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文档简介

1、年产 100 万株栀子植物组培实验方案设计目录:第一章栀子花概述第二章功能说明一、整个工程的功能整二、栀子组织培养实验室说明第三章土建工程一、组培实验室平面图二、工程平面图第四章组培方案第五章主要设备第六章资金预算第七章市场前景一、栀子的市场展望二、中国栀子市场现状及具分析三、效益分析第一章栀子花概述栀子花又名栀子,黄栀子,原产中国。喜温暖湿润和阳光充足环境,较耐寒,耐半阴,怕积水,要求疏松、肥沃和酸性的沙壤土。属茜草科、栀子属。常绿灌木。小枝绿色,叶对生,革质呈长椭圆形,有光泽。花腋生,有短梗,肉质。果实卵状至长椭圆状,有59 条翅状直棱, 1 室;种子很多,嵌生于肉质胎座上。5 7 月开花

2、,花、叶、果皆美,花芳香四溢。根、叶、果实均可入药,有泻火除烦,清热利尿,凉血解毒之功效。栀(zh ) 子花的话语是“永恒的爱 , 一生守侯和喜悦“。传说中栀子花的花语是等待的爱情。栀子的功效与作用栀子花根的【功能主治】清热,凉血,解毒。治感冒高热,黄疸型肝炎,吐血,鼻衄,菌痢,淋病,肾炎水肿,疮痈肿毒。分类草药性 :治妇女气血不和。广西中药志 :治牙痛。四川中药志 :开心窍,解心热,通小便。治黄疸,吐血,痢血,五淋,跌打。广州部队常用中草药手册:清热解毒,凉血泻火。治黄疸型肝炎,蚕豆黄,感冒高热,菌痢,肾炎水肿,鼻衄,口舌生疮,乳腺炎,疮疡肿毒。栀子花叶【功能主治】活血消肿;清热解毒。主跌打

3、损伤;疔毒;痔疮;下疳第二章功能说明一、整个工程的功能整个工程的功能是要能够在预定的时间里培养出一定数目的苗子(100 万),达到目标,实现市场化的要求。二、栀子组织培养实验室说明在进行植物组织培养工作之前,首先应对工作中需要哪些最基本的设备条件有个全面的了解,以便因地制宜地利用现有房屋,或新建、改建实验室。实验室的大小取决于工作的目的和规模。以工厂化生产为目的,实验室规模太小,则会限制生产,影响效率。在设计组织培养实验室时,应按组织培养程序来没计,避免某些环节倒排,引起日后工作混乱。植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。要做到无菌的条件,需要一定的设备、器材和用具,同时还需要人工控制温度、

4、光照、湿度等培养条件。实验室设计原则:保证无菌操作,达到工作方便,防止污染。实验室组成 :化学实验室、洗涤菌室、无菌操作室(接种室)、培养室、细胞学实验室、其他小型仪器设备。(一)基本实验室基本实验室包括准备室、洗涤灭菌室、无菌操作室、培养室、缓冲间,是组织培养实验所必须具备的基本条件。1、准备室(化学实验室)功能:又叫化学实验室,进行一切与实验有关的准备工作:完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、器皿洗涤、培养基配制与分装、培养基和培养器皿的灭菌、培养材料的预处理等。要求: 有 20M2。要宽敞明亮、以便于放置多个实验台和相关设备,方便多人同时工作;同时要求通风条件好,便于气体交换;实验室

5、地面应便于清洁,并应进行防滑处理。分类: 分体式 - 研究性质实验室,分开的若干房间将准备室分解为药品贮藏室、培养基配制与洗涤室和灭菌室等,功能明确,便于管理,但不适于大规模生产。通间式 - 规模化实验室, 准备室一般设计成大的通间,使试验操作的各个环节在同一房间内按程序完成。准备试验的过程在同一空间进行,便于程序化操作与管理,试验中减少各环节间的衔接时间,从而提高工作效率。此外还便于培养基配制、分装和灭菌的自动化操作程序设计,从而减少规模化生产的人工劳动,更便于无菌条件的控制和标准化操作体系的建立。设备:准备室应具备实验台、药品柜、水池、仪器、药品、防尘橱(放置培养容器)、冰箱、天平、蒸馏水

