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文档简介

1、新乡医学院医用化学实验课教案首页授课教师姓名及职称:一、实验名称糖和蛋白质的性质二、授课对象普本授课形式实验教学三、教学目标1、掌握主要糖类和蛋白质的鉴别方法2、熟悉常见糖和蛋白质的性质四、教学内容1、单糖、双糖和多糖的性质2、蛋白质的结构3、反应及现象五、教学安排与课时分配1、 讲解演示40 min2、 学生操作、教师指导80 min六、授课重点糖和蛋白质的性质、鉴定七、注意事项1、酒精灯加热试管时切勿对准自己或他人八、授课方法教师示范讲述,学生操作九、使用教材医用化学实验技术导论闫福林成都科技大学出版社 1998十、教研室审查意见主任签字新乡医学院化学教研室实验 糖和蛋白质的性质、实验目的

2、熟悉糖和蛋白质的组成及性质掌握糖和蛋白质的鉴别方法二、实验原理对于有机化合物来说,有确定其结构,除了元素分析,波谱技术,或测定其物理常数(如熔点、沸点、折光率等)外,利用化学方法进行官能团分析也是很重要的方法。特别是官能团定性实验,操作简便,速度快,马上可以知道结果。官能团的定性检验是利用有机化合物中各官能团所具有的不同特征,与某些试剂发生反应,根据反应现象(如颜色变化、沉淀、放出气体等),与其他化合物进行区别。因此,对定性试验要求反应迅速、结果明显,而且对某一官能团有专一性。1 .糖的性质糖是一类含有多个羟基的醛、酮,具有羟基和羰基的官能团性质。通常分为单糖、双糖和多糖。单糖及含有半缩醛羟基

3、的双糖在水溶液中能发生互变异构现象,开链结构与环状结构具有一定的平衡。因此,具有还原性,也称为还原糖,能与 Fehling试剂,Benedict试剂 和Tollen试剂等弱氧化剂作用。还原糖Tollen试剂还原糖还原糖+Fehling 试剂Ben edict 试剂A'银镜亠CU2O砖红色沉淀4 CU2O砖红色沉淀还原性糖与Ben edict试剂作用,产生砖红色氧化亚铜,临床上常用此反应作血糖和尿糖的定性和定量检查。还原糖与过量的苯肼成脎,可生成难溶于水的黄色糖脎结晶,不同的糖脎均有一定的熔点和晶形,可鉴别某些糖。如葡萄糖与过量的苯肼作用,在热水中很容易生成糖脎。CHOHOHHOHOHH

4、OHHC6H5NHNH 2HOHNNHC6H5C=NNHC6H5OHOHCH2OHCH2OH糖类化合物在浓盐酸或浓硫酸的作用下,能与酚类化合物发生颜色反应,如与a 萘酚的乙醇溶液作用产生紫色,这个反应称为Molish反应。Seliwanof反应,由于此试剂另外,糖还可以与间苯二酚的盐酸溶液作用呈现红色,此反应称为 与酮糖反应出现红色较醛糖快得多,常用此反应来鉴别酮糖和醛糖。淀粉与碘呈蓝色,是淀粉的特性反应。2 .蛋白质的性质蛋白质是由氨基酸缩合而成的大分子化合物,因分子有游离的氨基和羧基,也能发生两性电离。蛋白质还具有胶体性质和生物活性。与一些化学物质作用可以变性发生沉淀。常利用重金属离子与蛋

5、H OI IIN C基团,可以发生白质作用生成不溶性盐来缓解重金属中毒。蛋白质除了具有a 氨基酸与茚三酮反应外,由于分子中含有多个 双缩脲反应,即与稀的碱性硫酸铜溶液作用,呈现紫色。对于分子中含有苯环结构的蛋白质,还可以 发生蛋白黄色反应,即与浓硝酸作用呈现黄色。三、实验1. 糖的性质(1) 仪器与药品试管烧杯酒精灯水浴锅点滴板显微镜浓硫酸、硫酸(3 mol L-1 )浓盐酸、NaOH (100 g L-1)碘溶液 Ben edict试剂 盐酸苯肼醋酸钠溶液Molish试剂Seliwanoff试剂红色石蕊试纸葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖、淀粉溶液糖与Ben edict试剂反应(2) 实验内容 糖

6、与Benedict试剂反应取6支大试管,各加入1 ml Benedict试剂再分别加入2滴葡萄糖、果糖、麦芽糖,蔗糖、淀粉溶 液和蒸馏水(对照管),在沸水中加热23分钟,移出试管,观察并记录结果 糖脎的生成取2支大试管,分别加入 1 ml葡萄糖、果糖溶液,再加入 1ml新配置的盐酸苯肼醋酸钠溶液, 摇匀后置沸水中30分钟。取出试管,自行冷却(为什么?)此时有黄色结晶生成。取少许结晶在显微 镜下观察其晶形。 糖的颜色反应Molish试验 取5支大试管,分别加入 1ml葡萄糖、果糖、蔗糖、淀粉溶液和蒸馏水(对照管)。各加入2滴新配制的Molish试剂,摇匀。将每只试管倾斜,沿管壁徐徐注入1ml浓硫

