实验二离子及药物对离体蛙心脏活动的影响

1、大学学生实验报告开课学院及实验室： 生科院生化楼 6032015年3月17日学院 生命科学学院年级、专生技姓名学号业、班131实验课程名称动物生理学实验成绩实验项目名称实验二离子及药物对离体蛙心脏活动的指导影响老师实验目的 1学习离体蛙心灌流的实验方法。2观察 Na、 K 、 Ca 三种离子及肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。实验原理 1心脏的正常节律性活动需要一个适宜的内环境，内环境的变化直接影响着心脏的正常活动。本实验在蛙心的灌流液内人为地加入一些物质而改变心脏活动的内环境， 观察心脏活动有何变化。2心肌细胞的生理特征：电生理特征：自律性，兴奋性，传导性机械生理特征：收缩性实验对象

2、 青蛙实验器材和药品 1 器材生物信号采集系统、张力换能器(10g)、蛙类手术器械1 套、蛙心插管、蛙心夹、试管夹、双凹夹、万能支架、滴管、150ml 小烧杯 4 个、任氏液。2药品 0. 65氯化钠、 2氯化钙、 1氯化钾、 1：10 000 肾上腺素、 1：10 000 乙酰胆碱等。实验步骤 1 离体蛙心的制备2观察项目(1) 记录心脏在仅有任氏液时的收缩曲线，观察心率及收缩幅度，作为正常对照。(2) 吸去管内的任氏液，换以等量0.65 NacCl ，观察并记录心跳的变化。(3) 等量任氏液换洗，待心跳恢复正常后，加入5%NaCI1 2 滴，记录观察心跳的变化。(4) 等量任氏液换洗，待心

3、跳恢复正常后，加入2 CaCl 2 1 2 滴，记录观察心跳的变化。(5) 等量任氏液换洗，待心跳恢复正常后，加入l KCl 1 2 滴，记录观察心跳的变化。(6) 等量任氏液换洗，待心跳恢复正常后，加入1：l0 000 肾上腺素1 2 滴，记录并观察心跳的变化。(7) 吸去管内的任氏液，换以等量4 摄氏度任氏液，观察并记录心跳的变化。(8) 等量任氏液换洗， 待心跳恢复正常后， 加入 2.5%NaHCO 31 2 滴，记录观察心跳的变化。(9)等量任氏液换洗，待心跳恢复正常后，加3%乳酸 12 滴，记录观察心跳的变化。(10)等量任氏液换洗，待心跳恢复正常后，加入l ： 10 000 乙酰胆

4、碱 1 2 滴，发生变化后，加入阿托品，记录并观察心跳的变化。实验结果分析 结果：在蛙心的灌流液内人为地加入一些物质而改变心脏活动的内环境，观察心脏活动，发现心脏跳动的频率、幅度就会发生相应的改变。当用 0.65%NaCl 置换时，蛙心的心率不变，振幅下降了 78.6%，基线不变；用 5%NaCl 滴加时，心率上升了 3.6%，振幅下降了 28.6%，基线不变；用 2%CaCl2 滴加时，心率下降了 3.2% ，振幅上升了 11.1%，基线上升了；滴加 1%KCI 时，心率上升了 10.3%，振幅下降了 22.2%，基线不变；用肾上腺素滴加时，心率下降 2.8% ，振幅上升 22.7%，基线不

5、变； 置换 4 摄氏度任氏液时， 心率下降 6.7%，振幅也下降了 4.5% ，基线不变；用 2.5%NaHCO3 滴加时，心率上升 10%，而振幅下降 56.5%，基线上升；用3%乳酸滴加时，心率不变，而振幅上升了3.4%，基线不变；用Ach 滴加时，心率不变，振幅下降了80%，基线不变；用Adr 滴加时，心率不变，振幅上升了75%，基线不变。（结果见表1）表 1. 离子及药物对离体蛙心活动的影响“-”表示下降， “ +”表示上升实验项0.65%NaCl5%NaCl 2%CaCl21%KCl肾 上低2.5%NaHCO33%Ach阿目腺素温乳托酸品心率变不变+3.6-3.2+10.3-2.8-

6、6.7+10不不不化（ %）变变变振幅变-78.6-28.6+11.1-22.2+22.7-4.5-56.5+3.4-80+75化（ %）基线变不变不变上升不变不变不上升不不不化变变变变分析：1、正常心搏曲线有一定规律。2、置换0.65%NaCl 溶液置换 0.65%NaCl 溶液后心肌的收缩力减弱， 这是由于用0.65%NaCl 溶液置换灌注液时灌注液中缺乏2+K+等离子，以致心肌细胞动作电位2 期内流22+CaCa+减少，胞质 Ca 浓度减少，心肌的收缩活动也随之减弱。3、滴加 5%NaCl 溶液当滴加入 5%NaCl 时，心率加强而振幅减弱。其原因是因为当钠离子浓度升高时，心脏的兴奋性和