6、器、酸度计及常用的培养基配制用玻璃仪器等。2、洗涤灭菌室功能:完成各种器具的洗涤、干燥、保存、培养基的灭菌等。要求 :洗涤灭菌室根据工作量的大小决定其大小,本实验室面积控制在40M2。在实验室的一侧设置专用的洗涤水槽,用来清洗玻璃器皿。中央实验台还应配置2 个水槽,用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大,可以购置一台洗瓶机。准备1-2 个洗液缸,专门用于洗涤对洁净度要求很高的玻璃器皿,地面应耐湿并排水良好。设备:水池、落水架、中央实验台、高压灭菌锅、超声波清洗器、干燥灭菌器(如烘箱)等。3、缓冲间功能:是进入无菌室前的一个缓冲场地,减少人体从外界带入的尘埃等污染物。工作人员在此换上工作服、拖鞋,戴

7、上口罩,才能进入无菌室和培养室。进入无菌操作室前在此更衣换鞋,以减少进出时带入接种室杂菌。要求: 缓冲间需5M2,可建在准备室外或无菌操作室外,应保持清洁无菌;备有鞋架和衣帽挂钩,并有清洁的实验用拖鞋、已灭菌过的工作服;墙顶用1-2 盏紫外灯定时照射,对衣物进行灭菌。缓冲间最好也安一盏紫外线灭菌灯,用以照射灭菌。 缓冲间的门应该与接种室的门错开,两个门也不要同时开启,以保证无菌室不因开门和人的进出带进杂菌。设备: 1-2 盏紫外灯、水槽、实验台、鞋帽架、柜子、灭菌后的工作服、拖鞋、口罩。4、无菌操作室(接种室)功能:也叫接种室,主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体

8、的制备以及一切需要进行无菌操作的技术 程序,是植物离体培养研究或生产中最关键的一步。要求:接种室宜小不宜大,一般78 平米(10-20平米)即可,本实验室定为15 M2 。其规模根据实验需要和环境控制的难易程度而定。要求封闭性好,干爽安静,清洁明亮,能较长时间保持无菌,因此不易设在容易受潮的地方;地面、天花板及四壁尽可能密闭光滑,易于清洁和消毒;配置拉动门,以减少开关门时的空气扰动;为便于消毒处理,地面及内墙壁都应采用防水和耐腐蚀材料;为了保持清洁,无菌室应防止空气对流。接种室要求在适当位置吊装1 2 盏紫外线灭菌灯,用以照射灭菌。最好安装一小型空调,使室温可控,这样可使门窗紧闭,减少与外界空

9、气对流。一般新建实验室的无菌室在使用之前应进行灭菌处理,处理方法是甲醛和高锰酸钾熏蒸,并需定期灭菌处理,还可用紫外线照射1-2h/ 周,或每次使用前照射10-30min 。设备:紫外灯、 空调、解剖镜、 消毒器、 酒精灯、 接种器械 (接种镊子、 剪刀、解剖刀、 接种针) ,实验台和搁架,还有超净工作台和整套灭菌接种仪器、药品、时钟等。5、培养室功能:对接种到培养瓶等器皿中的植物离体材料进行控制条件下的培养,无论是研究性实验室还是生产性实验材料进行培养的场所。要求: 约需 10-20 平方米左右,培养室的大小可根据需要培养架的大小、数目、及其他附属设备而定,其设计以充分利用空间和节省能源为原则

