HPLC验证方案

1、v1.0可编辑可修改设备/系统名称：高效液相色谱仪设备/系统型号：Waters515 泵、2487检测器方案编号：VM-QC-001-01仪器编号： R211-JY-04方案制备姓名：日期：方案审核1本文件为受控文件，仅供新兴同仁药业有限公司使用并为版权所有，严禁任何无授权使用、泄露或复印，违者必究v1.0可编辑可修改姓名：日期：姓名：日期：方案审核/批准姓名：日期：姓名：日期：目录1.目的 2 .范围 43 .组织与分工 44 .偏差解决 55 .变更控制 56 .确认内容 52本文件为受控文件，仅供新兴同仁药业有限公司使用并为版权所有，严禁任何无授权使用、泄露或复印，违者必究v1.0可编辑

2、可修改安装确认 5运行确认 7性能确认 87 .验证结果汇总及评价 128 .验证周期 139 .设备确认总结报告 1410 .附件 14偏差记录 15.偏差和解决报告 16.附录文件清单 1711 .方案完成后审核/批准 1812 目的为确认waters515HPLC+waters UV2487a效液相色谱系统测试数据准确可靠，性能稳定, 特制订本验证方案，对高效液相色谱仪进行验证。验证过程应严格按照本方案规定的内容进 行。13 范围设备验证内容包括：安装确认、运行确认、性能确认。该方案适用于本公司实验室高效液相色谱系统的验证。14 组织与分工成员组成：部门姓名职务3本文件为受控文件，仅供新

3、兴同仁药业有限公司使用并为版权所有，严禁任何无授权使用、泄露或复印，违者必究v1.0可编辑可修改分工(1)由QC®责制订本验证方案。(2)由QA负责确认本验证方案。(3)由QC®责进行本验证方案的具体执行。(4)由QC®责编写验证报告。.职责划分：(1)验证小组负责本验证方案的设计、批准及实施。(2) QC负责按本验证方案对受试仪器进行验证，并及时报告验证结果，提供验证原始数据。(3)验证小组组长全面协调各项验证工作，负责报告验证结果、审核验证的评价与建议以及 相应的结论，并在验证过程中提供相关的技术支持。4.偏差解决偏差指的是任何的测试失败，偏离规格，缺失文件，

4、或重大偏离已建立的程序而导致 潜在的GMFW合性影响。对于一个偏差事件，偏差必须被审核并评估确定导致偏差的根源。 另外，根据设备的状态对偏差的影响进行分析。如必要，必须进行偏差原因的调查，将调查 结果包括在“偏差和解决报告”中，偏差的解决(如需要采取的纠正措施，或不采取任何纠 正措施但接受该偏差)和说明也包括在“偏差和解决报告”中，如需要纠正措施将会影响部 分确认，这些部分的确认测试将延迟至改正措施完成。偏差还需要完整的记录在“偏差记录” 中并在最终总结报告中讨论。所有的偏差报告和相关的文件必须包括在最终的确认文件中。 5.变更控制所有的变更和修正将根据相应的变更程序进行。如果需要进行变更，应

5、对其作单独评估4本文件为受控文件，仅供新兴同仁药业有限公司使用并为版权所有，严禁任何无授权使用、泄露或复印，违者必究v1.0可编辑可修改以决定是否有必要进行再确认6.验证内容安装确认6.1.1 仪器基本情况：设备名称液相色谱仪设备编号R211-JY-04型 号Waters515+UV2487生产厂家美国waters公司操作软件浙江智达N2000安装位置精密仪器室检查人：日期：复核人：日期：6.1.2 安装确认所需文件资料工程部在设备开箱验收后建立设备档案，整理使用手册等技术资料，归档保存资料档案：资料档案数量存放处Waters515泵使用说明书1工程部UV2487®用说明书1工程部A

6、T-330柱温箱使用说明书1工程部浙江智达N2000工作站合格证11质量部工程部检查人：日期:复核人：日期:6.1.3 设备的外观检查项目结果设备是否无损坏。设备部件是否无缺失。设备是否易于拆卸、清洗。设备安装、固定是否牢靠。设备工作环境是否符合说明书要求。设备安装位置是否恰当，是否留后足够的空间。5本文件为受控文件，仅供新兴同仁药业有限公司使用并为版权所有，严禁任何无授权使用、泄露或复印，违者必究v1.0可编辑可修改电气接线连接是否正确，是否有可靠的接地保护。电缆 是含尢损坏。管路连接是否正确，管路和各连接处是否无泄露。检查人：日期:复核人：日期:6.1.4 高效液相色谱仪主要部件名 称型号

