血鉴定仪器或手工细菌鉴定及药敏试验仪器或手工细菌鉴定及药敏试验仪器或手工细菌鉴定及药发出报告发出报告发出报告百度文库-让每个人平等地提升自我5认可准则在临床微生物学检验领域的指南.20082周庭银编著临床微生物学诊断与图解第二版上海：上海科学技术出版 社,20073叶应妩，王毓三，申子瑜主编全国临床检验操作规程第三版南京：东 南大学出版社，20064Murray PR. Man ual of. Cli nical ed. Washi ngto n; ASM Press, 2007IS