RP-HPLC测定天乐口服液中橙皮苷的含量

1、    RP-HPLC测定天乐口服液中橙皮苷的含量        提要采用RP-HPLC测定天乐口服液中橙皮苷的含量，以-Bondapak C18柱(10 m，4.6 mm×250 mm)为固定相，2%甲醇的乙腈溶液-0.1% 磷酸和0.1%三乙胺的水溶液(2080)为流动相进行测定，紫外检测波长284 nm，平均回收率为99.95%，RSD=0.93%(n=6)。关键词天乐口服液橙皮苷RP-HPLC QUANTITATIVE DETERMINATION OF HE

2、SPERIDIN IN TIANLE ORAL LIQUID BY RP-HPLCZhan ShiqinLi KaiminZhou Shaofen(Chongqing Institute for Drug ControlChongqing 410015)ABSTRACTThe content of hesperidin in Tianle oral liquid was determined by RP-HPLC. Hesperidin was separated by -Bondapack C18 colunm(10 m, 4.6 mm×250 mm).The mobile pha

3、se consisted of 2% methanol acetonitrile-0.1% phosphoric acid and 0.1% triethylamine aqueous solution(2080). The detection was at 284 nm. The average recovery was 9.95%, RSD=0.93%(n=6).Key WordsTianle oral liquidHesperidinRP-HPLC天乐口服液是由太子参、白术、陈皮等10味药材制成的复方制剂，具健脾开胃，消食导滞之功效，用于小儿脾胃虚弱、厌食等症。实验采用RP-HPLC测定

4、天乐口服液中橙皮苷含量，操作简便，被测组分分离完全，测定结果准确、可靠。1实验部分1.1仪器与试药日本岛津LC-10AD高效液相色谱仪，SPD-10A紫外可见检测器，C-R3A数据处理机；岛津UV-260型可见紫外分光光度计；TGL-16B高速台式离心机。橙皮苷对照品(自制，含量99.52%)；乙腈(色谱纯，上海生化化工助剂厂)；其余化学试剂均为分析纯。1.2检测波长的选择取橙皮苷对照品，用所选流动相作溶剂，制成适宜浓度，在200400 nm波长范围内测定吸收光谱，橙皮苷在流动相中的最大吸收波长为284 nm。1.3色谱条件经多次试验，选择-Bondapak C18柱(10m,4.6 mm&#

5、215;250 mm，大连物化所)；以2%甲醇的乙腈溶液-0.1%磷酸和0.1%三乙胺的水溶液(2080)为流动相；流速1.2 ml/min；柱温40；检测波长284 nm。在上述条件下由橙皮苷对照品，缺陈皮供试品(空白)、及天乐口服液供试品的色谱(1)可见，被测成分分离完全，供试品中共存组分不干扰橙皮苷的测定。Fig 1HPLC chromatogram of Tianle oral liquidA HesperidinB BlankC Tianle oral liquid1.4标准曲线测定对照品溶液的配制取橙皮苷对照品约10 mg，精密称定，置200 ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇

6、匀，精密量取适量，用甲醇稀释成每1 ml中含6、12、18、24、30 g橙皮苷对照品的溶液，经高速离心后即为对照品溶液。标准曲线的测定取不同浓度的对照品溶液，进样20 l，记录色谱。以峰面积与浓度绘制标准曲线，其回归方程为：y=1897.9+38397.6xr=0.9999(n=6)。结果表明，橙皮苷在630 g/ml浓度范围内与峰面积有良好的线性关系。1.5回收率试验分别取已测定含量的供试品6份，各加入一定量的橙皮苷标准溶液，按上述供试品的测定方法测定，计算加样回收率，结果见表1。1.6精密度考察取橙皮苷对照品溶液20 l，照上述色谱条件，按每次测定的峰面积值计算，测定结果为218090、

7、217454、218173、219925、220323，平均峰面积值为218793，RSD=0.57%(n=5)。Table 1Results of recoveryNo.AmountRecovery(%)(%)RSD(%)sample(g)added(g)found(g)19.7749.5419.345100.3229.7749.5419.22099.0139.77411.44821.17799.6199.950.9349.77411.44821.09398.8759.77413.35623.279101.1269.77413.35623.234100.781.7含量测定1.7.1供试品溶液

8、的制备精密量取供试品溶液1 ml，置50 ml量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，经高速离心即为供试品溶液。1.7.2分离测定取供试品溶液，进样20 l，在上述条件下测定，记录色谱和橙皮苷峰面积，按回归方程或随行标准计算供试品中橙皮苷含量，结果见表2。 Table 2Determination results of samplesBatchNo.Amount of Hesperidin(mg/100 ml)RSD(%)154.6054.4554.1954.0854.330.44250.3551.0751.1551.2550.960.80348.7749.2548.8648.6148.870.56448.7448.2849.2449.2448.870.56554.5454.6754.1554.1554.330.612小结以上试验对检测条件、回收率及供试品的稀释液等进行了探索。用RP-HPLC测定天乐口服液中橙皮苷含量，操作简便，供试品中共存组分不干扰测定，结果准确可靠，可作为该制剂中橙皮苷的质量控制方法。 * 重庆天乐制药有限公司作者单位：重庆市药品检验所重庆 400015参考文献1王宝.中成药质量