乙肝两对半终结版

1、乙肝两对半定量测定技术对HBVg染诊断、治疗的意义邳州市中医院检验科李平1、前言乙型病毒肝炎是由乙肝病毒HBV感染引起的传染性疾病.在 全球范围内,乙肝的发病率均比拟高,属于临床上常见的一种传染病. 由于乙肝病毒感染易转化为慢性乙肝,继而开展成肝硬化,肝癌,所 以需要早诊断早治疗.我国是乙肝病毒的高危流行地区. 在我国大部 分医院,预防、诊断及治疗乙肝时,乙肝两对半的检测结果为主要依 据.通过乙肝两对半的检测结果,可将乙肝病毒活动性复制及传染性 是否存在直接反映出来.酶联免疫吸附试验 ELISA是将抗原抗体 免疫反响的特异性和酶的高效催化作用原理有机的结合起来,可敏感的检测生物标本中微量的特异

2、性抗体或抗原的一种临床检验方法.因其操作简单,灵敏度高,经济平安,不需特殊设备等特点而在临床医 学检验中得到广泛应用1.然而,此方法属于定性检测方法,只能进 行定性分析,“灰区样本易导致漏诊.同时在临床应用过程中,定 性方法难以判断乙肝病毒感染复制情况,患者病情及疗效情况不能实 现动态的监测,使得其在临床中的应用受到一定的限制 .近年来, 乙肝两对半检测中开始采用定量检测方法, 如时间分辨荧光免疫分析 法TRIFA,化学发光免疫分析法CLIA等,因这些方法具备的高 灵敏度、强稳定性等优势,而在临床检测中得以迅速的推广,在一定 程度上弥补了 ELISA方法存在的局限.2、我科乙肝两对半检测的现状

3、分析酶联免疫吸附实验ELISA法作为传统的传染病标志物检测技 术,多年来一直被我科用于乙肝两对半、 丙肝、梅毒等的实验室诊断. 鉴于其定性方法方法学的特性,应用受到极大的限制.因此在 2021 年7月,我科引进了一台EFFICUT俭自动时间分辨荧光分析仪器, 用于开展传染病标志物的定量检测.该机器采用时间分辨荧光免疫分 析法TRFIA,有效排除背景杂质光对检测结果的影响,可获得高灵 敏度、高准确性的传染病标志物定量分析结果, 不仅在早期诊断和判 断是否痊愈中可以应用,而且可在治疗过程中实时监测治疗效果,对于临床治疗方案的制定给予实验室支持.3、问题确立对于传统工程因方法学改变而产生的收费差异,

4、临床上还是存在一定的疑虑,尤其是肝病科,由于其科室我院特色科室之一的诊 治的乙肝病人较多,医生屡次向我科咨询：1转变方法学,定性和 定量检测的区别是什么 2定量检测的临床意义是否真的比定性 检测更具有优势对此,本人以乙肝两对半检测工程为例, 选择肝病科病人,同时对其血液样本进行乙肝两对半的定性和定量检测,比拟检测结果,评价两种检测方法在诊断乙型肝炎病毒感染中的差异,向临床医生介绍乙肝两对半定性和定量结果的区别和临床意义.同时探讨TRFIA的临床价值,给临床医生、给病人选择检测工程提供参考依 据.4、文献查证在我国总人口数量中,约有10%勺人口为乙肝病毒携带者,预防、 诊断及治疗乙肝时,乙肝两对

5、半的检测结果为主要依据.目前,酶联 免疫分析法ELISA为我国检测乙肝两对半时较为常用的方法,此 种检测属于定性检测.由于定性检测方法存在一定的局限性,容易导致“灰区样本漏诊的发生3.近年来,局部医疗机构已逐渐采用定 量检测方法测定乙肝两对半,逐步替代定性的ELISA方法.常用的定 量检测方法有放射免疫分析法RIA,化学发光免疫分析法CLIA, 时间分辨荧光免疫分析法TRIFA等阳6.因定量方法具备的灵敏 度高、稳定性强等优势而广泛得应用于临床检测中,并在一定程度上弥补了定性ELISA方法存在的局限.同时有报道指出,定量测定乙肝 两对半与HBV-DNA!清水平的定量联合测定对乙肝的临床诊断,

6、疗效 观察和预后判断具有更大的临床价值,这是定性方法无法替代的7.5、研究方法1 .检测对象以2021年9月2021年9月选择肝科病人400例,其中住院 病人190例,门诊病人210例)为研究对象,其中男226例,女174 例；年龄2281岁,平均(51.8 ±2.3)岁.2 .方法2.1 标本采集：住院病人收集肝病科病房护士早上抽取的病人空腹静 脉血,门诊病人由采血室护士抽取病人静脉血,并及时别离血清.2.2 ELSIA法检测：试剂来源于北京科卫临床诊断试剂,酶 标仪是深圳华科瑞科的HR801仪器,乙肝五项定性检测严格根据试剂 及仪器说明书进行操作.2.3 TRIFA法检测：TRI