7、编号液相色谱宗Waters515E04515 795M紫外检测器Waters uv2487E04487 719M柱温箱AT-330检查人：日期:复核人：日期:6.1.5 备注/备件核实备品/备件名称型号数量生产厂家色谱柱*200mm* m1支大连依利特笊灯LH-36X21个sonntek针孔滤头ii m*13mm*10於/ 包8包德国 MEMBRANE小系滤膜a m *50nm*50 张/ 盒6盒德国 MEMBRANE检查人：日期:复核人：日期:6.1.6 .设备安装环境检查确认设备的安装环境和地点符合仪器说明书要求。检查结果在下表记录。确认项目可接受标准确认结果项目结论1、电源：设备安装检电

8、压：220±10%电压：符合查所，50/60HZ频率：/、符合可靠接地接地：2、环境检查符合6本文件为受控文件，仅供新兴同仁药业有限公司使用并为版权所有，严禁任何无授权使用、泄露或复印，违者必究v1.0可编辑可修改温度：4 40 C,湿度：203 95%温度：湿度：口不符合结论：检查人：日期:复核人：日期：运行确认6.2.1按waters高效液相色谱仪操作规程进行操作，进行控制旋钮的测试。1 .通电测试：接通仪器电源，将电源开关按向上，则指示灯亮。2 .断电测试：关闭仪器电源，则指示灯灭。3 .泵测试：增加流速时，显示屏显示压力上升，直至稳定，并有废液流出；降低流速速时, 显示屏显示

9、压力上升，直至稳定。4 .2.2测试结果，在下表记录。项目可接受标准结果结论waters 高效液相色谱仪操作规程应通过审核、批准口符合口/、符合通电测试接通仪器电源，将电源开关按向上，则 指示幻凫。口符合口/、符合断电测试关闭仪器电源，则指示灯水。口符合口/、符合泵测试增加流速时，显示屏显示压力上升，直 至稳定，并肩废液流出；降低流速速时， 显小屏显小压力上升，直至稳定。口符合口/、符合结论：检查人：日期:复核人：日期:性能确认5 .3.1验证项目和技术要求检定项目可接受标准7本文件为受控文件，仅供新兴同仁药业有限公司使用并为版权所有，严禁任何无授权使用、泄露或复印，违者必究v1.0可编辑可修

10、改泵流量设定值误差泵流量设定值误差Ss<± 2%泵流量设定值误差流量稳定性误差SR<± 2%定性测量重复性（5次定量进样）RSDC %.定量测量重复性（5次定量进样）RSDC %UV佥测器波长准确性小值误差± 3nm基线漂移-3.<5 X 10(AU/h)基线噪声<5 X 10 -3 (AU最小检测浓度（静态）4 X 10-7g/ml （蔡的甲醇溶液）6.3.2确认使用的检定设备校正情况，结果在下表记录。厅P名 称仪器编号规格校准日期有效期至1秒表2电子分析天平3容量瓶4温湿度表结论：检查人：日期：复核人：日期：6.3.3 试剂 D-盐酸氨

11、基葡萄糖、重铭酸钾、甲醇、硫酸等。证方法及结果6.4.1 泵流量设定值误差Ss、流量稳定性误差SR的检定。将仪器的输液系统、进样器、色谱柱和检测器连接好，以甲醇为流动相，按表1设定流量, 待流速稳定后，在流动相排出口用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，准确地收集10-25分钟，称量。按下式计算 Ss和SR表1流星设止值 ml/min测量次数333收集流动相时间min2515108本文件为受控文件，仅供新兴同仁药业有限公司使用并为版权所有，严禁任何无授权使用、泄露或复印，违者必究v1.0可编辑可修改允许误差Ss3%2%2%SR3%2%2%计算公式： Ss=(Fm-Fs)/Fs *

12、 100%SR=（Fmax-Fmin）/F*100%式中Ss为流量设定值误差（%Fm=（W2-W1）/）.t 为流量实测值（ml/min ）；W2容量瓶+流动相的重量（g）;W!容量瓶的重量（g）;Fs 流量设定值（ml/min ）；P实验温度下流动相的密度（g/cm2）；t收集流动相的时间（min）；SR流量稳定性误差（%;Fmax同一组测量中流量最大值（ml/min ）；Fmin同一组测量中流量最小值（ml/min ）；F同一组测量的算术平均值（ml/min ）；泵流量设定值误差Ss、流量稳定性误差SR的检定流重设止值（ml/min ）流量实测值（ml/min ）平均值流量设定值误差S S

13、 （%平均值流量稳定性误差（%结论:9本文件为受控文件，仅供新兴同仁药业有限公司使用并为版权所有，严禁任何无授权使用、泄露或复印，违者必究v1.0可编辑可修改检定人：日期：复核人：日期：6.4.2 定性、定量测量重复性的验证将仪器联接好，使之处于正常工作状态，用进样阀的定量管注入稳定的待分析样品溶液（ D-盐酸氨基葡萄糖），记录保留时间和峰面积，连续测量 5次，计算相对标准偏差RSD色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以流动相A:流动相B（90/10）为流动相（流动相A为磷酸：辛烷磺酸钠：水=流动相B为乙月青），检测波长为195nm测定法：取D-盐酸氨基葡萄糖对照品适量，