10、。本实验室定为 20M2 基本要求是能够控制光照和温度,并保持相对的无菌环境,因此,培养室应保持清洁和适度干燥;为满足植物培养材料生长对气体的需要, 还应安装排风窗和换气扇等培养室的换气装置;为节省能源和空间,应配置适宜的培养架,并安装日光灯照明。研究用实验室,通常可根据光照时间设置成长日照、中日照、短日照培养室,也可以根据温度设置成高温和低温培养室,每一个培养室的空间不宜过大,便于对条件的均匀控制。进行精细培养类型如细胞培养和原生质体培养,可采用光照培养箱或人工气候箱代替培养室。为了控制培养室的温度和光照时间及其强度,培养室的房间不要窗户,但应当留一个通气窗,并安上排气扇。室内温度由空调控制

11、,光照由日光灯控制。天花板和内墙最好用塑料钢板装修,地面用水磨石或瓷砖铺设,一般要分两间,一为光照培养室,一为暗培养室。培养室外应有一预备间或走廊。培养材料放在培养架上培养。培养架大多由金属制成,一般设5 层,最低一层离地高约 lOcm,其他每层间隔 30cm左右,培养架即高 1 7m左右。培养架长度都是根据日光灯的长度而设计, 如采用 40W日光灯,则长 I 3m,30W的长 lm,宽度一般为 60cm。日光灯一般用 40W,固定在培养架的侧面或搁板的下面,每层有两支日光灯,距离在20cm,光照强度为 2000-3000lx 。培养室最重要的因子是温度,一般保持在20 27左右,具备产热装置

12、,并安装窗式或立式空调机。由于热带植物和寒带植物等不同种类要求不同温度,最好不同种类有不同的培养室。室内湿度也要求恒定, 相对湿度以保持在70% 80%为好, 可安装加湿器。 控制光照时间可安装定时开关钟,一般需要每天光照10-16h ,也有的需要连续照明。短日照植物需要短日照条件,长日照植物需要长日照条件。现代组培实验室大多设计为采用天然太阳光照作为主要能源,这样不但可以节省能源,而且组培苗接受太阳光生长良好,驯化易成活。在阴雨天可用灯光作补充。设备:培养架(控温控光控湿)、摇床、转床、自动控时器、紫外灯、光照培养箱或人工气候箱、生化培养箱、边台实验台用于拍摄培养物生长状况,除湿机、显微镜、

13、温湿度计、空调等。(二)辅助实验室根据研究或生产的需要而配套设置的专门实验室,主要用于细胞学观察和生理生化分析等。1 、细胞学实验室功能:用于对培养物的观察分析与培养物的计数,对培养材料进行细胞学鉴定和研究,由制片室和显微观察室组成。制片是获取显微观察数据的基础,配备有切片机、磨刀机、温箱及样品处理和切片染色的设备。应有通风柜和废液处理设施。显微观察室主要是显微镜和图像拍摄、处理设备。要求:明亮、清洁、干燥、防止潮湿和灰尘污染。设备:双筒实体显微镜、显微镜、倒置显微镜等。2、生化分析实验室功能:培养细胞产物为主要目的的实验室,应建立相应的分析化验实验室,随时对培养物成分进行取样检查。大型次生代

14、谢物生产,还需有效分离实验室。第三章土建工程一、组培实验室平面图水槽天平冰箱培仪工器养作药台瓶品烘高压灭菌箱器化学实验室 20M 2无菌室 15M 2超灭培养架菌净待用培培养架养瓶工架培养架作台推拉缓冲间 5M2门培养室 20M 22二、工程平面图(总面积26000M )一展览大厅组培大楼楼大门洗涤及灭化无菌操作室二菌室学楼室缓冲室组培总仓库培养室驯化室组培基地苗温 室圃驯化室面积 100 ,里面配有空调、 加湿器、恒温恒湿控制仪、 喷雾器、通风口、必要的杀虫剂等温室:面积 200 ,有温度控制装置、通风口、杀虫工具及药剂。温室采用钢架塑料薄膜形式,薄膜每年更换一次。第四章 组培方案方案一 :

