恩诺沙星肺靶向微球的制备

1、中国兽医学报年月第卷第期吼流，沌恩诺沙星肺靶向微球的制备李锐，周友中，肖希龙。（中国农业大学动物医学院，北京）摘要：以天然可生物降解的明胶为载体材料，液体石蜡为油相，为乳化剂，采用正交试验优化空白明胶微球的乳化法制备工艺，并在此基础上制备了恩诺沙星明胶微球。结果显示，含药微球平均粒径为脚，粒径舯的微球占总数的，符合肺靶向的要求。恩诺沙星明胶微球载药量为、包封率为，动态透析法研究体外释放特性，符合规律，释药比原药延长了约倍，表明有明显的缓释功能。在、相对湿度值（）考察月，几乎无变化。兔体内分布试验表明具有明显的肺靶向性，肺中药代动力学行为符合三室开放模型。关键词：恩诺沙星；明胶微球；乳化法；肺靶

2、向给药系统中图分类号：文献标识码：文章编号：（），”（妇驴据矗眦可如如胎，醌：庇砒“踟沁粥妙，彬，讫础）：枷锄侬蠡卟，（）叩池，出和，一瑚出枷础出寥她耐商（）撕锄脚脚嶝越畸加街、他讪机础锄【血砒西柚乳“矗廿（）讲汛庇山叩棚硎【：；唱。唔鹏印，础昭。拢，口，眦玎：沉似也恩诺沙星（，）是兽医专用的第代氟喹诺酮类抗菌药，有广谱杀菌作用，对革兰氏阴性菌、阳性菌、支原体、衣原体等均有杀灭作用，对静止期和生长期的细菌均有效，其杀菌活性依赖于浓度¨。耐药性的产生可导致药物治疗效果的降低，高治疗动物的呼吸道疾病的效果，降低毒副作用。材料与方法试验动物只健康新西兰大白兔，体质量奴，购自中国农业大学实验

3、动物中心。且喹诺酮类药物体内分布广泛，治疗动物的肺炎、支气管炎等呼吸道感染时怛，要使药物在肺部组织达到有效的浓度，势必增加药物的剂量，这样易造成药物在其他组织中残留的增高并产生一些毒副作用。本试验拟研究恩诺沙星靶向微球，利用微球静注后被肺毛细血管机械性滤取而表现肺靶向性，以提主要试剂恩诺沙星原料药纯度（），由本实验室提供；恩诺沙星标准品（批号：）、环丙沙星标准品（批号：），购自中国兽药监察所。酸性明胶（等电点为）、液体石蜡，购自北京化学试剂公司；，购自北京中邦德科贸有限公司。空白明胶微球的制备参照文献并根据单收稿日期：作者简介：李锐（一），男，博士。因素考察结果，选定对制备明胶微球（通讯作者，

4、】：砌，）影响较大的个因素：明胶浓度、搅拌中国兽医学报年月第卷第期观流，蹦速度、乳化剂用量及液体石蜡用量，每个因素选定个水平，按（）正交设计表（表）安排试验设计，筛选出最佳制备工艺条件。表正交设计表委员会编制的药代动力学程序软件在微机上进行曲线拟合，求得药物在脏器组织与血液中药时曲线下面积（）。采用以下靶向参数阐明肺靶向性。（）（）。（）靶器官（）非靶器官（）（）为相对摄取率，大于表明微球使靶器官肺接受的药量高于溶液；为第个组织或血液的；，为靶向效率，表示微球或微球与溶液相比，对靶器官有无选择性，大于表明微球对靶器恩诺沙星明胶微球的制备球（恩诺沙星明胶微官较非靶器官具有更高的选择性，值愈大这种

