代写论文 黄芩苷对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

1、代写论文 黄芩苷对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用    【摘要】  目的探讨黄芩苷对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法线栓法制备大鼠大脑中动脉局灶性脑栓塞模型，缺血2 h，再灌注24 h。评价神经功能状态，测定脑梗塞体积和丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）含量、超氧化物歧化酶（SOD）和髓过氧化物酶（MPO）活性以及血脑屏障通透性。称重法测定组织脑水肿含量。结果黄芩苷能显著降低缺血再灌注后脑梗塞体积，改善神经功能状态，降低脑组织MDA、NO含量、血脑屏障通透性和脑水肿程度，升高SOD活性并降低MPO 活性，与模型组比较，具有显著性差

2、异（P<0.05或P<0.01）。 结论 黄芩苷对大鼠脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用，其机理与其清除氧自由基、抗炎和减轻脑水肿有关。【关键词】  黄芩苷 脑缺血 再灌注损伤 脑水肿Abstract:ObjectiveTo investigate the protective effect of baicalin on cerebral injury induced by transient focal ischemia and its mechanisms. MethodsTransient focal cerebral ischemia injury model i

3、n rats was induced by occlusion of the right middle cerebral artery for 2 h, followed by 24 h reperfusion. The infarction volume and neurological deficit determined by the methods of TTC staining and the Longa's score were used to evaluate the effect of baicalin on cerebral injury. The levels of

4、 malondialdehyde (MDA), nitric oxide (NO), activities of superoxide dismutase (SOD) and myeloperoxidase (MPO) and blood-brain barrier (BBB) permeability in brain were measured by spectrophotometer. The content of brain water was assayed by weighing method.ResultsPretreatment with baicalin markedly r

5、educed brain infarction volume and neurological deficit induced by transient ischemic insult, inhibited MPO activity, decreased NO, MDA and brain water content, and BBB permeability, increased SOD activity.ConclusionBaicalin might play a protective effect on cerebral ischemia reperfusion injury thro

6、ugh inhibiting inflammatory process, peroxidation and decreasing brain water contents.Key words:Baicalin;  Cerebral ischemia;   Reperfusion injury;   Brain water content    黄芩Scutellaria baicalensis Georgi.是一种主要生长在我国北部的传统中药材，具有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎等作用，其主要有效成分为黄酮类，包括

7、黄芩苷（baicalin）、黄芩素、汉黄芩苷和汉黄芩素，其中以黄芩苷的含量最高。近年研究表明，黄芩苷具有抗炎1、抗氧化活性2，有理由推测它对缺血性损伤疾病具有保护作用。本室前期的研究已证实黄芩苷对心肌缺血再灌注损伤具有较好的保护作用3。本文探讨了局灶性脑缺血再灌注时黄芩苷对脑梗塞体积和脑水肿的影响，观察其对缺血性脑损伤是否也具有保护作用。同时，为了探讨黄芩苷的神经保护机制，我们探讨黄芩苷对血脑屏障通透性以及炎性细胞浸润等影响进行了研究。1  材料与方法1.1  动物  健康雄性Wistar大鼠，由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供，体重250280 g。1.2

8、  药品与试剂  黄芩苷(Baicalin,BA)，纯度>98%，购自中国药品生物制剂检定所，临用前以生理盐水配成所需浓度。超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）、髓过氧化物酶（MPO）试剂盒购自南京生物工程研究所，其余试剂均为国产分析纯。1.3  方法2  结果2.1  BA对脑缺血再灌注后脑梗塞体积和神经缺陷评分影响  与模型组相比，BA大、小剂量组均可明显缩小脑缺血再灌注大鼠脑梗塞体积（P<0.05）；BA大剂量组还可明显改善神经缺血评分（P<0.05），结果见表1。2.2  BA对脑缺血再灌注大

9、鼠脑含水量和血脑屏障通透性影响  如表 2所示，脑缺血再灌注24 h后缺血侧大脑含水量和EB含量明显高于假手术组（P<0.01）。BA大剂量组可显著降低脑缺血再灌注所引起的脑含水量和EB含量的增加（P<0.05）。2.3  BA对脑缺血再灌注大鼠脑组织MPO，NO以及线粒体组分SOD，MDA的影响  如表 3所示，BA(60,120 mg/kg)对大鼠缺血2 h再灌注24 h后脑组织线粒体组分中SOD活性的降低有明显的抑制作用，并且能显著抑制脑组织MPO活性、NO含量以及线粒体组分中MDA含量的增加（P<0.05或P<0.01）。表1