15、取一、二年生的幼芽,用自来水冲洗,在无菌条件下,先用75酒精浸泡 30秒钟,然后置于0 1升汞溶液中处理10一 14分钟,最后用无菌水冲洗5 6次。把经过消毒灭菌后的外殖体 用 无 菌 吸 水 纸 吸 干 水 分 , 将 叶 片 一 层 层 剥 掉 , 露 出 芽 点 , 接 种 到 Ms+6-BA2mg/L+NAA0.2mg/L( 单位下同 ) 的培养基上,pH值为 6 0,培养温度 22 27,每天光照12小时,光照强度 1 500 2 000Ix ,15天后芽点开始萌动并生长,35天左右茎段芽点诱导成0210cm丛生芽数个。将诱导的丛生芽切下,接种于MS+6-BA3.0+NAA0.2的培

16、养基中,经过约30天的培养,腋芽基部开始形成3 5个丛生状的不定芽,而愈伤组织则形成长满大量不定芽的芽块,这些芽块可用于大量增殖。将30天左右,高约3 0 em的增殖芽从芽块上切下,转人生根培养基 1/2MS+6-BA2.0+NAA0.1 培养 15天左右,产生1 0 3 0 cm长而粗壮的根,此时便可进行移栽,而且极易成活。方案二 :外植体的采集、灭菌:从田间或盆栽取回整株栀子,用自来水冲洗干净外表泥土。剥去植株外层叶片及叶鞘,切掉植株根部和大部分叶片。用75酒精浸泡 15秒钟,再用 0.1%升汞消毒 15分钟,最后用无菌水冲洗 4 5次。把材料纵切成两小块,用于接种。培养基和培养方法:采用

17、MS为培养基,附加蔗糖3、琼脂0.5 以及不同种类和浓度的激素,PH5.8,培养温度 28± 1,光强2000Lux, 每天光照10 12小时。将前面的材料小块,接种在MS6-BA3.5mg/L 十 NAA0.2mg/L 的初代培养基上, 培养 15天后,顶芽开始生长。 为减少褐色分泌物的影响, 20天后转移到同样的新鲜培养基上, 5 7天后肢芽萌动生长。 20天后每个外植体可长出 3 4个小芽。小芽长至1 2厘米时切成单芽,转入继代培养基MS 6-BA4mg/L 十IBA0.3mg/L 。 30天后形成丛生芽,每丛有6 8个小芽。以后可多次分割继代增殖。将长约2 3厘米的单芽,转人

18、生根培养基 1/2MS NAA2mg/L十 0.3 活性碳 , 15天后即可生根。 30天后,组培苗株高 7 10厘米,叶片 3 5张,叶色浓绿,有粗牡白根 4 6条,根长 2 5厘米。炼苗一周后可移栽。移栽和栽培管理:移栽前 3天,打开瓶盖,让组培苗逐渐适应外界气候。小心地把苗从培养瓶中取出,洗净基部培养基,移栽于塑料筛或沙床中。栽培基质按塘泥、腐殖上、河砂、椰糖(或珍珠岩)2 1 1 1混合配制。掌握移栽深度“深不埋心,浅不露根”,保持空气温度70 80,移栽成活率达 80以上,小苗移栽成活后即可上盆种植或大田栽植。栀子的大田种植宜选择阳光充足、排水良好、肥沃疏松的砂壤土地块。多施农家肥,

19、防止清水。第五章主要设备设备 :(实验设备;无菌操作设备;灭菌设备;培养设备;接种工具等5 个方面。也就是说,与一般的化学实验室相比,需要加上无菌和组织培专用的设备。)组培室最基本的实验设备指实验台、晾干架、药品柜、冰箱、烘箱、温箱、搅拌器、离心机、电炉、蒸馏器、天平、ph 计、高压灭菌锅、培养基分装器,以及各种玻璃器皿,如烧杯、培养皿、三角瓶、量筒、滴管、移液管、定容瓶等。此外,还应当有培养与接种方面的设备与用具,如温湿度调节设备、日光灯、培养架、摇床或转床(供悬浮培养用) 、各种类型的培养箱(可调节温度、湿度、光照等) 、各种规格的三角瓶、试管、镊子、剪刀、解剖刀、接种针、酒精灯等。第六章