5、选择性愈高；。为峰浓度（）之比，说明微球对药物分布改变的效果，值愈大，改变药物分布愈明显。同时对药物在肺中动力学行为用房室模型描，）是在空白制备工艺基础上，在明胶水溶液中加入一定量混匀作为分散相，按照制备过程，即得到。微球的外观观察和特性测定使用光学显微镜观察，并用测微尺对其粒径分布进行统计分析。采用量筒法测定微球的堆密度，固定漏斗法测定休止角，聚丙酰胺电泳法显示带电性，固体粉末法测定临界相对湿度（）。微球的载药量与包封率测定述。为微球制剂，为恩诺沙星普通制剂。结果微球的制备工艺通过对影响明胶微球成球性的各种影响因素的考察，选定对制备明胶微球影响较大的因素：明胶浓度，搅拌速度，乳化剂用量及液体

6、石蜡用量个因素，每个因素选定个水平，按（）正交设计表安排试验设计。正交试验的结果见表。由极差确定主次影响因素顺序为明胶浓度、搅拌速度、乳化剂用量、液体石蜡用量，因此确定明胶微球优化处方为：明胶溶液，搅拌速度将用溶液溶解，超声，于恒温振荡，过滤次后稀释，按紫外分光光度法，测定吸光度。载药量微球中药物总量明胶微球质量×，包封率微球中药物总量投药量×。洒的体外释药试验采用动态透析法【，精密称取和装入透析袋内，置于加有溶出介质磷酸盐缓冲液的锥形瓶中，恒温振荡（），定时取样检测，同时补充等量的溶出介质，测定后计算累计释药百分率，得出体外释药曲线。，乳化剂为，水相、油相容积比：。以此确

7、定乳化冷凝法工艺为：取液体石蜡为连续相，加置于具塞锥形瓶混匀中，于混匀；取明胶，用正双蒸水水浴中完全溶胀，调值至后加入。密封于西林瓶中，分别在、与（唧）放置个月，最后进行外观形态、粒径及其分布、载药量等特性的考察。兔体内分布试验与药代动力学以的稳定性考察取批作为分散相；搅拌下将水相滴人油相，制成型乳剂，再冰浴、加戊二醛交联固化、异丙醇脱水，然后用异丙醇、石油醚洗涤，真空干燥，即得到橙黄色微球。微球的外观观察和特性测定结果光学显微剂量（以计）分别给兔耳缘静脉注射普通注射液和注射液，按一定间隔时间取血并处死兔子，分别取脏器、组织等，在下测定药物浓度，药代动力学数据按照中国药理学数学专业镜下的见图，

8、粒径分布图见图。通过测微尺测定平均粒径（）为肚，粒径扯的微球占总数的，形态圆整、分散性好、较少粘联。微球的其他参数见表。中国兽医学报年月第卷第期醌流，妊咖如儿牾咖眦晌儿弱帅伽俗侗血弱撕儿猫眦讥硝蚰乩乾撕俪扎豁汕侧讥止钾锄饷鼬血侧；。吐盯盯辨叽虬跖蚣汕触卜狮三肺眨姗姗呈勉如笛石般卜搦潲弧姐醚 狐卜呈泌为呱叭卫孤舭坝。：簧，注：（一）×；：粒径的标准偏差；（不粘连程度）（）×，是微球粘连数；一，愈高，微球的质量越好；为粒径平均数，肚影响微球肺靶向性的主要因素是微球的球径大小与微球表面的性质。微球的表面性质主要指微球表面所带的电荷及表面亲和力，休止角。，可被水润湿的微球最易被吞噬

9、细胞吞噬，且微球表面带较多的正电荷粒子较易到肺。本试验制备的微球符合肺靶向的要求，膨胀率试验中微球的平均粒径变大，膨胀率为，表明微球在溶液中的粒径膨胀变化不大，适合静脉注射。微球的载药量与包封率根据的标准曲线回归方程计算，得到的载药量为（图光学显微镜下的（×）±）、包封率为（±）（）。体外释药试验的释放药量为，释放药量为。从体外释药曲线（图）计算得出的约为，豢的】为，说明有明显的缓释求虹作用，其在最初内有突破效应，之后转为缓怡释过程。为推论释药方程，按鼬方程以累计释焱药量百分数对时间，以作图，经回归处理可得释药方程，相关系数。由此可见，与】，两变量问的相关性微球的

