MS培养基母液的配制与保存

1、MS培养基母液的配制与保存一、目的要求1、通过MS培养基母液的配制，掌握配制与保存培养基母液的基本技能。 2、掌握培养基各种母液的保存方法。二、仪器与用具 1、仪器：各类天平、磁力搅拌器、冰箱等。 2、用具：烧杯、容量瓶、量筒、试剂瓶、标签等。3、试剂：95%酒精，0.1-1 NaOH，0.1-1NHCl，配制MS培养基所需的各种无机物、有机物，蒸馏水。 三、方法步骤 （一）母液的配制 母液是欲配制培养基的浓缩液，一般配成比所需浓度高10100倍的溶液。 优点：（1）保证各物质成分的准确性。（2）便于配置时快速移取。（3）便于低温保藏。 1、MS大量元素母液（10X） 称10升量溶解在1升蒸馏

2、水中。配1升培养基取母液100ml。化学药品1升量10升量NH4NO31650 mg/L165gKNO31900 mg/L190gCaCl2·2H2O440 mg/L44gMgSO4·7H2O370 mg/L37gKH2PO4170 mg/L17g2、MS微量元素母液（100X） 称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。化学药品1升量10升量MnSO4·4H2O（ MnSO4·H2O）223 mg/L（214 mg/L）223mgZnSO4·7H2O86 mg/L86mgCoCl2·6H2O0025mg/L02

3、5mgCuSO4·5H2O0025 mg/L025mgNa2MoO4·2H2O025 mg/L25mgKI083 mg/L83 mgH3BO362 mg/L62 mg注意：CoCl2·6H2O和CuSO4·5H2O可按10倍量（025 mgX10=25 mg）或100倍量（25 mg）称取后，定容于100ml水中，每次取10ml或1ml，（即含025 mg的量），加入到母液中。 3、MS铁盐母液（100X）称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。化学药品1升量10升量Na2·EDTA373 mg/L373 mgFeSO4

4、·7H2O278 mg/L278 mg注意配制时，应将两种成分分别溶解在少量蒸馏水中，其中EDTA盐较难完全溶解，可适当加热。混合时，先取一种置容量瓶（烧杯）中，然后将另一种成分逐加逐剧烈震荡，至产生深黄色溶液，最后定容，保存在棕色试剂瓶中。4、MS有机物母液（100X） 称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。化学药品1升量10升量烟酸05 mg/L5mg盐酸吡哆素（VB6）05 mg/L5mg盐酸硫胺素（VB1）肌醇100 mg/L1 g甘氨酸2 mg/L20mg5、生长调节剂单独配制，浓度为1-5 mg/ml（书中为05 -1mg/ml），一般配成4 mg/ml 。 配制培养基母液时注意事项： 一些离子易发生沉淀，可先用少量蒸馏水溶解，在按配方顺序依次混合；配制母液时必须用蒸馏水或重蒸馏水；药品应用化学纯或分析纯；溶解生长素时，可用少量05 1N的NaOH 或95%酒精溶解，溶解分裂素类用05 1N的HCl加热溶解。（二）母液的保存 1、装瓶：将配