20、资金预算对年产 100 万栀子组培苗的工厂化育苗其成本预算、成本构成进行了分析和计算,总计预算金额:为 120万,除了固定的资金外,其余作为流动资金。以下为详细预算表:建筑预算表:名称2单价(元) 金额(万元)面积( M)展览大厅100100010组培总仓库1006006一楼其他506003洗涤及灭菌室5010005化学室8010008无菌操作室5010005缓冲间2010002建筑预二楼培养室808006.4算合计53045.4楼内仪器设备药品等预算表:楼内设备预算单价金额(万设备名称数量规格(元)元)高压灭菌器2400L35000.7水槽52800.041M烘箱11000×800

21、× 80032000.32培养架65×2×1.88000.48培养瓶50000215操作台310001.24M冰箱21200×1000×160040000.8PH计220000.4试剂柜、药瓶柜及器械柜310000.3电子天平20.018000.16分析天平20.000135000.75蒸馏水制备器120 升时10000.1超净工作台4双人单面1150004.6恒温培养箱230-100 15000.3空调21.5-3 匹30000.6日光灯30030W40.12化学药品500005包扎线及封口膜50000.5工具如剪刀等2000.02其他2合计

22、23.39组培基地预算表:组培基地预算面积 600 平米,基地内设备与建筑预算在20 万元左右预算总金额:金额总计88.79 万元第七章市场前景一、栀子的前景由于栀子蓝色素与其他红黄品系的天然色素调和后能产生一系列蓝绿变化的色调,可以开发出多种颜色的实用色素。在制取栀子蓝的过程中,控制不同的反应条件还可生产出栀子红色素。由栀子黄、蓝、红三元色,可以调制出如栀子棣、紫等其他的颜色。因此,开发栀子色素资源具有广阔的前景。用栀子花采用浸提法可生产栀子花浸膏(浸膏得率0.1 0.3 ),栀子花浸膏可广泛用于化妆品香料和食品香料。采用水蒸气蒸馏法可生产栀子花油(得油率0.02 )。栀子花油可配制多种花香

23、型香水、香皂、化妆品香精。此外,用减压分馏方法将栀子花油的乙酸苄酯及乙酸芳樟酯单离出来,可作为日用化妆品常用的主香剂或协调剂,也常用于食品,如口香糖的香精。二、中国栀子市场现状及具分析我国是一个拥有13 亿人口的大国,有着广阔的消费市场,随着改革开放,人民收入水平逐步提高。从消费结构看,人们用于食品上的消费支出比例在逐渐下降。而用于穿、用方面的消费支出比例在逐渐增加。我国的恩格尔系数由80 年代的 56%下降的 1997 年的 52%,其中城市部分已达 48%。逐步提高的生活水平、快速的生活节奏和时尚化的现代文明改变着人们的消费观念和生活方式,人们越来越注重生活质量。从消费心理看,人们越来越偏爱天然产品、方便产品,人们的保健、美容意识越来越强,而栀子这种神奇的常绿植物所具有的天然、保健和医疗等性能恰恰适合我国目前社会的、经济的和人们心理的需求趋向。目前,在我国消费品市场上,栀子制品主要在化妆品领域发展。1985 年我国化妆品销售额为 10 亿元, 1996 年销售额约 220 亿元, 1997 年约 253 亿元,比 1996年增长 15%。中国化妆品行业2000 年计划工业总产值为300 亿元人民币, 出口创汇 15 亿美元, 2010 年计划工业总产值达800 亿万人民币,出口可达5 亿美元。然而,

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