细胞生物2013含泪吐血整理

1、单革考题：1，生命化学起源与生命进化有哪些重要阶段（写出不少于五个，按时间先后顺序），以一个重要阶段为例，说明此阶段对地球环境及生命起源进化本身的影响（5分）答：生命化学起源和生命进化重要阶段：a 非生物合成小的有机分子（单体）（C+H=有机分子）。b 单体聚合形成聚合物（蛋白质、核酸）。c 合成能自我复制的分子（遗传性状）-蛋白质和核酸D. 有机分子组装成原生生物-非生物分子维持内部化学环境的平衡并展现某些生命特征。 遗传起源（origins of heredity）：出现最早的遗传物质，可能为RNA；原始细胞出现（proto-cells）：有活性的物质开始有膜包裹；最早的细胞出现；出现光合

2、作用；出现有氧呼吸形式；出现捕食行为；真核生物出现；多细胞生物出现；(2)光合作用：循环光合作用途径起源于35-32亿年前，阳光作为能源被生物利用。非循环光合作用途径出现在25亿年前，不仅可以利用光能，而且可以放出O2。自此之后，空气中的O2开始聚集。为有氧呼吸的出现提供了条件。有氧呼吸可以为生物活动提供更多能量，对生物进化意义重大。2，你在研究中发现一个新的哺乳动物细胞中的RNA分子，设计实验证明它是mRNA还是非编码RNA，如果证实其为非编码RNA，设计实验研究其功能（10分）答： (1)验证是mRNA还是ncRNA：真核生物中的mRNA有明显的特征序列，即5帽（m7G）和3Poly（A）

3、尾巴。而哺乳动物mRNA的3端有20-30个腺苷酸组成的Poly（A）尾，可以作为鉴别mRNA的标志。 具体方法：首先合成15-20的聚dT和聚dA>先进行聚dT的单引物PCR，经过5-10个循环>加入聚dA继续进行PCR，经过25个循环>结束后，进行电泳。如果得到了相应的扩增条带，说明此核苷酸序列是mRNA；反之，则为非编码RNA。测序。 无细胞表达系统 (2)研究非编码RNA的功能：（假设用于研究的模式生物为小鼠） 首先，根据得到的ncRNA的序列，利用生物信息学的方法，把它在基因组上定位>定位之后，对培养的细胞进行基因敲除实验，使表达此ncRNA的DNA失去此功能

4、>进行细胞培养，观察此基因的确实会对细胞的生长造成怎样的影响，从而确定这一ncRNA的功能。 后续研究可以在胚胎细胞中进行基因敲除，观察对动物生长发育过程有何影响。假如该RNA为ncRNA。 研究功能的实验设计如下：（1） 敲除该RNA 的gene，观察细胞与正常细胞的差别。 （2） 过量表达该RNA，观察细胞与正常细胞的差别。（3）RNAi。（4）检测与RNA相互作用的DNA、RNA或蛋白质进行下游分析。（5）生物信息学方法分析功能与通路。3、基因转录调控和染色质状态调控之间是如何协调进行的，分别以转录抑制和转录激活为前提进行详细叙述（10分）答：要想起始基因转录，需要染色质解螺旋化，

5、即从紧密状态变为松散状态。这样，RNA聚合酶才能够结合，进而起始转录过程，这时染色质可以说处于活化状态。反之，若染色质高度螺旋化，便不能进行转录过程，这时染色质则处于失活状态，如巴氏小体即是处于此状态。 会有DNA结合蛋白与DNA结合，调控其表达。 ARE基因：色氨酸阻遏子蛋白的结合改变其构象。 组蛋白在基因表达调控中起到重要作用。H2A在基因激活和抑制中都起到重要作用。 (1)转录抑制过程：转录抑制过程包括多个方面，例如抑制转录激活因子和DNA的结合、抑制RNA聚合酶活性、组蛋白修饰以及染色质结构改变等等。其中，当染色质结构改变，即从低螺旋化状态转变为高度螺旋化时，便不能进行mRNA的合成，

