探索黑豆对SD大鼠肾阴虚症状的改善作用

1、探索黑豆对SD大鼠肾阴虚症状的改善作用秦珊 高铭 张何威 李大雷 黄寅（上海中医药大学 201203）摘要：目的：通过本次实验证明黑豆对肾阴虚症状的治疗和改善作用，提示食疗养生的重要性，并拟在纠正现在补品市场上唯推举壮肾阳药之偏激。方法：本实验将SD大鼠分为黑豆灌胃组、生理盐水灌胃组和正常对照组。用小剂量氢化可的松造模后，再进行治疗，并测得大鼠睾酮、体重、肾等相关脏器重量等指标。关键词：肾阴虚 黑豆补肾历史在中国由来已久，近年来随着各个补肾类医药保健产品不遗余力的广告宣传，现在大有全国流行补肾之势。在此过程中，也产生了一些“补肾”的误区“补肾壮阳”的保健食品铺天盖地，而滋补肾阴的食品关注度明显

2、不足。另据调查，上海老年人口中80%以上有肾阴虚症状，且50%以上的白领也有不同程度的肾阴虚症状，而导致这一现象的原因很多，主要为肝肾阴阳失调所致。内经云：“肾者在色为黑，在味为咸,其荣为发，其谷为豆，”；延年秘录：“服食黑豆，令人长肌肤，延颜色，添精髓，加气力，虚补能食。”本草纲目：“黑豆入肾功多，故能治水，消涨，下气，制风热而活血解毒。”现代研究已显示黑豆具有补肾强身的作用，可有效改善肾虚症状。黑豆是一种物美价廉、取材方便的补肾佳品。根据“药补不如食补”的原则，为纠正目前补品市场唯壮肾阳的偏激，揭示黑豆滋补肾阴的良好作用，我小组对黑豆治疗和改善肾阴虚症状的作用进行研究，兹将实验方法与结果报

3、道讨论于下。1材料与方法1.1 动物健康雄性SD大鼠33只，体重（300/20g），月龄8周，由上海中医药大学动物房提供，实验动物合格证：，温度 24 2，湿度 40。1.2 药物与试剂注射用氢化可的松琥珀酸钠由天津市生物化学制药厂出品，批号：20070706；睾酮放射免疫分析药盒由北京北方生物技术研究所提供，国药准字S10940093，批号：080620。1.3 主要仪器和工具GC-911r放射免疫计数器，科大创新股份有限公司；双鹿TH288-1型多用途台式恒温振药器，江苏省鹿何生化仪器厂； DL-50RC离心机,上海中科生物医学高科技开发有限公司；SHZ-型循环水真空泵，上海亚荣生化仪器厂

4、；电子称重计。1.4 动物分组与造模 动物分组将大鼠随机分为3组：黑豆治疗组(11只)、模型组（11只）和正常组(11只)。所有动物在统一条件下(室温1924 ，相对湿度40)普通饲料喂养，自由饮水。每周称一次体重并记录数据，观察精神状态等。造模黑豆治疗组和模型组每天定时（下午5点）给予注射用氢化可的松琥珀酸钠按体重18mg/kg计算注射剂量（氢化可的松琥珀酸钠浓度为25mg/ml）进行腹腔注射，持续五天。1.5 动物饲养造模成功后，黑豆治疗组每天定时给予黑豆匀浆(按黑豆粉蒸馏水为1：4配制)2ml灌胃一次，同时给予正常饮食，持续5天。模型组每天定时（下午5点）给予生理盐水2ml灌胃一次，同时

5、给予正常饮食，持续5天。正常组按SD大鼠常规饲养。1.6 标本采集与处理在实验第11天，将3组大鼠眼窝静脉丛取血1 mL每只均加人肝素抗凝剂制成血浆，取0.1 mL血浆加入200 mL无水乙醇，振摇1 min，静置5 min，3000 rpm离心10 min。将上清液倒人指形管，残渣再加人75 乙醇1 mL摇匀，3000 rpm离心10 min。合并上清液，于60C烘箱烘干，待残渣干后放人4C保存。测量时用10 mL醋酸缓冲液溶解，取01 mL用放免法测其血清睾酮含量。后将大鼠腹腔注射3 戊巴比妥钠生理盐水溶液40 mgkg麻醉后进行解剖，分离出肾上腺、肾和睾丸并及时进行称重记录数据，以便分析

6、比较。1.7 统计学方法采用SPSS 130统计软件处理。所有数据均以(均数标准差)表示。组间均数比较采用单因素方差分析检验，P005或P001为差别有统计学意义。2 结果2.1体重：Dependent Variable: bw (I) group(J) groupMean Difference (I-J)Std. ErrorLSD1.002.0030.87500(*)14.02522.0391.7080 3.0050.25000(*)14.02522.00221.0830 2.001.00-30.87500(*)14.02522.039-60.0420 3.0019.3750014.0252

7、2.182-9.7920 3.001.00-50.25000(*)14.02522.002-79.4170 2.00-19.3750014.02522.182-48.5420* The mean difference is significant at the .05 level.正常组与黑豆治疗组、模型组都有显著差异，正常对照组与黑豆治疗组体重增加呈“J”型曲线，黑豆组曲线明显平缓。黑豆治疗组与模型组体重也有明显差异，模型组体重呈“n”型曲线，说明肾阴虚造模在第三次（即最后一次）称重时已经成功，黑豆对肾阴虚体重减轻的症状有改善作用。2.2肾上腺、肾脏、睾丸重量：(I) GROUP(J) GR