14、精密称定，加蒸储水溶解并定量稀释制成每1ml中约含5mg的溶液；摇匀，取20 n l注入液相色谱仪，记录色谱图。定性、定量测量重复性的检定进样次数保留时间峰面积平均峰面积标准偏差RSD%标准规定结论1RSDC %2345结论：检定人：日期：复核人：日期：6.4.3紫外检测器性能6.4.3.1 UV 检测器波长准确性方法：已知苯在、有特征吸收，故配置100mg/ml苯的乙醇溶液运行" Sample scan”程序。波长误差均应小于3nm波长准确性规定实测规定实测10本文件为受控文件，仅供新兴同仁药业有限公司使用并为版权所有，严禁任何无授权使用、泄露或复印，违者必究v1.0可编辑可修改结

15、论：检定人：日期：复核人：日期：6.4.3.2 基线漂移和基线噪声的测定将仪器的各部分连接好，紫外检测器波长调到254nm流动相为100湘醇，流速为min,纸速为5mm/min吸收度范围选择最灵敏档，开机，待基线稳定后，记录基线3040分钟，计算基线漂移和噪声。基线漂移应0 5X 10-3(AU/h),基线噪声应0 5X10-4(AU)。基线漂移和基线噪声的测定指标项目标准结果结论基线噪声(RIU)-4< ± 5X 10基线漂移(RIU/h)<5X 10-3 (RIU/h)结论：检定人：日期：复核人：日期：6.4.3.3 最小检测浓度检定在静态条件下，用注射器注入4X10

16、-7g/ml蔡的甲醇溶液，样品峰高应大于或等于两倍基线燥 声峰高，按下式计算最小检测浓度。Ct=2 - HN C/H式中：Ct:最小检测浓度(g/ml)HN:噪声峰高(记录仪格数或实测高度 cmC:样品浓度(g/ml)11本文件为受控文件，仅供新兴同仁药业有限公司使用并为版权所有，严禁任何无授权使用、泄露或复印，违者必究v1.0可编辑可修改H:样品峰高（记录仪格数或实测高度 cnj）结论：检定人：日期:复核人：日期:7 .验证结果汇总及评价验证条件验证项目认可标准结果电压：环境温度： C, 相对湿度;输液系统泵流量设定值误差Ss<±2%;流量稳定性误差S r<±

17、 2%定性测重复性误差（5次定量管进样）RS庆%定量测重复性误差（5次定量管进样）RS庆%UV检测器性能基线漂移0 5X 10-3 (RIU/h); 基线噪声0± 5X10-4 (RIU)检测器波长准确性<± 3nm最小检测浓度4X10-8g/ml结论检定人：日期：复核人：日期：8 .验证周期液相色谱仪的验证周期为两年，当更换部件或对仪器性能有怀疑时，应随时验证，并记录验证结果。9 .设备验证总结报告10 .附件11 .方案完成后审核/批准12本文件为受控文件，仅供新兴同仁药业有限公司使用并为版权所有，严禁任何无授权使用、泄露或复印，违者必究v1.0可编辑可修改设备验

18、证总结报告设备名称设备编号执行总结：确认项目测试描述通过/失败后无偏差安装确认文件核实口通过 口失败后 口无主要部件核实口通过 口失败后 口无设备的外观检查口通过 口失败后 口无备件/改换部件核实口通过 口失败后 口无运行及性能确认SO用勺核实口通过 口失败后 口无关键仪表校验的核实口通过 口失败后 口无仪器运行及性能测试的核实。口通过 口失败后 口无偏差总结：13本文件为受控文件，仅供新兴同仁药业有限公司使用并为版权所有，严禁任何无授权使用、泄露或复印，违者必究v1.0可编辑可修改后续措施和负责人：结论：DPASS通过DFAIL未通过报告人日期审核人日期1 .偏差记录记录偏差报告号码并给出简短描述。当偏差解决后，在偏差结束栏签名并注日期偏差编号偏差描述偏差完成人/日期14本文件为受控文件，仅供新兴同仁药业有限公司使用并为版权所有，严禁任何无授权使用、泄露或复印，违者必究v1.0可编辑可修改2 .偏差和解决报告系统/设备：偏差号：发生日期：偏差说明：报告人：日期：根源及影响评估：改正措施（如必要）：措施制备人：日期：QAf昔施批准人：日期：15本文件为受控文件，仅供新兴同仁药业有限公司使用并为版权所有，严禁任何无授权使用、泄露或复印，违者必究v1.0可