6、转录即被抑制。调节染色质结构改变的因素有：组蛋白的去乙酰化（去乙酰化后利于高螺旋状态的形成）、染色体结合蛋白的作用、CpG中胞嘧啶的甲基化作用等。 (2)转录激活过程：基因激活蛋白结合到染色质上，形成染色质重构复合体>染色质发生重构，组蛋白修饰酶加入>组蛋白发生共价修饰，附加的激活蛋白结合到基因的调控区上，之后加入mediator(介导物)、一般的转录因子以及RNA聚合酶>在启动子处发生前起始复合体的聚合，之后加入其他的基因激活蛋白，再之后向前起始复合体中加入重排蛋白>起始转录，在复合物形成的过程中往往会使DNA形成loop结构。 转录激活过程中组蛋白的变化：富含Lys

7、组蛋白水平降低；H2A、H2B二聚体不稳定性增加；组蛋白发生修饰；H3组蛋白巯基暴露。DNA的甲基化和组蛋白的修饰会是基因组的不同区域显示出不同的转录潜能，常染色体质通常高组蛋白乙酰化，低DNA甲基化和H3-K4甲基化，异染色质有低组蛋白乙酰化，高DNA甲基化和H3-K9甲基化。被折叠的染色质形成loop结构，具有较高的转录活性，形成RNA酶复合体。染色质对基因转录抑制包括改变染色质-DNA的联系和内部染色质的联系, 这些变化是通过组蛋白的修饰完成的.组蛋白的乙酰化和去乙酰化是基因活化和抑制过程中的主要调控机制, 组蛋白去乙酰化会导致形成阻遏性染色体复合物以至全染色体灭活. 组蛋白修饰酶主要有

8、组蛋白乙酰基转移酶, 组蛋白去乙酰基转移酶, 组蛋白转甲基酶和组蛋白激酶.它们通过核心组蛋白乙酰化调节核小体结构及其相关基因的转录活性. 核小体核心组蛋白( H3/ H4) 碱基N端的多个赖氨酸残基是可逆乙酰化参与调节基因转录的靶位点。在哺乳动物体细胞中, 组织特异性基因中的CpG二核苷酸在无转录活性时常含有甲基化的胞嘧啶碱基; 而有转录活性时则多含有未甲基化的胞嘧啶碱基.甲基化通过过甲基-CpG 结合蛋白或特异性转录激活因子的阻遏作用而实现转录抑制。4、从microRNA和RNAi通路的发现中你得到哪些启示（至少列举三点或详述一点）（5分）答：microRNA and RNA interfe

9、rence (RNAi) （1）合适模式动物的选择非常重要RNAi是在研究秀丽隐杆线虫（C. elegans）反义RNA（antisense RNA）的过程中发现的。秀丽隐杆线虫有五对体染色体和一对性染色体，多数雌雄同体，只有极少数为雄性。成虫约长毫米，生命周期大约为三天半，他们以大肠杆菌为食，易于大量培养，每只成虫在生命周期里可产生约只后代，适合作遗传学研究。此外，培养秀丽隐杆线虫成本低，在实验室中容易掌控，并且可以在不用时冷冻，解冻之后仍能存活，因此适合长时间储存。此外，秀丽隐杆线虫身体透明，在研究细胞分化及其他发育过程方面特别有贡献。每个体细胞如何发育都有详细的纪录，其细胞发育的命运在个

10、体之间差异不大。秀丽隐杆线虫也是第一个基因体完全被定序的多细胞生物。 （2）不轻易放过任何一个实验中遇到的不正常的结果，可能新的发现就是在这些结果中诞生注射正义RNA（sense RNA）和反义RNA均能有效并特异性地抑制秀丽隐杆线虫par-1基因的表达，该结果不能使用反义RNA技术的理论做出合理解释，正义RNA抑制同源基因表达的现象是由于体外转录制备的RNA中污染了微量dsRNA而引发，并将这一现象命名为RNAi （3）敢于接受新的事物，新的思想 （4）当一个新的现象被发现后，其作用机制要经过一段较长时间、很多人的研究才能逐步明朗。说明生物学科的发展不是单个人、单个实验室的研究就可以完成的。