7、酸,使酸进入管底。观察两层液体交界处的颜色。Seliwanof试验 取4支大试管,各加入1 ml Seliwanoff试剂,然后再分别加入 5滴I葡萄糖、果 糖、蔗糖溶液和蒸馏水,摇匀,在沸水中加热2分钟。比较各管红色出现的次序。 蔗糖的水解取2支大试管,各加入 1ml蔗糖溶液,并往其中一支试管内加入 2滴H2SO4 (3 mol L-1),将两支 试管均置沸水中加热 10分钟。冷却后加入 NaOH (100 g L-1)至溶液呈碱性(红色石蕊试纸变蓝) ,再 各加入10滴Ben edict试剂,置沸水中再加热 3分钟,取出后观察结果。 淀粉的性质与碘液作用 取1支大试管,加1滴淀粉溶液,用蒸

8、馏水稀释10倍,力口 1滴碘液,显何色?再水解反应 用吸管取 用 NaOH 观察结果。( 3)在酒精灯上加热,待颜色退去后,冷却,显何色?思考题取 1 支大试管,加入 2ml 淀粉溶液,再加 3 滴浓硫酸,置沸水中加热。每隔 2 分钟, 1 滴反应液于白瓷板上,加 1 滴碘液,观察颜色变化。当反应液不与碘显色时,取出冷却, (100 g L-1)中和至石蕊试纸变蓝。加入10滴Ben edict试剂,摇匀,置沸水中加热3分钟, 葡萄糖和果糖是否可以用生成糖脎的反应鉴别?为什么? 蔗糖和淀粉与 Benedict 试剂均无作用。此实验对了解二者的结构有何提示?2. 蛋白质的性质( 1 )仪器与药品试

9、管 烧杯 离心管 离心机 点滴板NaOH (50 g L-1) CUSO4 (30 g L-1) HgCl 2 (30 g L-1) AgNO 3 (30 g L-1)醋酸铅(30 g L-1) Molish 试剂 盐酸(0.5 mol L-1)浓硝酸 饱和硫酸铵溶液 硫酸铵粉末 三氯乙酸(100 g L-1)苯酚(10 g L-1) 茚三酮溶液 无水乙醇 苦味酸(50 g L-1)蛋白质溶液(100 g L-1)( 2)实验内容 蛋白质的颜色反应与茚三酮反应 在试管中加入蛋白质溶液,然后加 3 滴茚三酮溶液,在沸水浴中加热 10-15min, 观察现象?Molish 反应 取两支试管,在一试

10、管中加 3 滴苯酚;在另一支试管中加 3滴蛋白质溶液,然后在两 支试管中各加 3 滴 Molish 试剂(此时在蛋白质溶液中有白色沉淀生成) ,将两支试管放在沸水浴中加 热,观察颜色变化。黄蛋白反应 取两支试管,在一试管中加 5滴苯酚;在另一支试管中加 5滴蛋白质溶液,然后分 别加入 2 滴浓硝酸,观察在蛋白质溶液中是否有白色沉淀生成?将两支试管放在沸水浴中加热,此时 两支试管各有什么现象。醋酸铅反应 在试管中加入 10 滴醋酸铅, 滴加 2 滴氢氧化钠, 摇匀后再加 4 滴蛋白质溶液, 振荡, 将试管放在沸水浴中加热 23分钟,观察颜色变化。二缩脲反应 在试管中加入 5滴蛋白质溶液和 5滴氢

11、氧化钠,摇匀后,加入 2滴硫酸铜,振荡, 观察颜色变化。 蛋白质的沉淀中性盐沉淀蛋白质 在离心管中分别加入 2ml 蛋白质溶液和饱和硫酸铵溶液, 混匀后, 静置 10分 钟,球蛋白将析出,将其离心,离心后的上层清液用滴管移至另一离心管中,慢慢加硫酸铵粉末,每 加一次,均用玻璃棒充分搅拌,直到粉末不再溶解为止。静置1 0分钟,则可见清蛋白沉淀析出,离心并吸去上层清液。向上述两离心管沉淀中分别加入蒸馏水2 ml,用玻璃棒搅拌,观察沉淀能否溶解?乙醇沉淀蛋白质 在试管中加入 5滴蛋白质溶液,沿试管壁加入 10滴无水乙醇,摇匀,静置数 分钟,观察溶液能否出现浑浊? 蛋白质的变性酸沉淀蛋白质 在试管中加入 5滴蛋白质溶液,然后加入 1 滴盐酸使其酸化,再滴加 2滴三氯乙 酸,观察沉淀的生成。取两滴蛋白质溶液于点滴板上,加 1 滴苦味酸, (必要时加 0.1 mol L-1 盐酸酸化)观察沉淀生成。重金属沉淀蛋白质在四支试管中,各加入 5滴蛋白质溶液,然后依次加3滴HgCl

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