7、自律性升高，但兴奋的传导性和收缩性却下降。4、滴加 2%CaCl2溶液 2 滴Ca2+浓度增高时， Na+ 内流受抑制，细胞 0 期除极速度与幅度减小，使兴奋性及传导性均降低，所以心率略减弱。而 Ca2+浓度增高使 Ca2+内流增多，心肌收缩能力增强。5、滴加 1%KCl溶液理论上，当钾离子浓度升高时，心肌收缩减弱，同时心率也略减慢。这是因为钾离子与钙离子相互竞争与肌钙蛋白结合，使得钙内流减少。但实验未能得出以上结论，推测其因可能是因为做完钙离子对心脏活动影响后， 用任氏液冲洗心脏不彻底， 导致有钙离子残留， 也可能是其他因素，影响实验结果。6、滴加 0.01%Adr 溶液滴加肾上腺素后，蛙心

8、收缩增强，心脏舒张完全，描记的心搏曲线幅度明显增大。其作用机理是：肾上腺素可与心肌细胞膜上的B 受体结合，提高心肌细胞和肌浆网膜Ca2+通透性，导致肌浆中Ca2+浓度增高，使心肌收缩增强。另外，理论上，肾上腺素还有降低肌钙蛋白与 Ca2+ 亲和力，促使肌钙蛋白对Ca2+的释放速率增加，提高肌浆网膜摄取Ca2+的速度，刺激 Na+与 Ca2+交换，使复极期向细胞外排出Ca2+的作用加速。 这样将使心肌舒张速度增快，整个舒张过程明显增强。但是，所测得的心率变化减弱，可能是其他因素所造成的。7、置换 4 摄氏度任氏液当置换成低温的任氏液时，细胞活性下降，导致其兴奋性和收缩强度均减弱。8、 滴加 2.

9、5%NaHCO3溶液加入碱性溶液，可使细胞内氢离子外逸，与胞外钾离子进行H+ K+交换，钾离子外流减少，细胞膜电位减少。另外，碱也使细胞液中钙离子浓度降低，比如形成碳酸氢钙沉淀，内流的钙离子减少，从而导致心肌收缩力减弱。9、滴加 3%乳酸加入酸性溶液，加速胞外氢离子进入胞内，使得去极化程度加强，从而导致心肌收缩加强。10、滴加 0.01%Ach 溶液滴加乙酰胆碱后，蛙心收缩减弱。其机理为：乙酰胆碱与心肌细胞膜M受体结合； 一方面提高心肌细胞膜K+通道的通透性，促使K+外流，复极过程中K+ 外流增加，动作电位2、3期缩短， Ca2+进入细胞内减少，使心肌收缩减弱；另一方面乙酰胆碱可直接抑制Ca2

10、+通道，减少 Ca2+内流，进而使心肌收缩减弱。11、加 2 滴 0.01%阿托品和0.01%Ach 与只加乙酰胆碱相比加了阿托品后再加乙酰胆碱的牛蛙心脏跳动无明显变化。因为阿托品能与心肌细胞膜的M胆碱受体结合，妨碍乙酰胆碱与其结合，从而起抗胆碱作用。但由于心脏本身的缘故使每次收缩的时间增加了。附：图 1 开始时，心率变化图 20.65%NaCl 对心率的影响图 35%NaCl 对心率的影响图 42%CaCl 2 对心率的影响图 5 1%KCl 对心率的影响图 6肾上腺素对心率的影响图 8低温对心率的影响图 93%乳酸对心率的影响图 102.5%碳酸氢钠对心率的影响图 11Ach 、阿托品对心

11、率的影响其中专业理论知识内容包括：保安理论知识、消防业务知识、职业道德、法律常识、保安礼仪、救护知识。作技能训练内容包括：岗位操作指引、勤务技能、消防技能、军事技能。二培训的及要求培训目的安全生产目标责任书为了进一步落实安全生产责任制，做到“责、权、利”相结合，根据我公司2015 年度安全生产目标的内容，现与财务部 签订如下安全生产目标：一、目标值：1 、全年人身死亡事故为零，重伤事故为零，轻伤人数为零。2 、现金安全保管，不发生盗窃事故。3 、每月足额提取安全生产费用，保障安全生产投入资金的到位。4 、安全培训合格率为 100%。二、本单位安全工作上必须做到以下内容：1 、对本单位的安全生产

12、负直接领导责任，必须模范遵守公司的各项安全管理制度，不发布与公司安全管理制度相抵触的指令，严格履行本人的安全职责，确保安全责任制在本单位全面落实，并全力支持安全工作。2 、保证公司各项安全管理制度和管理办法在本单位内全面实施，并自觉接受公司安全部门的监督和管理。3 、在确保安全的前提下组织生产，始终把安全工作放在首位，当“安全与交货期、质量”发生矛盾时，坚持安全第一的原则。4 、参加生产碰头会时，首先汇报本单位的安全生产情况和安全问题落实情况；在安排本单位生产任务时，必须安排安全工作内容，并写入记录。5 、在公司及政府的安全检查中杜绝各类违章现象。6 、组织本部门积极参加安全检查，做到有检查、有整改，记录全。7 、以身作则，不违章指挥、不违章操作。对发现的各类违章现象负有查禁的责任，同时要予以查处。8 、虚心接受员工提出的问题，杜绝不接受或盲目指挥；9、发生事故，应立即报告主管领导，按照“四不放过”的原则召开事故分析会，提出