7、FA检测时采用的试剂来于源苏州新波技术有 限公司,仪器EFFICUTAir自动时间分辨荧光分析仪器,乙肝五项定 量检测操作严格根据试剂及仪器说明书进行.2.4 阳性判读标准：ELSIA法检测乙肝两对半参考范围全部为阴性, TRIFA检测的参考范围为：HBsAg为 0-0.2ng/ml, HBsAb为 0-10mIU/ml,HBeAg 为 0-0.5PEIU/ml, HBeA咙 0-0.2PEIU/ml, HBcAb 为 0-0.9PEIU/ml.6、结果ELISA方法与TRIFA方法的检测结果见表1和表2所示表1.两种方法检测乙肝两对半的阳性例数及构成比.方法学工程ELISA (n=400)T

8、RIFA (n=400)阳性构成比阳性构成比HBsAg12130.25%13132.75%HBsAb19147.75%20350.75%HBeAg5112.75%5112.75%HBeAb11929.75%13233%HBcAb20751.75%22355.75%表2,两种方法检测乙肝两对半的模式汇总.(I.HBsAg; 2.HBsAb;3 .HBeAg; 4,HBeAb; 5,HBcAb )方法学模式ELISA (n=400)TRFIA (n=400)例数构成比例数构成比4阳性0010.25%2,4阳性30.75%41%1阳性0030.75%5阳性61.5%82%1,5阳性92.25%102

9、.5%全阴性7518.75%4812%2阳性11428.5%12030%2,5阳性276.75%287%2,4,5阳性4711.75%5012.5%4,5阳性71.75%102.5%1,4阳性10.25%10.25%1,2,5阳性0010.25%1,3,4,5 阳性10.25%10.25%1,3,5阳性5012.5%5012.5%1,4,5阳性6015%6516.25%比照两种检测方法的结果发现,存在检测结果不一致的现象.每一个单项或每一种模式,TRIFA方法的阳性结果普遍高于ELISA方 法；同时存在比方TRIFA方法检测HBsAgM示为阳性者,ELISA方法 检测显示为阴性或者TRIFA方

10、法检测HBcAbM示为阴性者,ELISA方 法检测显示为阳性.说明ELISA方法测试时存在假阳性或假阴性的结 果.7、结果分析两种检测方法结果的不同说明两种方法的方法学性能存在差异, 但是哪一种方法更加适合临床需要进一步的讨论与验证.1 .定量检测乙肝两对半具有更高的检测灵敏度乙肝两对半检测中,采用 ELISA方法检测时,酶标阳性的呈现 需要到达2ng/ml的血清水平；而采用TRIFA方法检测时,阳性呈现 仅需到达0.1ng/ml即可,检测灵敏度显著提升8.因此,采用TRIFA 方法定量检测后,HBsAgffi性可以在更早期被检出,以确证HBe染. 在急性乙肝早期检测中采用 ELISA方法时,

11、HBsAg的检测结果会显示 为阴性,造成漏诊；在局部慢性乙肝患者中,机体免疫对乙肝病毒包 膜蛋白的应答缺乏,从而降低HBsAg勺表达,利用ELISA检测时,HBsAg 会显示为阴性,而且抗-HBs会也显示为阴性,造成漏诊；乙肝病毒 变异后,表达量会比拟低,抗原采用ELISA检测时不能检测,造成漏 诊；局部乙肝病毒携带者的HBsAgB度比拟低,尤其是特殊群体,受到长期密切接触的影响,转变为急性乙肝,但传播感染途径并非直接 经由血液,而是少量感染长期积累而成,此种情况下,感染浓度比拟 低,定性的ELISA方法检测将不易检出,造成漏诊；然而上述情况假设 采用定量方法检测,那么假阴性的情况根本不会出现

12、,提升了 HBV染 的诊断准确率.在HBV染的早期诊断中,采用定量检测时,因检 出灵敏度的提升可及早发现患者的病情,从而积极的治疗、预防,避 免开展为乙肝或慢性乙肝携带者.临床观察乙肝患者病情时,“窗口期时间也随着方法检测灵敏度的提升而明显缩短,有利于病情的实时监测.2 .乙肝两对半定量检测可对患者病情动态的观察与监测疾病的发生、开展具备动态性,而且治疗过程中,疗效及预后 也是动态变化的.乙肝五项的浓度变化可直接反映乙肝患者的病情变 化情况、疗效情况等,通过定量检测方法,可对变化过程实施动态监 测,并指导医生对患者病情的判定及治疗方案的调整, 提升治疗效果. 急性乙肝患者治疗过程中,HBsAg

