干扰素释放试验ppt课件

1、 Y-干扰素释放实验的临床运用 Y干扰素释放实验(interferon1 release assays， IGRA是检测结核分枝杆菌(MTB)特异性抗原刺激T细胞产生的Y干扰素，以判别能否存在MTB的感染。IGRAs可弥补PPD实验的缺乏，目前多个国家已将其用于诊断MTB埋伏感染(1atent tuberculosis infection，LTBI)，我国部分医院也已常规开展此项检测目前国际上较成熟的IGRAs有2种：(1)全血法：采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测全血中致敏T细胞再次遭到MTB特异性抗原刺激后释放的1干扰素程度，称之为全血检测或结核感染T细胞免疫检测；(2)细胞法：采用酶

2、联免疫斑点技(ellzymelinkedimmunospot assay，ELISPOT)测定在MTB特异性抗原刺激下，外周血单个核细胞中可以释放1一干扰素的效应T细数量，称之为细胞检测或结核感染T细胞检测。上述2种检测方法的原理类似，检测技术和操作程序略有不同，均采用MTB的RDl区基因编码抗原多肽作为特异性抗原，主要相对分子质量为6 000的早期分泌抗原靶(ESAT-6)和相对分子质量为10 000的培育滤液蛋白(CFP一10)抗原或抗原多肽T-SPOTT-SPOT实验实验干扰素干扰素检测阴性检测阴性干扰素干扰素检测阳性检测阳性TB抗原多肽T细胞活化T细胞 干扰素30IGRAs的结核特异免

3、疫抗原 SAT-6和CFP一10主要存在于MTB复合群，而在卡介苗和大多数NTM中缺失，因此IGRAs的特异度较好。 但ESAT-6和CFP10也存在于少数几种NTM中，如堪萨斯分枝杆菌、海分枝杆菌、苏尔加分枝杆菌、转黄分枝杆菌和胃分枝杆，故IGRAs阳性不能排除上述几种NTM感染的能够。PPD实验与IGRAs的对比PPD实验作为诊断MTB感染的传统方法，具有操作简便、本钱低廉的特点，至今仍广泛运用，但该方法运用的PPD抗原成分复杂，易受卡介苗接种和非结核分枝杆菌(nontuberculosismyeobacterium，NTM)的影响，特异度较低，且对人免疫缺陷病毒(HIV)感染及重症疾病患

4、者等免疫功能受损人群的敏感度缺乏。荟萃分析结果显示，在HIV感染人群中，IGRAs的敏感度并未高于PPD实验，但IGRAs(尤其是细胞检测)受CD4+T细胞数量的影响小于PPD实验，这能够由于IGRAs检测过程已对单个核细胞数量进展了规范化，即在检测程序上消除了淋巴细胞数量减少对检测结果的影响PPD阳性对以下情况无法区分 卡介苗预防接种 非结核分枝杆菌感染 LIBI 活泼结核病 结核病治愈、自愈后IGRAs阳性 卡介苗预防接种 大多数非结核分枝杆菌感染 LIBI 活泼结核病 结核病治愈、自愈后2019年 全国结核病流行病抽样调查结核分枝杆菌复合群 77.1%，非结核分枝杆菌22.9%2019年

5、广州结核病流行病抽样调查：非结核分枝杆菌19.3%，且其中前5位IGRAs为阴性的IGRAs的敏感性和特异性 美国FDA认证临床实验数据： 经培育确诊的结核病患者样本183例 敏感性95.6%175183 306例入伍新兵 特异性97.1%297 306 对活动性结核病的辅助诊断：PPD实验和IGRAs均无法区分LTBI和活动性结核病患者。国内IGRAs的研讨数据显示其敏感度和特异度差别较大，敏感度为53一98，特异度为6090(或以上)，但多数文献报道的敏感度和特异度70，提示IGRAs的特异度优于PPD实验。IGRA用于诊断肺结核：深圳第三人民医院的结果例数例数（n）ELISPOT(+)

6、n (%)结核患者24461846（75.47） 急性播散型肺结核5851（87.93） 继发性肺结核18381389（75.97） 结核性胸膜炎538428（79.55） 结核性脑膜炎5940（67.80） 其他肺外结核356275（77.25）陈旧性肺结核5624（42.86）健康对照42265（14.20）新发肺结核密切接触者384136（35.4）中国的国情适用IGRAs吗？Y-干扰素释放实验在中国运用的建议IGRAs可以有 思索到我国肺结核患者中菌阴肺结核所占比例较高，在诊断这类患者缺乏细菌学根据时，IGRAs可发扬其辅助作用 运用于活动性结核病的辅助诊断 运用于LTBI诊断中IGR

7、As用于体液或组织标本？ 近几年来国内有IGRAs(仅限于ELISPOT方法)辅助诊断结核性胸膜炎和结核性腹膜炎等肺外结核的报道，其中采用胸腔积液和腹水等体液或组织标本检测的IGRAs的敏感度和特异度高达90以上，采用血液标本检测时IGRAs那么并未显示出优势。 此类研讨报道数量不多，病例数也缺乏，且国家食品药品监视管理总局同意的IGRAs仅限于血液样本的检测，即IGRAs对体液或组织标本的研讨尚未经过充分验证，不能得出可靠的结论。IGRAs对儿童结核病的辅助诊断 儿童结核病的临床病症不典型，重症及肺外结核病比例较高，且结核病患儿的细菌载量低，咳嗽反射和气管纤毛运动才干差，病原学检查阳性率很低

8、，PPD实验和IGRAs结合诊断有一定的辅助作用。IGRAs在LTBI诊断中的运用 1活动性肺结核患者亲密接触者和医务任务者中LTBI的诊断 2IGRAs在HIV感染等免疫抑制或缺陷患者LTBI诊断中的运用活动性肺结核患者亲密接触者和医务任务者中LTBI的诊断 1.PPD实验和IGRAs均可用于LTBI的诊断和追踪，假设思索到PPD实验检测结果能够受卡介苗接种或NTM影响时，可对PPD实验阳性者进一步采用IGRAs协助确认；(2)不宜采用IGRAs对大范围人群进展LTBI筛查；(3)PPD实验仍是在安康人群中动态筛查LTBI的首选。 (1)对HIV感染人群进展LTBI筛查，单用PPD实验的敏感

9、度不高，应单用IGRAs或结合运用PPD实验，在方法选择上优先思索细胞检测技术。 (2)本身免疫性疾病和器官移植患者在接受糖皮质激素或 TNF-拮抗剂治疗前，应单用IGRAs或结合运用PPD实验 筛查LTBI。除HIV感染者外，类风湿关节炎等本身免疫性疾病、器官移植等免疫功能受损患者及糖尿病等特殊患者，因其本身缘由，或接受糖皮质激素或肿瘤坏死因子 TNF拮抗剂等免疫抑制药物治疗导致免疫功能缺陷，这类患者是LTBI开展为结核病的高风险人群，对这类患者也有必要进展LTBI筛查。应行IGRAs和PPD检测的6种情况WHO 2019 HIV阳性者 肺结核病人的接触者 拟进展抗TNF治疗的患者 拟透析的患者 拟行器官及造血细胞移植者 矽肺患者结语(1)IGRAs可用于诊断MTB感染，但不能区分活动性结核病和LTBI，也不能准确预测LTBI开展为活动性结核病的风险(2)IGRAs对疑似结核病患者具有辅助诊