11、5、简述雌性哺乳动物体细胞X染色体随机失活的过程。（5分）X 染色体失活包括一系列相关的过程: 启动、传播和维持。X 失活于囊胚期末开始建立。X染色体失活始于X染色体上的特异性失活位点XIC基因座的启动，朝两个方向扩展。在XIC内存在基因XIST（X染色体失活特异转录物）。当使一条X染色体失活时，有一专一表达的独特形式，而一条有活性的X染色体没被表达。XIST的表达产物是一顺式作用的核RNA，而不编码生成蛋白质。XistRNA顺式包裹表达它的染色体并引发快速基因沉默，导致表达Xist的X染色体上的大多数基因的活性被抑制，成为失活的X染色体。而表达它的翻译转录产物Tsix的染色体保留了活性。失活

12、过程：Xist是一条16000nt的长ncRNA，形成Xist ncRNA recuited complex后，通过X染色体上的进入位点结合到染色体上。之后，复合体可以募集一种特定的组蛋白H2A1.2，使染色体保持在失活状态。此外，Xist还可以募集组蛋白去乙酰化酶和甲基化酶的复合体。Xist的活性由另外一个4000nt的长ncRNATsix调控，包含一个Xist的反义链，可以通过与Xist互补配对来调节其活性。6、简述研究基因表达调控和表观遗传调控的数种方法（举出八种方法名称；或者写出三种方法，并对每种给出简述）。（5分）？凝胶缓滞实验核染色体免疫沉淀DNA亲和层析DNA footprint

13、ingDNA亲和层析： 第一步：把细胞内所有蛋白加入层析柱中，里面有含有很多不同DNA序列的基质。之后用低盐溶液洗去未结合DNA的蛋白，再用中盐溶液把结合了DNA的蛋白洗提出来。 第二步：把第一步中的DNA结合蛋白加入只含有GGGCCC/CCCGGG序列的层析柱中，之后用中盐溶液把所有对此序列不特异的蛋白都洗去，再用高盐溶液洗提特异性识别GGGCCC/CCCGGG的蛋白。 基因表达调控：a.基因敲除：用同源序列替换目的基因达到目的基因失活的作用观察该基因作用与表达产物。b.基因芯片：高通量筛选和检测基因的表达状况。c.报告基因：研究基因的表达过程以及其启动子增强子的作用途径。D.凝胶迁移电泳E

14、.DNA footprinting表观遗传学：a.甲基化特异性寡聚核苷酸生物芯片实验b.实时RT-PCR实验对DNA甲基转移酶mRNA的相对定量分析c.基因沉默研究表型非编码RNA：a.全基因组tiling 芯片技术（基因芯片）b.原位杂交：研究ncRNA不同时段所处位置所起作用等。c.RNAi研究相应ncRNA的功能7、简述RNA world hypothesis的主要内容, 简要讨论目前已知的RNA在生命活动中的哪些功能支持了RNA world hypothesis.（5分）在DNA作为遗传物质以前，在原始的生命中，RNA既是可自我复制和进化的遗传物质，同时也是可催化代谢活动的酶。之后，R

15、NA作为遗传物质的功能被更稳定的DNA所取代，催化功能被蛋白质取代。遗传信息通常存储为DNA ，但一些生物如病毒使用RNA来存储信息。rRNA作为mRNA的支架，使mRNA分子在其上展开，实现蛋白质的合成。核酶的化学本质是核糖核酸(RNA), 却具有酶的催化功能。核酶的作用底物可以是不同的分子, 有些作用底物就是同一RNA分子中的某些部位。核酶的功能很多,有的能够切割RNA, 有的能够切割DNA, 有些还具有RNA 连接酶、磷酸酶等活性。白丽考题：1，现发现外源分子e能激活细胞A释放分子f并导致细胞B的活化，已知细胞A与细胞B在特定条件下可以发生直接相互作用，并且细胞B表达f分子的受体。请问在

