用反相高效液相色谱法测定香兰素含量

1、205分析检验食品科学2006, Vol. 27, No. 043.1采用氧弹燃烧灰化技术结合分光光度法可以测定动物脏体中的微量硒。本法所使用仪器设备并不复杂,操作简便,具有较高的灵敏度和精密度,回收率测试试验符合分析测试要求。方法不仅能适用动物脏体中微量硒的测定,还可以适用于能在氧弹中燃烧的动植物样品中硒的测定。3.2经试验测定,对同一种动物的脏体来说,心脏中硒的含量较高,其次是肝脏的含量,在肺中硒的含量相对较少。参考文献:1陈俐娟,李晖.碘化钾-结晶紫-聚乙烯醇吸光光度法测定海豚肝脏中微量硒J.理化检验(化学分册,2000,36(5:195.2贾进铎.氢化物发生原子荧光光谱法测定镍基高温合

2、金中痕量硒和碲J.理化检验(化学分册,2001,37(3:104.3叶毓琼,黄荣,钱广生.巯基棉富集-分光光度法测定食品及药物中的痕量硒J.食品与发酵工业,1994,(4:16.4张明英,袁兰珍,田菊华.单缝石英管火焰原子吸收法测定蒜头、茶叶、大米中的微量硒J.光谱学与光谱分析,1994,14(8:101.5单伟光,陈正晓.催化光度法测定痕量硒的研究J.化学工程师,2001,83(2:38.6鲁丹,张文娟.原子吸收氢化物法直接测定加硒碘盐中硒J.理化检验(化学分册,1999,35(3:135.7郭汉城,钟梅芳.焙烧富集分离-硒化氢发生原子荧光光谱法测定纯锑中微量硒J.理化检验(化学分册,200

3、2,38(12.8许卉,贺萍.催化动力学光度法测定海产品中的痕量硒J.分析化学,1997,27(5:540.收稿日期:2005-05-24作者简介:景丽洁(1954-,女,教授,研究方向为工业分析与环境化学。用反相高效液相色谱法测定香兰素含量景丽洁1,韩伟2,闫光烈2(1.吉林化工学院环境科学与工程系,吉林吉林132022;2.吉林化工学院化学工程系,吉林吉林132022摘要:研究采用反相高效液相色谱法测定香兰素含量,色谱柱为C 18柱,乙腈/水(85/15,V/V为流动相,等浓度洗脱,测定波长为279nm,内标法定量。方法的相对标准偏差为0.46%,加标回收率为98.17%99.50%。适用

4、于香兰素成品的分析,也可用于中间产品的控制分析。关键词:香兰素;高效液相色谱法;测定AssayofVanillinbyReversedPhase-HighPressureLiquidChromatographyJINGLi-jie 1,HANWei 2,YANGuang-lie 2(1.DepartmentofEnvironmentalScienceandEngineering,JilinInstituteofChemicalTechnology,Jilin132022,China ;2.DepartmentofChemicalEngineering,JilinInstituteofChemi

5、calTechnology,Jilin132022,ChinaAbstract :Asimple,rapid,accuratemethodisstudiedforassayofvanillinbyReversedPhase-HighPressureLiquid Chromatography.ThechromatographiccolumnisC 18withacetonitrile/water(85/15,V/Vastheelutingphase,andelutein isoconcentration.Thedetectedwavelengthis279nm.TheRSDis0.46%andt

6、herecovery98.17%99.50%.Themethodis satisfactoryf ora ssayingt hef inishedv anillinp roduct,a nda lsof ora nalyzingt hes emifinishedp roduct.Keywords :vanillin ;HighPressureLiquidChromatography(HPLC;determination中图分类号:O658文献标识码:A文章编号:1002-6630(200604-0205-03香兰素学名3-甲氧基-4-羟基苯甲醛,是世界上产量最大的合成香料。中国是香兰素出口大国

7、,已有50多年的香兰素生产历史,香兰素出口量年均增长率为12%,在北美、欧洲、东南亚等地市场享有良好的信2006, Vol. 27, No. 04食品科学分析检验206誉。在中国香兰素主要用于食品添加剂,此外也广泛用于化妆、烟用等香精的配方中。近几年在医药领域的应用不断拓宽,已成为香兰素应用最有潜力的领域。香兰素在国外应用更加广泛,大量用于生产医药中间体,也用于植物生长促进剂、杀菌剂、润滑油消泡剂、电镀光亮剂等。目前,国内外对香兰素的分析方法研究已有所报道16,多采用液相色谱法,但大都侧重研究香兰素与其它成分的分离,然而作为成品香兰素分析结果的精密度和准确度并不十分令人满意。另外国内高效液相色