8、OUPMean Difference (I-J)Std. ErrorLSD1.002.0030.8750(*)14.0252.0391.7080 3.0050.2500(*)14.0252.00221.0830 2.001.00-30.8750(*)14.0252.039-60.0420 3.0019.375014.0252.182-9.7920 3.001.00-50.2500(*)14.0252.002-79.4170 2.00-19.375014.0252.182-48.5420正常组与黑豆治疗组、造模组都有显著差异，正常组脏器质量重于其他二组。黑豆治疗组与造模组没有显著差别，反映出肾阴

9、虚造模成功，但黑豆对患肾阴虚的SD大鼠的脏器治疗作用尚未能确定。2.3血浆睾酮T正常组模型组黑豆组11.924.429.987.776.073.412.296.283.6313.894.075.632.852.322.294.374.546.658.922.213.043.462.031.63均数6.933753.99254.5325偏差4.3879351.6845162.754709由于操作有误，血浆睾酮正常对照组，黑豆治疗组，模型组sig值都大于0.05，因此没有统计学意义。3讨论：黑豆又名乌豆、黑豆，味甘性平，入脾经、肾经。是大豆的一种。传统中医学认为，黑豆是一种既便宜又有助于抗衰老，具

10、有医食同疗的特殊功能的食品。本草纲目说：“豆有五色，各治五脏，惟黑豆属水性寒，可以入肾。治水、消胀、下气、治风热而活血解毒，常食用黑豆，可百病不生。”“黑豆入肾功多，故能治水、消肿下气。治风热而活血解毒。”药理研究结果显示，黑豆具有养阴补气作用，是强壮滋补食品。但黑豆也不可多食。孙思邈说：“黑豆少食醒脾，多食损脾；”千金翼方中说：“久食黑豆令人身重。”本草汇言说：“黑豆性利而质坚滑，多食令人腹胀而痢下。”为了取黑豆之利而除其弊，历代医家善用黑豆制成药膳、药豆与药酒，用于防治疾病与保健。唐代陈藏器的本草拾遗记载，黑豆能”明目镇心，温补。久服，好颜色，变白不老。”明代李时珍所著的本草纲目也有”李守

11、愚每晨水吞黑豆二七枚，到老不衰”的记载。 这与黑豆滋养肾之元阴关系密切。现代研究发现黑豆含较丰富的蛋白质、脂肪、碳水化合物以及胡萝卜素、维生素B1、B2、烟酸及粗纤维，钙，磷，铁等营养物质，并含少量的大豆黄酮甙染料木苷。这两种物质均有雌激素样作用。黑豆叶中含叶酸、亚叶酸、核黄素、维生素A及类胡萝卜素等。黑豆衣含果胶、乙酰丙酸和多种糖类。黑豆具有一般食物没有的独特物质，正是这些独特物质，提升了黑豆在豆类中的营养保健地位。科学研究显示：黑豆具有高蛋白、低热量的特性，其蛋白质含量高达3640，相当于肉类含量的2倍、鸡蛋的3倍、牛奶的12倍；富含18种氨基酸，特别是人体必须的8种酸含量，比美国FDA规

12、定的高蛋白质标准还高。黑豆还含有19种油脂，不饱和酸含量达80，吸收率高达95以上，除能满足人体对脂肪的需要外，还有降低血液中胆固醇的作用。因为黑豆基本不含胆固醇，只含植物固醇，而植物固醇不被人体吸收利用，却有抑制人体吸收胆固醇、降低胆固醇在血液中含量的作用。因此，常食黑豆，能软化血管，滋润皮肤，延缓衰老，特别是对高血压、心脏病，以及肝、肾和动脉等方面的疾病有好处。 本次实验中，从黑豆治疗组与模型组的SD大鼠的在平均体重，睾酮T水平的差异上看黑豆对肾阴虚证的是有改善作用的，遗憾的是由于实验操作不规范出现了较大误差，使得实验数据意义打折。4 实验体会和心得经过几个月的准备和最后阶段的实际操作，我

13、们组的探索性实验接近尾声，回顾这些天的实验过程，充满了新奇与挑战。整个实验过程是愉快的，我们也通过每一名组员的努力，做出了一些实验结果。诚然，由于实验经验的缺乏和众多不定因素的干扰，让我们的实验遇到了种种困难，结果并不如愿。我们经过总结，对实验的具体过程和技巧，以及对待实验的态度有了进一步的认识和思考。由于我们的实验准备时间较长，所以对于实验器材的准备和实验理论的探究做的较为完备和理想。在实验过程中，我们小组对大鼠的分组及体重等实验数据的采集比较及时和准确。但是由于期末考试及小学期医院实习等因素的影响，我组开始实验的日期一再后延，从五月上旬推迟到了六月上旬，直接导致了最终实验设想未能全部完成。当然，其中由于奥运安全及环保工作的缘故，学校的核医学实验室提前关闭。为了能够得到必要的实验数据，我们的实验只得提前五天结束，以取得到核医学实验室测量数据的机会。但是回想实验的开展过程，我们确实应从自身寻找原因。小组有五名成员，互相之间可以交叉配合，尽量提早实验的日期，为最后的数据整理和论文撰写争取时间。即使课业再紧张，也总应该抽出时间按时开展实验，保证实验进行，这点我们要向所有完成实验的小组学习。尽早实验，不仅给予实验过程充足的时间，也能预防和应变可能的突发事件。另外，在实