10、粒径好，故可推论恩诺沙星在磷酸盐缓冲液中释图粒径分布图药属释药，即与成正比。稳定性考察在冰箱（）、室温表和的特性参数（）（）与（）放置个月，其外观形态、粒径及其分布、载药量、体外释药百分率与考察前均无显著变化，微球稳定性较好。鼢吸肺靶向性参数见表。从结果可见肺的值最大为，微球注射液在肺中分布最多，将制成微球后，肺相对血和其他脏器中国兽医学报年月第卷第期蕊汛，砌蹦组织的，均大于，且与普通注射液相比，肺相对于血和其他脏器组织的，增强了倍，靶器官肺的，微球制剂是普通溶液的倍。将肺中药。时曲线（表）用程序分别与一、二、三室模型拟合，经检验，拟合优度结合与进行模型判断，在肺内动力学行为可用三室开放模型描

11、述，可用二室开放模型描述，其动力学方程为：一一：一硒。延长到。，延长了。倍；肺内药量（）消除率从下降到，降低了。孚姜衄疆涎器臁畦肺根据此方程可知，制成微球后，在肺内吸收半衰期从延长到，消除半衰期从图、体外释药曲线表兔静脉注射（）和（）肺靶向参数，注：示未检出讨论体内的网状内皮系统（，包括肝、脾、肺和骨沙星微球平均粒径为弘，粒径舯的微球占总数的，带正电荷、休止角为。，符合肺靶向的要求，载药量为有较好的实用性，体外释药试验有明显的缓释作用，室温条件下性质稳定。由于靶向给药系统是药物在靶组织释放后产生药效，此时血液循环中药物浓度大小已不能反映药物在靶组织作用强弱。因而我们依据有关学者提出的脏器动力学

12、观点【研究了在肺中动力学规律，肺靶向性特性可以用以下个参数、。、衡量，本试验主要从这个参数的结果判定的肺靶向性。肺的值最大为，注射液在肺中分布最多，将制成微球后，肺相对血和其他脏器组织的，均大于，且与普通注射液相比，肺相对于血和其他脏器组织髓等组织）具有丰富的吞噬细胞，可将一定大小的微粒作为异物而摄取，较大的微粒由于不能滤过毛细血管床，而被机械截留于某些部位。肚的微粒可被动靶向肝脏和脾脏为主的，肛的微粒可被动靶向肺部，而小于的微粒可靶向骨髓。微球给药系统的靶向性可通过控制颗粒的大小、表面的性质如表面电荷、选择不同表面化学性能的载体材料等来实现。微球的表面性质主要指微球表面所带的电荷及表面亲和力

13、，休止角。，即可被水润湿的微球最易被吞噬细胞吞噬，且微球表面带较多的正电荷粒子较易到肺，疏水性的粒子易于在肺部沉积。本试验制备的恩诺中国兽医学报年月第卷第期吼流，惋蹦（）的。提高了倍，靶器官肺的，微球制剂是普通溶液的倍，达到了肺靶向的目的。另参考文献：外试验还对药物在肺部药物浓度数据，进行模型判朱模忠兽药手册北京：化学工业出版社，：断，在肺内动力学行为可用三室开放模型描述，可用二室开放模型描述，制成微王建元，刘玉年氟喹诺酮类抗菌药在动物上的应用球后，在肺内吸收半衰期和消除半衰期均延长，肺内中国兽医学报，（）：药量（）消除率降低，结果说明制成陆彬药物新剂型与新剂型北京：人民卫生出版社，：后，在肺中蓄积时间显著延长，清除减慢，肺靶向效刘建晖恩诺沙星可溶性粉中有效成分含量的检测果好。山东畜牧兽医，：近年来，兽医药剂学已经由普通的注射剂、片，乎剂、散剂、预混剂等向缓释、控释、靶向制剂发展。肺删，：靶向微球是药剂学研究的一个热点，在兽医药剂学曾凡彬，陆彬，杨红盐酸川芎嗪肺靶向微球的研亦有广阔的应用前景，