13、 HBsAb浓度变化利用定量分析监 测时,可以较为准确的判断患者病情是否处于恢复期当中, 通常HBsAg 浓度出现下降,而HBsAb度出现升高时,表示患者病情正在开展至 恢复期10.乙肝患者病情及治疗效果的变化可通过 HBeA于口 HBeAbt 度的变化情况反映出来.止匕外,HBeAb勺浓度非常高时,说明患者急 性感染乙肝.3 .乙肝两对半定量检测与 HBV-DN幅量分析的联合应用可更好地反 映病毒复制状态和治疗效果临床治疗乙肝患者时,治疗一段时间后,患者HBsAg检测呈阴性或HBV-DN能测呈阴性时,并不能说明已经完全去除了乙肝病毒, 综合性分析乙肝两对半的五项指标检测结果之后,机体内乙肝病

14、毒状态可以客观的反映出来,可对患者预后较为准确的判断11.血清HBV-DNA佥测结果显示为阴性,而且 HBsAg HBeAb浓度检测结果显 示比拟高时,说明患者的病情并未全部痊愈,病情存在恶化的风险, 应对患者的病情密切的观察,但血清 HBV-DN能测结果显示为阴性, 而且HBsAg HBeAb浓度检测结果显示比拟低时,提示患者病情治疗 效果良好,正在逐渐痊愈,预后情况可有效的改善.4 .乙肝两对半定量检测可正确评价抗体中和乙肝病毒的免疫力情况检测乙肝患者“两对半时,HBsAb的浓度含量如果超过10mIU/mL那么采用ELISA方法检测时,检测结果会显示为阳性,但 此结果并不能说明机体免疫力一

15、定存在；而其浓度含量在10100mIU/mL之间时,ELISA检测结果依然为阳性,此时,机体免疫乙 肝病毒的水平比拟弱,甚至乙肝病毒感染预防的水平都不存在,乙肝病毒感染的风险比拟高12.当HBsAb度含量超过100mIU/mL时,机 体方具备较强的抵御乙肝病毒感染的水平.由此可知,机体中 HBsAb 的浓度含量越高时,机体抵御乙肝病毒感染的水平越高, 而且可长时 间的持续.采用TRIFA检测机体中HBsAb的浓度含量时,机体抵御乙 肝病毒的状态、接种乙肝疫苗的效果均可被判断出来：如果机体中 HBsAb勺浓度含量比拟少时,乙肝疫苗的接种应增强,从而降低机体 感染乙肝病毒的风险.止匕外,个体差异的

16、存在导致机体接种乙肝疫苗后产生不同的免疫力,有些个体接种乙肝疫苗后,数十年内HBsA曲 浓度含量均会持续比拟高的状态,而有些个体接种乙肝疫苗后,几年 内即会消失.因此,乙肝预防及筛查中,应十分注意这类高危人群.8、结论综上所述,乙肝两对半检测中,定量检测的灵敏度及准确性要优 于定性检测,检测时可综合采用这两种检测方法,扬长避短,提升检 测的准确性,防止漏诊.预防性筛查乙肝患者时,可以用定性分析. 对于疑似乙肝患者或是乙肝患者应进行定量检测,可提升诊治的准确性,尽早发现患者的乙肝病情,及时给予患者治疗,改善患者预后.【参考文献】1王兰兰,临床免疫学与检验.人民卫生出版社,M2021年第5版： 9

17、1-92.2杨国绘,许文龙,窦琳琳等.1128例HBV-DNA1量和乙肝血清学 标志物定量结果之间的相关性研究J.中国卫生检验杂志,2021, 23(02): 351-354.3杨慧.乙型肝炎血清两对半检测与 HBV-DN腋度的分析J.中外 医疗,2021, 10 (27): 188+190.4黄志勇,陈然峰,董长林等.固相放免法定量乙肝两对半转珠前后 结果比拟分析J.武警医学院学报,2004, 13 (5): 401, 406.5龙绍芬,黎铁斌等.乙肝两对半定量检测结果分析J.实验与检验 医学,2021, 30 (2) : 187-188.6刘灿,陈静,李雯.化学发光法与ELISA法对乙肝两对半少见模式 测定的比拟分析J.中国实验诊断学,2007, 11 (12): 16807胡夷.乙肝两对半定量检测和 HBV-DNA1量检测结果比照分析J. 中国保健营养,2021, 25 (10): 275.8张双元.ELISA法检测乙肝两对半的意义及临床应用J.当代医 学,2021, 8 (26) : 66-67.9熊丽红