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文档简介
1、 不需洗涤的ELISA 替代技术AlphaLISAAlphaLISA 技术整个过程中不需要洗涤,操作非常简单,灵敏度高,可完全取代传统的ELISA 技术。并且,AlphaLISA 动态范围宽(3-4个数量级),亲和范围大(高低亲和力的抗体均可应用),抗干扰能力强,易于实现自动化。该技术尤其适合于进行稀有的Biomarker 和生物治疗物的检测,以及通量很大样品的检测。很多高通量检测公司,如诺和诺德、GSK 、诺华、Amgen 、Sorono 等都采用了AlphaLISA 进行检测,以取代繁琐的ELISA 技术。AlphaLISA 技术是建立在高灵敏度的AlphaScreen 技术上的。Alph
2、aScreen ,即Amplified Luminescent Proximity HomogeneousAssay ,其利用作为供体和受体的微珠来进行检测生物分子的相互作用。微珠表面覆盖了一层水凝胶,作为生物连接的功能基团。当生物分子存在相互作用时,这种相互作用会将供体和受体微珠拉近,从而激发级联放大的化学反应,产生极大增强了的信号。具体来说,在激光(波长为680 nm)的照射下,供体微珠上的光敏剂将周围环境中的氧气转化为更为活跃的单体氧。单体氧扩散至受体微珠,与其上的化学发光剂反应,进一步激活了同样在受体微珠上的荧光基团,使之发出荧光,波长为520620 nm。单体氧的半衰期为4 Sec,
3、在溶液中的扩散距离为200 nm左右。如果生物分子不存在特异的相互作用,单体氧无法扩散到受体微珠,则不会有荧光信号产生。AlphaLISA 技术在AlphaScreen 的基础之上,使受体微珠的能量最终传递到稀土元素铕(Eu )上,发射波长非常尖锐,为615nm ,从而大大减少了检测样品中杂质的干扰,可直接检测血清和体液中的生物分子,完全取代传统的ELISA 技术,同时提高了灵敏度和线性范围,可进行稀有样品的检测。AlphaScreen 技术的特征和优势均相AlphaScreen 是一种“混合后测量”的检测方法,不需要分离和洗涤步骤非放射性AlphaScreen 不需要特殊的试剂和处理方法,它们是进行放射性检测所必需的灵敏(低背景)AlphaScreen
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