疟原虫检验技术学习教案

1、会计学1疟原虫检验技术疟原虫检验技术第一页，编辑于星期二：四点 四十七分。第1页/共89页第二页，编辑于星期二：四点 四十七分。第2页/共89页第三页，编辑于星期二：四点 四十七分。第3页/共89页第四页，编辑于星期二：四点 四十七分。第二步：患都信息的核实采集血样涂片时，首先要核对患者的姓名和年龄并在玻片的右侧编号第4页/共89页第五页，编辑于星期二：四点 四十七分。第5页/共89页第六页，编辑于星期二：四点 四十七分。厚血膜厚血膜 用推片的一角，从取用推片的一角，从取血部位刮取约血部位刮取约4 4微升血量微升血量（相当于火柴头大小），（相当于火柴头大小），使血滴与平置的载玻片接使血滴与平置

2、的载玻片接触，再由里向外一个方向触，再由里向外一个方向旋转，转旋转，转2424圈，涂成直径圈，涂成直径0.810.81厘米大小圆形厚血膜厘米大小圆形厚血膜薄血膜薄血膜再取一小滴血再取一小滴血. .将血置将血置于第一张玻片离厚血膜于第一张玻片离厚血膜适适 当远的地方当远的地方. .将将 推片的推片的边缘紧贴载玻片，轻轻上边缘紧贴载玻片，轻轻上下移动，使血液沿边缘散下移动，使血液沿边缘散开，然后匀速地向前推进开，然后匀速地向前推进，形成薄而平铺的薄血膜，形成薄而平铺的薄血膜第四步：血片制作第四步：血片制作厚血膜薄血膜第6页/共89页第七页，编辑于星期二：四点 四十七分。制片过程图示标签第7页/共8

3、9页第八页，编辑于星期二：四点 四十七分。标签厚血膜血量不宜过多或过少薄血膜平整,无皱折和空泡.显微镜下红细胞单层排列第8页/共89页第九页，编辑于星期二：四点 四十七分。第9页/共89页第十页，编辑于星期二：四点 四十七分。血片制作影响因素血片制作影响因素第10页/共89页第十一页，编辑于星期二：四点 四十七分。两种染色方法:吉氏染色法 1. 染色原液配制 2. 门诊快染、慢染 3. 成批染色和溶血染色 瑞氏染色法 WHO推荐使用吉氏染色法第11页/共89页第十二页，编辑于星期二：四点 四十七分。第12页/共89页第十三页，编辑于星期二：四点 四十七分。第13页/共89页第十四页，编辑于星期

4、二：四点 四十七分。血片染色薄血膜的固定薄血膜的固定u厚血膜充分干燥, 用甲醇固定薄血膜， 平放待干（要点：甲醇不能触碰到厚血膜）第14页/共89页第十五页，编辑于星期二：四点 四十七分。血片染色第15页/共89页第十六页，编辑于星期二：四点 四十七分。将已固定薄血膜的血片插入染色缸，倒入3%吉氏染液（3毫升吉氏染色液加缓冲液或净水97毫升，混匀）浸没血片，染色30分钟。（如染液稀释液不合标准时，得酌情增减染色时间和浓度），然后用清水轻轻将染液漂洗干净，将染色片插于晾干板上晾干，包装，待镜检。 u成批血片染色第16页/共89页第十七页，编辑于星期二：四点 四十七分。厚血膜溶血染色放置多时未染色

5、的血片（3天以上，薄片已用甲醇固定），染色之前，须在厚血膜上用清水进行溶血，待血膜全部溶解后用3%-5%吉氏染色液染色30分钟。然后用清水漂洗干净,晾干。第17页/共89页第十八页，编辑于星期二：四点 四十七分。外观吉氏染色血片偏 酸偏 碱标 准第18页/共89页第十九页，编辑于星期二：四点 四十七分。配置完吉氏原液时必须过滤除去杂质颗粒，有助于提高配置完吉氏原液时必须过滤除去杂质颗粒，有助于提高镜检质量镜检质量；染液稀释后使用时间：染液稀释后使用时间：原液必须临用时稀释，随配原液必须临用时稀释，随配随用；随用；染液的稀释浓度；染液的稀释浓度；染色时间。染色时间。染色质量影响因素染色质量影响因

