去除牛血清白蛋白中脂肪酸的生产工艺分析报告

1、 . . . 一种去除牛血清白蛋白中脂肪酸的生产工艺技术领域 本发明涉与一种去除牛血清白蛋白提取过程中残留脂肪酸的生产工艺。技术背景 牛血清白蛋白广泛用于诊断试剂行业，生物工程、细胞培养等科学研究领域。制备牛血清白蛋白的方法很多，但在制备过程中均需添加辛酸钠作为牛血清白蛋白的保护剂，产品存在制备纯度不高，脂肪酸残留量过高的弊端。一些生物医学研究要求使用不含游离脂肪酸的牛血清白蛋白，否则牛血清白蛋白所含高浓度的脂肪酸将影响细胞培养、分化、代反应、生化测定等。例如，在3T3-L1脂肪细胞分化过程中不能使用普通牛血清白蛋白试剂，否则影响分化和细胞代状态；在测定培养的组织细胞释放的游离脂肪酸浓度时，也

2、必须用不含脂肪酸的牛血清白蛋白，否则难以准确测定甘油三酯水解和游离脂肪酸释放。因此，对传统工艺提取的牛血清白蛋白进行脱脂肪酸处理可提高牛血清白蛋白的纯度，扩大牛血清白蛋白产品的应用围。发明目的 本发明的目的在于提供一种去除牛血清白蛋白中脂肪酸的方法，用以解决传统工艺提取的牛血清白蛋白中脂肪酸含量过高，不能适用于细胞培养、生物工程学实验的难题。提高产品品质。发明容 本发明提供了一种去除牛血清白蛋白中残留脂肪酸的处理工艺。它用料少，成本低，工艺简单，生产出的产品适用于细胞培养和生物工程试验。本发明的技术方案如下：本发明的工艺路线：1、 溶解。取适量的牛血清白蛋白提取物，溶解于10倍的蒸馏水中，溶解

3、温度在2327。 用浓度为0.2N的HCl，调节PH至33.5。2、 解析。充分溶解后的溶液牛血清白蛋白移至冰水混合物中进行冰水浴，同时持续搅拌，维持30min。3、 吸附。加入5%的活性炭，混匀，混悬液将混悬液移至冰水混合物中进行冰水浴，同时持续搅拌，维持1小时。过滤，滤渣回收后再利用。4、 浓缩。 滤液用0.2N的NaOH调节PH值至7.0，然后用20000分子量以下的超滤器进行超滤浓缩。5、 冻干。将浓缩液按冻干曲线冻干，即将超滤后的浓缩液迅速冷冻至-40，持续1小时左右，升到-25，持续1020小时，再缓慢升温至，维持小时，升温至保存温度，分装为成品。上述步骤中的为.5步骤2中的活性炭

4、用量为56%步骤3中的冰水混合物的温度为04本发明的优点在于：1、 用料少、成本低、工艺简单。本方法利用少量的活性炭在04温度下搅拌吸附1小时即可完成。2、 可操作性强、易于工业化生产。3、 所成产的产品纯度高，脂肪酸含量极微，可以满足细胞培养、生物工程实验要求的标准。4、 本方法的税收率高，回收率可以达到90%。5、 成本低、经济效益显著。质量标准对比检验项目处理后的牛血清白蛋白处理前的牛血清白蛋白外观白色或类白色冻干粉末白色或类白色冻干粉末溶解性1%溶液溶解时间2min1%溶液溶解时间2min纯度98%98%蛋白质含量98%98%水分.5%5%脂肪酸含量0.002%0.3%具体实施方式 实

5、施例1本发明的工艺步骤：1、 牛血清白蛋白处理： 取1kg牛血清白蛋白粗品，溶解于10L的蒸馏水中，充分搅拌至溶液澄清。2、 解析和吸附 用0.2N的HCl，调节溶液PH至3.2，将溶液置于冰水混合物中，搅拌水浴30min。 称取活性炭500g，边搅拌边慢慢加入。加入后持续搅拌1小时。3、 过滤 将混悬液用定性滤纸过滤，收集滤液，活性炭回收处理后可重复利用。4、 浓缩 滤液用0.2N的NaOH调节PH值至7.0，然后将滤液用分子量为20000的超滤柱进行超滤浓缩。5、 冻干 将浓缩液按冻干曲线冻干，即将超滤后的浓缩液迅速冷冻至-40，持续1小时左右，升到-25，持续12小时，再缓慢升温至，维持

6、4小时，升温至保存温度，保持30分钟。6、 包装 回收产品称重后，用塑料瓶按照包装规格分装后为成品不含脂肪酸的牛血清白蛋白。本品包装为100g容量的塑料瓶。活性炭（200目）为活性炭厂出产的针用活性炭盐酸（分析纯）为市渤海化学试剂厂出产。氢氧化钠（分析纯）为市天力化学试剂出产。实施例2 1、 牛血清白蛋白处理： 取1kg牛血清白蛋白粗品，溶解于10L的蒸馏水中，充分搅拌至溶液澄清。2、 解析和吸附 用0.2N的HCl，调节溶液PH至3.0，将溶液置于冷藏室温度为4的冷藏库中，搅拌30min。 称取活性炭500g，边搅拌边慢慢加入。加入后持续搅拌1小时。3、 过滤 将混悬液用定性滤纸过滤，收集滤液，活性炭回收处理后可重复利用。4、 浓缩 滤液用0.2N的NaOH调节PH值至7.0，然后将滤液用分子量为20000的超滤柱进行超滤浓缩。5、 冻干 将浓缩液按冻干曲线冻干，即将超滤后的浓缩液迅速冷冻至-40，持续1小时左右，升到-25，持续18小时，再缓慢升温至，维持4小时，升温至保存温度，保持30分钟。6、 包装 回收产品称重后，用塑料瓶按照包装规格分装后为成品。本品包装为100g容量的塑料瓶。活性炭为活性炭厂出产的针用活性炭（200目）。盐酸（分析纯）为市渤海化学试剂厂出产。氢氧化钠（分析纯）为市天力化学试剂出产。申请人： 奇特生物高