16、外源分子e的作用下致使B细胞活化的可能性有哪几种，如何通过实验验证答： (1)可能性： a、外源分子e与细胞A上的受体结合使之激活并释放分子f，而分子f与细胞B表面的受体结合导致细胞B活化。 b、外源分子e与细胞A上的受体结合使之激活，之后细胞A与细胞B发生直接相互作用，使得细胞B活化。 c、外援分子e直接与细胞B上的受体结合，使细胞B活化。 (2)实验验证： 将细胞溶液离心，取上清液处理新鲜的B细胞；细胞沉淀物使用去垢剂处理，同样去刺激新鲜的B细胞。若前者能使B细胞活化，则表明该细胞的活化是由于胞外小分子的作用；若是后者能使细胞活化，则为细胞接触依赖的信号转导。2、简述SH2、SH3、PH结

17、构域的功能和生物学意义。含SH2结构域的蛋白可以特异性识别多肽序列中的磷酸酪氨酸残基，SH3可以识别富含脯氨酸的序列；这两种结构域能作为接头蛋白上的结构域行使信息传递的功能，但其本身没有催化活性。PH结构域可以识别磷脂酰肌醇。这些结构域通过介导蛋白与蛋白或蛋白与脂质间的相互联结作用调节信号转导蛋白在细胞内的定位，依靠高度保守的小的相互作用结构域。从而特异地决定信号转导的途径。这些结构域所介导的信号传递过程在细胞增殖、分化甚至凋亡中起着重要作用。1， 提高了效率，减少了信号分子扩散消耗的时间2， 另外还有就是阻止了不同信号通路之间可能存在的Cross Talk ， 保证了信号的准确性。4、简述胞

18、内信号传递过程中作为信号起始的分子开关的作用原理（1） 磷酸化和去磷酸化： 发挥作用的是两种主要的蛋白质激酶-丝氨酸/苏氨酸激酶和酪氨酸激酶。 信号传入时，蛋白激酶被激活并且磷酸化下游的蛋白。 过程中ATP作为磷酸基团的来源。 在去磷酸化酶的作用下，下游蛋白上的磷酸分子脱去， 激活的状态消失。 （2） GTP结合和去结合： 通过这种方式激活的蛋白质主要是G蛋白和小G蛋白。G蛋白结合的GDP被GTP 取代， 并且激活，进一步激活下游分子。 大G蛋白通常传递G蛋白偶联受体接受的信号， 而小G蛋白通常呈递多类细胞表面受体的信号。5、举例说明不同组合的信号对细胞命运、功能的调控机制同一个细胞可以对很多

19、不同组合的细胞外信号产生特异性反应，其原因就是信号传导复合体的存在。信号传导复合体可以特异性地对不同的信号相互作用，进而调节细胞的功能。不同信号对细胞的调节功能不同，但不同的信号通路之间也会相互影响、相互交叉，共同对细胞调节起作用。 例如：由TCR/CD28激活的PKB途径抑制Fas介导的细胞死亡。在T细胞中，PKB由TCR和CD28下游的PI3K激活。由FasL启动的Fas导致procaspase-8募集到DISC处。Procaspase-8的加工和激活可以导致下游效应器的激活，产生caspase-3，进而导致细胞凋亡。FLIP可以结合到procaspase-8上并抑制其活性，而PKB可以通