8、谱法分析香兰素采用甲醇和异丙醇作为流动相,由于香兰素分子中含有活泼的醛基,易与醇起加成反应,产生不易识别的峰,对香兰素的测定产生干扰,影响香兰素的准确定量。本研究采用反相高效液相色谱法,用乙腈和水作流动相,在279n m下,测定香兰素含量,得到了满意的结果。1材料与方法1.1试剂1.2仪器日本岛津L C-10A D高效液相色谱仪,配备S P D-10AV型UV-Vis检测器和C-R7A型数据处理机。1.3试验条件色谱柱:C18(日本岛津公司生产,5m,15c m×4.6mm;流动相:乙腈/水(含有0.05mol/L醋酸=85/ 15(V/V,等浓度洗脱,流速0.8ml/min;检测器

9、波长: 279nm;灵敏度:0.01AUFS;进样量:20l;温度:室温。1.4方法称取香兰素标准样品0.1000g,用乙腈-水流动相(85/ 15,V/V溶解并定容于100ml容量瓶中,其浓度为1.000g/L,作为标准贮备溶液。从中吸取5.00ml定容于50ml容量瓶中,浓度为0.1g/L,作为标准使用溶液。分别吸取香兰素标准使用溶液4.00、5.00、6.00、7.00、8.00、10.00ml于6个50ml容量瓶中,各加内标物间苯二甲酸标准溶液5.00ml(含间苯二甲酸2.4g,用流动相稀释至刻度,摇匀。由稀到浓依次进样20l,结果见表1,色谱图如图1所示。表1进样量和峰面积比值的关系

10、Table 1 Re lation between sample size an d ratio of area准确称取自制香兰素产品0.0358g于50ml容量瓶中,用流动相稀释至刻度,从中吸取1.00ml于50ml容量瓶中,加内标物间苯二甲酸标准溶液5.00ml(含间苯二甲酸2.4g,用流动相定容至刻度,进样20l,所得色谱图如图2所示。 3.884-0.0-2.0-4.02结果与讨论207分析检验食品科学2006, Vol. 27, No. 042.1色谱流动相的选择反相高效液相色谱法所用的流动相一般为水、甲醇、乙腈或其中的2种到3种混合溶剂。本研究所测定的样品香兰素含有醛基,如果用甲醇

11、作流动相,则用流动相配制的香兰素甲醇溶液会形成许多无关的不易识别的峰,可能是缩醛或半缩醛,对香兰素产品的测定有干扰,因此选用乙腈-水混合溶剂更为适宜。另外乙腈的优点是可以在较低的压力下完成反相色谱分析,对色谱柱更加有利。经试验确定流动相乙腈:水(V/V为85:15。2.2测定波长的选择实验表明香兰素的最大吸收波长在279n m 和230nm,选择高波长是比较好的,因为在高波长处几乎看不到来自样品中杂质的干扰。另外将测定波长选择在最大吸收波长还可以减少进样量,减轻色谱柱的负担,延长柱子使用寿命。因此,本法采用检测波长为279nm 。2.3标准曲线回归方程与相关系数由表1中标准系列进样量(m i

12、为横坐标,相对应香兰素与内标物面积比值为纵坐标绘制标准曲线,并对标准曲线进行线性回归,得到回归曲线与回归方程如图3所示,R 2=0.9998,表明线性关系良好。方法最小检测量为0.016g。2.4方法精密度试验液,在上述操作条件下,进样测定,其结果如表2所示。方法精密度较好。2.5方法准确度试验测定值(g平均值标准偏差相对标准偏差(g (g RSD(%0.00130.46表2精密度测定结果(n=8Table 2 Results of precision test(n=8样品中香兰素量(g加标量(g 0.378298.17表3准确度测定结果Table 3 Results of accuracy

13、test结论用反相高效液相色谱法C 18色谱柱,在279nm 波长下,乙腈:水(V/V=85:15为流动相,等度洗脱测定成品香兰素含量,是一种简便、快速、准确的分析方法,从进样到完成分析只需5min 时间,香兰素含量和峰面积比值之间呈良好的线性关系,相对标准偏差为0.46%(n=8,加标回收率为98.17%99.50%。本方法适于作为香兰素成品的分析方法,也可用于中间产品的控制分析。参考文献:1EdwinMWallace.HPLCofvanillinandrelatedphenolsJ.Jchromatogr Sci,1983,21(3:139-143.2耿安利,魏东炜,井欣.香兰素制备反应液的高效液相色谱分析法J.化学世界,1994,(9:474-476.3范国梁.用反相高效液相色谱分析香兰素和邻香兰素J.化学世界,1990,(1:65-68.4黄艳凤,周庆礼,王昌禄.发酵液中香兰素测定方法的研究J.食品科学,2004,25(6:160-162.5任群翔,孟祥军,葛