褪黑素对鼠心肌缺血再灌注后血流动力学的影响

1、褪黑素对鼠心肌缺血再灌注后血流动力学的影响                       作者：袁媛，龙村，关彬，史世勇，温福兴，张燕婉    【关键词】  褪黑素    摘要：目的 探讨不同浓度褪黑素预处理对成年大鼠心肌缺血-再灌注（I/R）后血流动力学的影响。方法 32只成年S-D大鼠（350400g）随机

2、分为4组，每组8只，利用Langendorff模型灌注其离体心脏，待心脏功能稳定后，对照组平衡30min后缺血再灌注，预处理组则用不同浓度的褪黑素灌注30min后缺血再灌注。各组均为常温（37）缺血25min，复灌60min。观察各组血流动力学改变。结果褪黑素预处理组左心功能恢复明显高于对照组。结论 褪黑素预处理促进成年大鼠心肌缺血-再灌注（I/R）后血流动力学恢复。关键词：褪黑素；预处理；缺血再灌注损伤；心肌保护Effects of Melatonin on Isolated Rat Myocardial Blood Stream Dynamics after Ischemic-Reperf

3、usion Abstract: OBJECTIVE To investigate the protective effects of Melatonin on post-ischemic blood stream dynamics in isolated Sprague-Dawley rat myocardium.METHODS 32 adult Sprague-Dawley rats (350400g) were randomly divided into 4 groups. Hearts were subjected to 25 min of normothermic global isc

4、hemia followed by 60 min of reperfusion.RESULTS Duration of ventricular arrhythmia significantly decreased and LVDP, ±dp/dtmax recovery had a significant improvement in melatonin pretreatment groups. CONCLUSION  Melatonin is an effective agent for protection against post-ischemic reperfusi

5、on injury.Key words：Melatonin; Preconditioning; Ischemic-reperfusion; Cardioprotection                                   

6、0;                                          心肌缺血-再灌注（Ischemia/Reperfusion, I/R）损伤的保护是心血管外科手术中的重

7、要内容之一。I/R期间，产生大量自由基，内生性自由基清除物，如过氧化物歧化酶（SOD），过氧化氢酶及谷胱甘肽超氧化物酶等不敷所需而产生细胞损害。引起I/R损伤的另一个重要因素是心肌梗死区域多形核白细胞（PMNs）的激活和渗透。近年来，许多研究证实，褪黑素（Melatonin, MLT）作为一种自由基清除剂对心肌缺血-再灌注损伤有明显的保护作用。本实验旨在探讨不同浓度褪黑素预处理对成年大鼠心肌缺血-再灌注损伤后血流动力学的影响，并希望从机制上对此加以讨论。1 材料与方法  1.1 实验仪器与试剂       

8、0;                               多导生理记录仪（Macintosh，Quadra610，Japan），超级恒温器（WC/09-05，重庆实验设备厂），恒温循环器（HX-10555，北京四环科学仪器厂），改良Langendorff装置，Stockert-shilly型

9、灌注泵（Germany），混合气（O2:CO2=95%:5%，北京普莱克斯公司），超纯水（SZ-93自动双重纯水蒸馏器，上海亚荣生化仪器厂）。褪黑素(MLT)为美国Sigma公司产品。St. Thomas 停搏液由阜外心血管病医院普惠公司提供。Krebs-Henseleit重碳酸盐缓冲液试剂由阜外心血管病医院麻醉体外循环研究室配制。1.2 动物模型的建立                    &#

10、160;                  实验大鼠由北京维通利华实验动物技术有限公司提供。鼠重350400g。以戊巴比妥钠腹腔麻醉（50mg/kg），经股静脉肝素化（150IU/kg），正中开胸迅速取出心脏，浸入4Krebs-Henseleit缓冲液中，主动脉略加修剪，立即连于Langendorff灌注装置开始灌注，初始灌注用通以混合气（O2:CO2=95%:5%）的Krebs-Henseleit缓冲液，温度37，主动脉灌注

11、压为70mmHg，剪开肺动脉根部以保证冠脉回流液通畅引流，剪开左心耳，插入左房灌注管，立即将心脏移入保温缸（38±1）内。凡心率小于250次/min，左室收缩压峰值小于80mmHg，或冠脉流出液小于8ml/min的心脏弃之不用。1.3  实验分组及步骤                           &#

12、160;           将32只成年S-D大鼠（350400g）随机分为4组(每组n=8), 组（对照组）：离体心脏经Krebs-Henseleit缓冲液灌流平衡30min后，St. Thomas 停搏液常温（37）停跳；组：Krebs-Henseleit缓冲液中加入10M/L MLT，其余步骤同组；组：Krebs-Henseleit缓冲液中加入30M/L MLT，其余步骤同组；组：Krebs-Henseleit缓冲液中加入100M/L MLT，其余步骤同组。4组均经历常温（37）停跳25

13、min，再灌注60 min。1.4  测定指标                                       平衡20min后，记录冠脉流出量（CF）、HR、LVDP、±dp/dtmax

14、等血流动力学指标作为基础值。分别将再灌注后5、10、15、30、60min的上述指标表达为其对基础值的恢复率。整个过程连续监测心电图(ECG)， 观察室性心律失常的发生率和持续时间。1.5  数据表达和统计学分析                               

15、60;       应用SPSS 11.5 软件包进行统计学分析。计量资料以均数±标准差（ ±s）表示，缺血再灌注室颤发生率的比较用X2检验，P0.05为差异具有显著性。2 结果2.1  缺血前4组的CF、HR、LVDP、±dp/dt-max等血流动力学指标无显著性差异(表1)。表1  缺血前各组血流动力学指标 （略） 注：各组间两两比较，P值均0.052.2  褪黑素对心肌缺血再灌注心律失常的影响(表2) 各褪黑素预处理组均能显著降低心肌缺血再灌注诱发的室性心律失常的发生率,缩短持续时间,有明显的负性变频作用,其中组（100M/L MLT组）的作用最强。表2 褪黑素对心肌缺血再灌注心律失常的影响（略） 注：与对照组相比, #P<0.01 ，*P<0.052.3 缺血-再灌注（I/R）后血流动力学变化（表3） 再灌注后, 褪黑素预处理组LVDP,±dp/dtmax在多个时点上的恢复率均较对照组显著性增高，尤其是组，组和组之间差异不显著。表3 再灌注后血流动力学恢复情况（%）注：HT6SS同一时间点与对照组比较，#P<0.01， * P<0.053  讨论褪黑素（N-