20、过抑制procaspase-8转移到DISC上的方式来抑制其加工，最终抑制细胞的死亡。 4. 论述蛋白质激酶PLK1在细胞中的生物学功能。cell proliferation III PLK1很细地记住。PLK1通过对蛋白复合物的磷酸化引导Pre-RC的产生及保持稳定以启动DNA复制。（在未受干扰的细胞中，PLK1可以促进Pre-RC招募磷酸化的Hbo1；在受干扰的细胞中，通过磷酸化Orc2来稳定Pre-RC的休眠状态。）通过多种方式调节APC/C促进有丝分裂进入G1期。调节中心体的复制PLK1和蛋白激酶B能够协同调节微管与动粒的结合在分裂后期促进纺锤体的伸长，从而促进有丝分裂进入胞质分裂期。

21、功能： 中心体的分离和成熟、纺锤体形成、染色体分离和胞质分裂。在胁迫环境下，通过稳定复制前复合物来促进DNA复制。此外对于DNA损伤的修复也有作用。5.影响细胞分化的重要因素a.细胞的全能性：细胞的全能性决定了细胞最基本的分化潜能。b.影响因素：（1）胞外信号分子：在早期胚胎发育中，一部分细胞会影响周围细胞使其向一定方向分化，称为近端组织的相互作用，也称为胚胎诱导，这一作用是通过近距离细胞相互间旁分泌产生的信号分子来调节，包括FGF、TGF、hedgedog、Wnt等生长因子。（2）细胞记忆与决定：信号分子的有效作用时间是短暂的，然而细胞可以将这种短暂的作用储存起来并形成长时间的记忆，逐渐向特

22、定方向分化，同时细胞决定也与细胞记忆有关，是正反馈调节。（3）受精卵细胞质的不均一性：由于细胞具有记忆功能，随着分化信息的不断累积使之成为“决定”了的细胞，这种与细胞分化相关的信息可以上溯至受精卵，卵母细胞中含有多种不均一的mRNA，他们一般处于非活性状态，但在卵裂过程中他们不均等的给了子细胞，并且有些在之后会被激活，它们决定了未来细胞分化的命运，这种mRNA也被称为决定子。（4）细胞间的相互作用和位置信息：改变细胞所处的位置可导致细胞分化方向改变，这就是位置效应，其产生的主要原因是如sonic hedgedog蛋白等的不均等分布产生的位置信息。（5）环境：譬如性别的决定在许多动物中受到环境的

23、影响，蜥蜴类受温度的影响，蜗牛受个体间的位置关系影响等。（6）染色质变化与基因重排：有些生物中会有发育到一定阶段的DNA消失、重复、重排等现象，这是细胞分化的一种特殊方式。9、 Necrosis和Apoptosis的区别Apoptosis(凋亡) Necrosis（坏死） 调节 基因编码 局部缺血、外伤或ATP减少调控Controlled（受调控） Uncontrolled（不受调控） 细胞形态 收缩、浓缩肿胀 质膜完整性 保持彻底破坏细胞加工出芽 出泡 细胞内容物 形成凋亡小体 直接泄漏到胞外 DNA 碎裂，染色质浓缩 未碎裂 能量需要ATP不需要ATP炎症反应 无 有Mediator 细胞

24、凋亡蛋白酶 不需要蛋白酶（1） 凋亡细胞凋亡是指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。1.形态学特征：胞膜出芽，但保持完整,染色体聚集在核膜周边,胞浆收缩、细胞核凝集,最后细胞分裂为凋亡小体,Bcl-2家族蛋白导致线粒体膜通透性增加2.生化特征：ATP依赖性的（主动过程，在4°C不能发生）,以核小体为单位剪切DNA（电泳显示为DNA ladder）,Prelytic DNA 断裂,线粒体释放多种因子至胞浆中（细胞色素c、AIF）,Caspases级联活化,膜对称性改变（PS外翻）3.生理学特征：它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用，它并不是病理条件下，自体损伤的

