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文档简介
1、Malbac - MALBAC 原理MALBAC (Multiple Annealing and Looping Based Amplification Cycles,简称 MALBAC ),即多次退火环状循环扩增技术,是基于哈佛大学谢晓亮院士研究组的一项专利技术,是目前最先进的全基因组扩增技术。该技术及 其在研究人类精子重组方面的独特应用 2 篇论文于 2012 年 12 月刊登于顶级学术期刊Scienee上。技术优势技术简介及原理PCR 扩增往往具有偏好性而且基因组具有大量的冗余,会造成基因组测序准确性不高。而谢晓亮研发的MALBAC技术能从一个细胞的基因组中,分离出来自单细胞的 DNA,
2、然后添加称作引物的短 DNA 分子。这些引物可与 DNA 的随意部分互补,从而使得它们能够附着到 DNA 链上,充当 DNA 复制起点。这些引物由两个部分构成 一一一个包含 8 个核苷酸的粘性部分变化多样,可与 DNA 结合,再加上一个包含 27 个核 苷酸的共同序列。这一共同序列通过将自身掺入到新拷贝链,从而自身成环,防止了过度拷贝,从而大大地降低了 扩增偏倚。利用这种方法,可以完成咼达 93%的基因组测序。技术应用1)样本稀少,用常规方法无法进行基因组或转录组分析癌症研究(穿刺取样、肿瘤循环细胞 CTC,激光微切割组织)胚胎研究(早期胚胎发育、体外受精植入前筛查)原始材料很少的法医学、古生物学干细胞研究2)样本高度异质,细胞之间存在重要差异肿瘤遗传异质性研究,如化疗前后细胞种群及疗效分析生殖细胞,如不孕不育症研究、人类精子重组位点分析
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