除菌过滤系统验证方案及报告

1、除菌过滤系统验证方案验证方案的申请与审批验证方案的起草起草部门起草人起草日期验证方案的审核审核部门审核人审核日期验证方案的批准职务批准人签名日期第1页共12页目 录1.概述及验证方案说明1.1.概述1.2.验证目的1.3.验证范围1.4.验证职责2.验证仪器、试剂及文件说明2.1.验证仪器2.2.验证试剂2.3.相关文件3.验证内容3.1.细菌截留验证及滤芯化学兼容性验证3.1.1.杀菌性能验证3.1.2.验证前准备3.1.3.验证步骤3.2.溶出物验证3.2.1.验证前准备3.2.2.验证步骤3.3.吸附验证3.4.可见异物检查4.验证结果评价及结论5.正常运行后的控制要点6.验证周期第2页

2、共12页1.概述及验证方案说明1.1.概述我公司的冻干粉针剂为非最终灭菌的无菌制剂， 除菌过滤是整个工艺流程中保证药液无菌的重要环节。 公司在生产中使用的除菌过滤系统包括滤芯、 滤壳。滤芯为上海金科生产的 0.2um 的除菌级聚醚砜滤芯，规格为 5 英寸；过滤设备为山东潍坊精鹰生产的配液、除菌过滤系统。1.2 验证目的：通过此验证，证明该除菌过滤系统符合本公司注射用生长抑素冻干粉针剂生产工艺要求和 GMP 规定。1.3 验证范围本方案适用于本公司的注射用生长抑素冻干粉针剂在新建冻干粉针剂车间的除菌过滤系统验证。1.4 验证职责小组职务姓名所在部门职责组长组员组员组员组员组员组员第3页共12页2

3、.验证仪器、试剂及文件说明2.1 验证仪器仪器名称型号或规格校正时间标准规定是否符合要求过滤器完整性检测仪除菌过滤系统除菌过滤滤芯PH 计高效液相色谱仪不溶性微粒检测仪电子天平偏差分析及总结：确认人日期复核人日期第4页共12页2.2.验证试剂试剂名称厂家备注甘露醇药用醋酸生长抑素原料药缺陷假单胞菌规格： 107CFU/片2.3.相关文件公司文件编号滤芯的供应商审计报告除菌过滤系统安装确认、运行确认高效液相色谱使用SOPxxx 型完整性测试仪使用 SOP不溶性微粒检测仪使用SOP注射用生长抑素生产工艺规程注射用生长抑素半成品配制SOP5.验证内容：5.1. 细菌截留验证及滤芯化学兼容性验证取规格

4、为 107CFU/片的菌片，将其培养成1010CFU/ml 的菌悬液，备用。根据 10 版 GMP 要求，验证细菌截留时，滤膜单位面积除菌量不得低于 107CFU/cm2。2.5 寸的滤芯过滤面积为1250cm2， 因此所需菌液量不能少于1.25 1010CFU 缺陷假单胞菌。5.1.1 杀菌性能验证3.1.1.1 从生产线中取已配置好的生长抑素半成品溶液100ml，用移液枪移加入 1ml 浓度为 1010CFU/ml 的菌悬液，混匀。取混匀后溶液 1ml ，稀释涂布培养， 平行操作两份， 作为对照组。 3037培养 48 小时候后，计算菌落数，通过菌落数推算菌悬液浓度。带菌药液放置8 小时后

5、，取 1ml 溶液，稀释涂布培养，平行操作两份，作为样品组。 30第5页共12页37条件下培养 48 小时候后，计算菌落数，通过菌落数推算菌悬液浓度。将其结果记录于下表：项目对照组实验组培养基编号12平均值1差值2平均值理论菌悬液浓度(CFU/ml)菌落数 (CFU)实际菌悬液浓度(CFU/ml)菌悬液浓度计算公式：菌悬液浓度 =(菌落数 稀释倍数 )/取样量偏差分析及总结：确认人日期复核人日期3.1.1.2.样品实际菌悬液浓度与对照品实际菌悬液浓度对比， 若前者比后者细菌浓度降低 1 个对数值时，则为杀菌性药液，分析杀菌原因，选择替代药液或方案重新进行验证。 否则，可以认为是非杀菌性药液，验