25、一种现象，而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。只影响单个细胞 ,由生理学刺激诱导（如生长因子缺乏、激素环境改变等）,被临近细胞和巨噬细胞吞噬无炎症反应。（二）坏死坏死是细胞受到强烈理化或生物因素作用引起细胞无序变化的死亡过程。1.形态学特征：细胞胀大，膜完整性丧失 ,细胞内容物外溢，核变化较慢，DNA降解不充分，全细胞裂解2.生化特征：离子内环境失调,非ATP依赖性的（被动过程，在4°C也可以发生）,随机消化DNA,Postlytic DNA断裂3.生理学特征：影响群组细胞由非生理学因素引起（如补体攻击、代谢中毒、缺氧等）,被巨噬细胞吞噬, 周围有明显的炎症反应10、简

26、述细胞凋亡的内通路（intrinsic pathway）信号传递过程。 内通路：线粒体途径：此通路由含BH3结构域的Bcl-2家族成员在接受到胞内的死亡信号（如DNA损伤，兴奋性氨基酸释放增多、自由基产生增加等）后激活，并与另外的Bcl22家族成员(Bax亚家族成员等)相互作用，导致后者蛋白的寡聚并插入线粒体膜,引起线粒体膜通透性改变,跨膜电位丢失,释放细胞色素C(Cytc)。在ATP/dATP存在的情况下,Cytc与凋亡蛋白酶活化因子(Apaf-1)形成多聚复合体,通过Apaf-1氨基端的Caspase募集结构域募集胞质中的Caspase-9前体,使其自我剪切活化并启动Caspase级联反应

27、, 形成凋亡体(apoptosome)，激活下游的Caspase-3,完成其相应底物的剪切,引起细胞凋亡。外通路：CD95/CD95L死亡通路CD95死亡通路在免疫系统发育和功能中起重要作用。许多细胞均表达CD95,但其配体CD95L仅在激活的T细胞和NK细胞中表达。CD95L是一个同源三聚体,每个三聚体分子结合三个Fas分子,一旦与三聚体的配体相结合,Fas通过胞内段的DD募集胞质中的Fas相关死亡结构域(FADD)。FADD氨基端含有一个死亡效应结构域(DED),此DED和Caspase-8原域中的DED相互作用,把Caspase-8募集到Fas区域,Fas,FADD和Caspase-8形

28、成了死亡诱导信号复合体(DISC),caspase-8酶原自我剪切活化成活性caspase-8。活化的caspase-8可激活下游的procaspase-3酶原为caspase-3,剪切胞浆和核底物,包括多聚ADP-核糖多聚酶,DNA-PK, Lamin B和ICAD。ICAD剪接成CAD后移入核内,降解染色质DNA。位于胞浆的Bid被caspase-8切割成截断的Bid,tBid有很强的促凋亡活性,转移到线粒体膜将凋亡信号传递至线粒体,造成线粒体损伤并诱导其激发MPT,释放Cytc,引发凋亡。【高平】1. 肿瘤发生的原因及机制 肿瘤的发生源于基因突变，包括碱基置换，插入，缺失，移码突变等。这

29、些突变的基因主要是原癌基因，抑癌基因，DNA修复基因、细胞分裂分化相关的基因等，这些基因的失活或过度激活，就会使细胞周期、细胞凋亡、衰老、细胞增殖、分化等发生改变。原癌基因突变激活后，对细胞增殖起正性调控作用的蛋白质表达水平增加，破坏了正常细胞增殖的调控机制。抑癌基因突变失活，导致对细胞增殖起负性调控作用的蛋白表达水平降低，同样也破坏了正常细胞衰老和死亡过程，细胞生长失控。DNA修复基因的突变，使其他基因的突变率大大增加。但是细胞基因组中与肿瘤发生相关的某一基因的突变，并非马上形成癌，而是继续生长直至细胞群体中一系列新的偶发突变的产生。与细胞增殖有关的基因突变，使某些细胞在选择中具有竞争优势，

