维生素B1片剂的含量测定

1、维生素B1片剂的含量测定一、实验目的与要求1. 掌握差示分光光度法消除可能存在干扰的原理；2. 熟悉差示分光光度法的基本测定方法；3. 了解维生素B1的结构与性质；4. 熟悉维生素B1的检测原理及操作方法。二、实验原理1. 结构与性质维生素B1由嘧啶环和噻唑环通过亚甲基结合而成的一种B族维生素，为白色结晶或结晶性粉末；溶于水，微溶于乙醇、氯仿，有微弱的特臭，味苦，有引湿性，露置在空气中，易吸收水分。在碱性溶液中容易分解变质。它的生理功能是能增进食欲，维持神经正常活动等，缺少它会得脚气病、神经性皮炎等。成人每天需摄入2 mg。它广泛存在于米糠、蛋黄、牛奶、番茄等食物中，已能由人工合成。2. 测定

2、原理差示分光光度法（简称A法），即在测定时，取两份相等的供试溶液，经不同的处理（如：调节不同的pH值或加入不同的反应试剂）后，一份置样品池中，另一份置参比池中，于适当的波长处，测其吸光度的差值（A值），根据标准曲线或值计算出组分的含量。该法既保留了通常的分光光度法简易快速、直接读数的优点，又无需事先对样品进行分离提纯，并能消除干扰。本实验根据维生素B1的紫外吸收峰随溶液pH值的变化而变化，pH=2（0.1 mol/LHCl）时，最大吸收波长在246 nm处，吸收系数为421；pH=7（磷酸盐缓冲溶液）时，有两个吸收峰，在232233 nm处，吸收系数为345；在266 nm处吸收系数为255。

3、在两种不同的pH介质中，维生素B1的紫外吸收不受其它共存物的影响，即光谱行为不发生变化，从而消除了共存物的干扰。因此采用差示分光光度法测定其含量，可消除背景和辅料的干扰。三、实验材料、试剂与仪器原料名称规 格用 量维生素B1AR100 mg盐酸溶液pH = 适量磷酸盐缓冲液pH = 适量维生素B1片普通市售20片移液管，容量瓶100 mL（15个），50 mL（1个），紫外光谱仪，研钵。四、实验方法与步骤1. 标准贮备液的配制精密称取维生素B1约100 mg，置100 mL量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液（1 mg/ mL）。2. 测定波长的选择精密量取维生素B1贮备液2.0 m

4、L二份，分别置于两个100 mL容量瓶中，一份用磷酸盐缓冲液（）稀释至刻度，摇匀，得溶液；另一份用盐酸液（pH=）稀释至刻度（浓度为），摇匀，得溶液 。分别以相应溶剂为空白，在220 nm 280 nm范围内测定各自的紫外吸收光谱。再将溶液放于参比池，溶液放于样品池，在同样光谱范围内测定差示吸收光谱（见图1）。在差示光谱图上寻找有最大差示吸收值（A）的波长，即为测定波长（247 nm）。3. 标准曲线的绘制精密量取维生素B1贮备液、3.0 mL各二份，分别置100 mL量瓶中。一份用磷酸盐缓冲液（）稀释至刻度；另一份用盐酸液（pH=）稀释至刻度，摇匀，得五组浓度相同、pH不同的溶液。在上述五组

5、不同浓度下，以缓冲液配制的溶液为参比，在测定波长（247 nm）处分别测定对应的盐酸液的差示吸收值（A）。以浓度C为横坐标，以差示吸收值A为纵坐标，绘制标准曲线。4. 维生素B1片的测定取维生素B1 20片，精密称定，研细。精密称取适量粉末（约相当于维生素B1 50 mg），置50 mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，过滤，弃去初滤液。精密量取续滤液2.0 mL二份，分别置100 mL量瓶中，分别用磷酸盐缓冲液和盐酸液稀释至刻度，摇匀。将前者置参比池中，后者置样品池中。在247 nm波长处测定差示吸收值。由标准曲线求得维生素B1浓度，计算维生素B1片含量（标示量的百分数）。五、注意事项1. 缓冲液（pH= ）：取磷酸二氢钾 g，加氢氧化钠（ mol/L） mL，用水稀释至100 mL，即得。2. 盐酸液（pH =）：取盐酸9 mL，加水稀释成100 mL。取10mL，加水稀释成1000mL，即得。3. 所给测定波长仅供参考，可照“测定波长的选择”项下自行测定。4. 本实验线性范围为1030 g/ mL，其回归方程：A，r 。【思考题】1