6、素第19页/共89页第二十页，编辑于星期二：四点 四十七分。染色染色稀释稀释用水用水: PH7.0-7.2清洁水清洁水。染色质量影响因素染色质量影响因素第20页/共89页第二十一页，编辑于星期二：四点 四十七分。固定薄血膜时不要将甲醇触碰到厚血膜；固定薄血膜时不要将甲醇触碰到厚血膜；血膜在制备后应尽量能在当天染色，一般夏天不血膜在制备后应尽量能在当天染色，一般夏天不超过超过4848小时，冬天也不能超过小时，冬天也不能超过7272小时小时, ,放置时间越放置时间越久，厚血膜越不易脱血，染色效果也差。久，厚血膜越不易脱血，染色效果也差。染色质量影响因素染色质量影响因素第21页/共89页第二十二页，

7、编辑于星期二：四点 四十七分。疟原虫镜检 疟原虫厚、薄血膜镜检优缺点 疟原虫密度计数方法 人体四种疟原虫的形态特征第22页/共89页第二十三页，编辑于星期二：四点 四十七分。原虫镜检-金标准第23页/共89页第二十四页，编辑于星期二：四点 四十七分。疟原虫厚、薄血膜镜检优缺点第24页/共89页第二十五页，编辑于星期二：四点 四十七分。第25页/共89页第二十六页，编辑于星期二：四点 四十七分。第26页/共89页第二十七页，编辑于星期二：四点 四十七分。厚血膜厚血膜第27页/共89页第二十八页，编辑于星期二：四点 四十七分。 不需要计数的视野 需要进行白细胞、疟原虫计数的视野如果该视野无原虫，则

8、计数白细胞数 看到第一个原虫开始计数 白细胞原虫密度计数方法第28页/共89页第二十九页，编辑于星期二：四点 四十七分。135（计数的疟原虫数）200（计数的白细胞）x 8000（每微升血白细胞数） =5400 / l答：该患者的疟原虫密度为5400 / l。第29页/共89页第三十页，编辑于星期二：四点 四十七分。用厚血膜每个视野中所观察到疟原虫的平均数粗略地估算出疟原虫密度。此方法将密度分为6级：1.全厚血膜查见疟原虫数在10个以内，记录实际数字2.全厚血膜查见疟原虫数在10个以上，但平均每个视野不到1个虫，记录“少”3.平均每个视野15个虫，记录“”4.平均每个视野6 10个虫，记录“+

9、”5.平均每个视野11 100个虫，记录“+ ”6.平均每个视野100个虫以上，记录“+ ”。 如：Pv R+T+S5G少 这种方法简便，缺点是计数的疟原虫数受血膜厚薄影响，只能定性，不宜作定量分析。半定量计数法第30页/共89页第三十一页，编辑于星期二：四点 四十七分。如何确定疟原虫血片为阴性 检查全部厚血膜视野未查见疟原虫 最少检查100个厚血膜视野未查见 疟原虫（临床病人）第31页/共89页第三十二页，编辑于星期二：四点 四十七分。疟原虫镜检第32页/共89页第三十三页，编辑于星期二：四点 四十七分。第33页/共89页第三十四页，编辑于星期二：四点 四十七分。, ,型疟）型疟）第34页/

10、共89页第三十五页，编辑于星期二：四点 四十七分。 遍布全球温带地区及大片热带地区。在热 带非洲，特别是西非则很少见第35页/共89页第三十六页，编辑于星期二：四点 四十七分。第36页/共89页第三十七页，编辑于星期二：四点 四十七分。原虫镜检第37页/共89页第三十八页，编辑于星期二：四点 四十七分。第38页/共89页第三十九页，编辑于星期二：四点 四十七分。第39页/共89页第四十页，编辑于星期二：四点 四十七分。血小板第40页/共89页第四十一页，编辑于星期二：四点 四十七分。各种血细胞模式图 1.红细胞 2.嗜酸性粒细胞 3.嗜碱性粒细胞 4.中性粒细胞 5.淋巴细胞 6.单核细胞 7