30、在经过类似过程，逐渐形成携带一系列与癌相关的突变、具有癌细胞一切特征的恶性肿瘤。总之，导致癌症发生的突变基因是多样的，但其通路的种类是很有限的。肿瘤的发生涉及一系列的原癌基因与肿瘤抑制基因的致癌突变的积累。2. 与肿瘤发生发展相关的基因Oncogenes癌基因：控制细胞生长和分裂的正常基因的一种突变形式，即原癌基因的突变形式，能引起正常细胞癌变。（Proto-oncogenes原癌基因：编码与细胞正常生长调控通路相关的蛋白，包括生长因子、受体、激酶、转录因子等。原癌基因的突变时显性的。）Tumor-suppressor genes抑癌基因：正常细胞增殖过程中的负调控因子，编码的蛋白往往在细胞周

31、期的检验点上起阻止周期进程的作用。抑癌基因突变也会致癌，其突变时隐性的。Stability genes：这类基因包括错配修复基因、核苷酸剪切修复基因、碱基剪切修复基因等，能够修复正常DNA复制过程中的微小的突变或使突变基因暴露出来，从而使基因突变减到最小，若它们失活，其他基因将以高水平突变。 3. 与肿瘤发生发展相关的pathway 1. Receptor tyrosine kinase (RTK) pathway对转录因子磷酸化，形成GPG转录导致肿瘤发生，可以由一串长信号通路由Ras蛋白RAFMAPKKErk对转录因子磷酸化，另一方面可以直接通过Stat对转录因子磷酸化。 2. Rb (a

32、) and p53 (b) pathways（a）通过CDKN2A到Cdk的通路引发Rb的磷酸化，Rb的作用是抑制E2F控制细胞周期的规律，这一作用使细胞周期紊乱。（b）由p53/WT1复合体的通路引发Cdk的抑制，扰乱细胞周期，同时抑制Bax和Bcl2使细胞凋亡无法正常进行。 3. Apoptosis pathway 由FAS、Bcl2和Bax所引发的细胞凋亡通路，通过caspase蛋白的协助使凋亡的调控出现问题。4. HIF1 pathway VHL因子对HIF1ub化使其降解，线粒体代谢出现问题。5. APC pathwayGPC3/WNT引发的通路一系列以-catenin为中心的以AP

33、C为主的因子出现问题，影响细胞周期。 6. SHH-GLI pathway SHH/EXT1，2引发的通路PTCHSUFUGlI 最终使细胞周期蛋白出错。7. PI3K pathway较复杂的通路，同时影响细胞凋亡、GPG转录由Pi3K引发，关键因子还有AKT。8. SMAD pathway由EWS到II型受体，引发SMAD2/3的磷酸化，通过SMAD4影响GPG转录。每一个通路的共同特点都是导向HIf1，主要目的都是影响细胞凋亡和细胞周期。4. 癌症的Hallmarks癌症的主要特征：癌症细胞的十大特征：（1）、维持增殖信号（2）、避免生长阻遏（3）、抵抗细胞死亡（4）、潜力无限的复制能力（

34、5）、诱导血管生成（6）、组织浸润和转移（7）、基因组不稳定和突变（8）、促进肿瘤炎症（9、）避免免疫摧毁 （10）、能量代谢异常1) 细胞生长与分裂失去控制，核质比例增大，分裂速度加快。2) 具有侵润性和扩散性，能够形成转移灶。3) 细胞间相互作用改变，异常表达某些膜蛋白，以便黏着其它细胞和继续增殖。4) mRNA的表达谱及蛋白表达谱或蛋白活性改变，如多数具有较高的端粒酶活性，纤连蛋白减少，转录因子Myc过表达等。5) 具有异质性。6) 体外培养时失去接触抑制，可形成细胞克隆，贴壁性下降可悬浮培养。5.干细胞定义、种类、来源及特征定义：指具有自我更新，和多向分化潜能的未分化细胞，可分化为内中外三个胚层的各类细胞。种类：根据分化潜能分为单能干细胞只能分化为单一类型的细胞。 多能干细胞能形成两种及两种以上细胞类型的干细胞。 全能干细胞每个细胞能发育成一个完整的个体。根据来源分为胚胎干细胞（ES）：来自着床前囊胚内细胞团，能够形成身体内所