10、60; 黄芩苷对脑缺血再灌注大鼠脑梗塞体积和神经缺陷评分的影响（略）与模型组比较，1）P0.05表2  黄芩苷对脑缺血再灌注大鼠脑含水量和血脑屏障通透性影响（略）与假手术组比较，1）P0.01；与模型组比较，2)P0.05；n=6表3  黄芩苷对脑缺血再灌注大鼠组织MPO，NO以及线粒体组分SOD，MDA的影响（略）与模型组比较，1）P0.01；与模型组比较，2)P0.05；3)P0.01;n=62.4  BA对脑缺血再灌注大鼠脑区中心粒细胞浸润的影响光镜下，假手术组细胞大小数目正常，间质无水肿。模型组神经元数目明显减少，残留神经元萎缩，核固缩深染，核溶解，间质水

11、肿明显，梗塞灶周围有大量中性粒细胞浸润。BA大小剂量组与模型组相比，存活神经元数量较多，间质内轻度水肿，中性粒细胞浸润数明显减少，结果见表 4。表4  黄芩苷对缺血再灌注大鼠脑区中心粒细胞浸润的影响（略）与假手术组比较，1）P0.05,2)P0.01；n=63  讨论    大量研究证实，脑缺血再灌注引起脑组织损害的病理生理机制复杂，其发病过程涉及到多个环节，包括能量代谢衰竭、氧自由基产生、炎性因子和细胞释放等，最终导致神经细胞死亡。因此有效的神经保护剂应是能够多环节阻断再灌注损伤的发病机制，植物黄酮为这种效应的发挥提供可能性5。 &

12、#160;  大量研究证实，黄芩苷具有较强的抗氧化作用，能诱导机体增加SOD合成，清除多种自由基2，3。本实验结果表明，脑缺血2 h再灌注24 h后，模型组缺血侧脑组织SOD活性明显下降，MDA水平明显升高，进一步印证自由基参与脑缺血再灌注脑损伤过程。同时，本研究结果还发现，脑缺血前后应用黄芩苷可明显增加大鼠缺血侧脑组织SOD活性，降低MDA含量，说明黄芩苷在大鼠脑缺血再灌注脑损伤中具有清除自由基、抗脂质过氧化作用。脑缺血再灌注损伤所引起的脑水肿，主要由细胞毒性水肿和血管源性水肿组成，前者为脑细胞本身的肿胀，与Na 和Ca2交换的失衡及缺血后炎症反应中释放大量自由基和细胞毒性酶类有关

13、；后者是由于血脑屏障(bloodbrain barrier，BBB)破坏所致的组织间隙水肿，与炎症反应产物如NO，自由基等存在密切关系6。BBB通透性增加，一方面加重脑水肿，另一方面也有助于炎性细胞和炎症因子通过BBB，促进炎症反应和细胞凋亡。    本研究显示，脑缺血再灌注后，缺血侧脑组织EB含量明显增加，提示脑缺血再灌导致机体血脑屏障通透性明显增加，进而引起组织水肿和炎性细胞浸润。黄芩苷给药组在降低脑梗塞体积的同时也降低血脑屏障通透性和脑水肿，保护脑缺血再灌注性损伤。总之，黄芩苷对脑缺血再灌注脑水肿和神经损伤具有保护效应，这种保护作用可能与其抗炎、抗氧化等有关

14、，在临床应用方面具有一定的前景，值得进一步开发研究。【参考文献】  1 Shen YC, Chiou WF, Chou YC, et al. Mechanisms in mediating the anti-inflammatory effects of baicalin and baicalein in human leukocytesJ.Eur J Pharmacol, 2003, 465(12)：171.2 Gao Z, Huang K, Yang X, et al. Free radical scavenging and antioxidant activities of f

15、lavonoids extracted from the radix of Scutellaria baicalensis GeorgiJ.Biochim Biophys Acta, 1999, 1472(3)：643.3 欧阳昌汉, 吴基良, 李立中.黄芩甙对大鼠心肌缺血再灌注所致脂质过氧化损伤的保护作用J.咸宁医学院学报, 2001, 15(1)：32.4 Longa EZ, Weinstein PR, Carlson S, et al. Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in ratsJ.Stroke, 1989, 20(1)：84.5 Simonyi A, Wang Q, Miller RL, et al. Polyphenols in cerebral ischemia: novel targets for ne