6、证继续。3.1.2 验证前准备3.1.2.1.滤芯先用注射用水充分润湿。3.1.2.2.按照注射用生长抑素半成品配制SOP在配液罐中配制生长抑素半成品溶液40000ml，备用。3.1.2.3.将除菌过滤系统各个部件连接好， 用注射用水对除菌过滤系统进行检漏，无漏液现象则进行以下操作，不然分析原因并改进。第6页共12页3.1.2.4.将除菌过滤实验用到的仪器设备放到高温灭菌锅中12160分钟灭菌。3.1.3.验证步骤注：在细菌截留试验中，应考虑生产过程中的较差条件。分析过滤的条件中，过滤压力的高低可能对除菌过滤造成较差的影响，故我们选择过滤压力：高于通常情况的0.30 Mpa；通常条件下的0.2

7、0 Mpa；低于通常情况的0.10Mpa。另外，在药液的体积上，我们也比正常生产情况的 34000ml 稍大一些，采用40000ml。3.1.3.1.用移液枪移取 1010CFU/ml 的缺陷假单胞菌菌液 2ml 加入到生长抑素半成品溶液中， 将溶液混匀。 取 5ml 将其放置到离心管中， 冷藏作为对照备用。3.1.3.2.将灭菌后的除菌过滤设备取出连接， 用完整性测试仪进行起泡点测试，测试使用注射用水作为润湿液时的起泡点（ BPw1）并记录。3.1.3.3.过滤带菌药液，用灭菌的离心管取 5ml 过滤液作为样品液； 过滤结束后，用完整性测试仪进行起泡点测试，测产品起泡点（BPp）并记录。3.

8、1.3.4 用氢氧化钠溶液清洗、再用注射用水清洗，再测试起泡点（ BPw2）并记录，则 BPw=（BPw1+ BPw2）/2，并作为标准。产品气泡点的比率：实际产品的起泡点 /水润湿的起泡点BPpBPR = -BPw起泡点偏差表品名：注射用生长抑素冻干粉针剂规格：/支第7页共12页滤芯批号：BPR 的批号：批号：批号均值BPw1BPw2均值BPpBPR偏差分析及总结：确认人日期复核人日期3.1.3.5对比 BPw1 和 BPw2 的起泡点测试数据，若 BPw2 的值相比 BPw1 无明显的降低， 则本滤芯对于药液的化学兼容性好， 适合用于注射用生长抑素药液的除菌过滤。否则，化学兼容性差，需更换

9、滤芯并重新进行验证。3.1.3.6 取对照液及样品液各1ml，稀释涂布培养，各平行操作两份，在 3037条件下培养 48 小时候后，统计菌落数。以上操作分别在过滤压力为 0.1Mpa、0.2Mpa、0.3 Mpa 情况下各操作一次。将结果记录于表：第8页共12页过滤压力0.1 MPa0.2 MPa0.3 MPa所用微生物菌种起泡点合格标准0.34 MPa压力测滤前试滤后滤芯规格批号对照组1 号菌落数2 号样品组1 号菌落数2 号偏差分析及总结：确认人日期复核人日期3.2.溶出物验证3.2.1 验证前准备3.2.1.1.除菌过滤系统的清洗3.2.1.2.除菌过滤系统的灭菌3.2.1.3.准备三个

10、不同批次的滤芯3.2.2 验证操作3.2.2.1.按照注射用生长抑素半成品配制SOP配制药液2000ml，第9页共12页搅拌均匀。3.2.2.2.将药液用压缩空气打入除菌过滤系统中， 注满整个滤筒， 将系统的进、出液口封闭，放置 6 小时，为样品 1。3.2.2.3.将剩余的药液不打入过滤系统，放置到冰箱中冷藏保存， 放置6 小时，为样品2。3.2.2.4 将样品 1 从过滤系统中放出 ,用搅拌器（型号为）搅拌10min。3.2.2.5 以样品 2 为对照，检测样品 1 中的有关物质。 从而通过有关物质的变化判断是否有物质从滤芯中溶出。3.2.2.6 三个批次的滤芯按上述步骤个操作一次，将其结果记录于下表：项目批号样品中物质对照品中物质滤芯偏差分析及总结：确认人日期复核人日期3.3.吸附验证将 3.2.2.4 试验中过滤系统内的的药液取样，检测有效成分初始时含量和放置 6 小时后的含量，将其结果记录下表：项目批号吸附前有效成分吸附后有效成分吸附前后差值第 10 页共12页含量含量滤芯差值标准差值要求小于 2%偏差分析及总结：确认人日期复核人日期3.4 可见异物检查从 3.2.2.4 样品 1 中取适量药液放入到透明的玻璃试管中，观察药液中是否有颗粒物和纤维等可见异物。 若有异物存在， 说明滤芯材质不合格，对滤芯要重新选