11、.血小板 1234567第41页/共89页第四十二页，编辑于星期二：四点 四十七分。第42页/共89页第四十三页，编辑于星期二：四点 四十七分。核核胞浆胞浆斑点斑点第43页/共89页第四十四页，编辑于星期二：四点 四十七分。疟色素：疟色素：不着色，颜色和颗粒的形状，因疟原虫种类不着色，颜色和颗粒的形状，因疟原虫种类而异，疟色素在虫体内散在分布或聚集成团块。而异，疟色素在虫体内散在分布或聚集成团块。间日疟原虫：呈短棒状，黄褐色；间日疟原虫：呈短棒状，黄褐色；恶性疟原虫：呈细砂状，黑褐色；恶性疟原虫：呈细砂状，黑褐色；三日疟原虫：呈砂粒状，深褐色；三日疟原虫：呈砂粒状，深褐色；卵形疟原虫：与间日疟

12、原虫相似。卵形疟原虫：与间日疟原虫相似。疟色素疟色素第44页/共89页第四十五页，编辑于星期二：四点 四十七分。红细胞不涨大红细胞不涨大环状体纤细环状体纤细, , 常有多常有多重感染，环状体内重感染，环状体内可有可有2 2个核个核 环状体可贴在红细胞环状体可贴在红细胞边缘边缘 除环状体，配子体除环状体，配子体外没有其他发育期外没有其他发育期配子体呈新月形或腊配子体呈新月形或腊肠形肠形成熟裂殖体约含成熟裂殖体约含16-16-3232个裂殖子，排列不个裂殖子，排列不规则规则可出现茂氏点可出现茂氏点恶性疟（恶性疟（P.falciparum） 鉴定要点鉴定要点第45页/共89页第四十六页，编辑于星期二

13、：四点 四十七分。第46页/共89页第四十七页，编辑于星期二：四点 四十七分。第47页/共89页第四十八页，编辑于星期二：四点 四十七分。第48页/共89页第四十九页，编辑于星期二：四点 四十七分。第49页/共89页第五十页，编辑于星期二：四点 四十七分。21. A member of the UN forces in East Timor. Presented with high temperature. 第50页/共89页第五十一页，编辑于星期二：四点 四十七分。第51页/共89页第五十二页，编辑于星期二：四点 四十七分。红细胞明显涨大 薛氏点明显 成熟环状体粗大滋养体胞浆有阿米巴样伪足血

14、片中可见各期的原虫形态成熟裂殖体约含12-24个裂殖子 间日疟（P. vivax ） 鉴定要点第52页/共89页第五十三页，编辑于星期二：四点 四十七分。2. Intermittent fever; arrived from India 2 months ago. 第53页/共89页第五十四页，编辑于星期二：四点 四十七分。第54页/共89页第五十五页，编辑于星期二：四点 四十七分。第55页/共89页第五十六页，编辑于星期二：四点 四十七分。第56页/共89页第五十七页，编辑于星期二：四点 四十七分。第57页/共89页第五十八页，编辑于星期二：四点 四十七分。红细胞不涨大或略小红细胞不涨大或略

15、小环状体中等大小，核较大环状体中等大小，核较大，胞浆粗厚，胞浆粗厚胞浆不活跃呈带状形成熟胞浆不活跃呈带状形成熟滋养体呈滋养体呈菊花状菊花状, ,内含内含6-126-12个个裂殖子裂殖子雌雄配子体小于正常红细雌雄配子体小于正常红细胞，色素呈深褐色胞，色素呈深褐色常可查见各阶段的疟原虫常可查见各阶段的疟原虫三日疟（三日疟（P.malariae） 诊断要点诊断要点第58页/共89页第五十九页，编辑于星期二：四点 四十七分。第59页/共89页第六十页，编辑于星期二：四点 四十七分。第60页/共89页第六十一页，编辑于星期二：四点 四十七分。第61页/共89页第六十二页，编辑于星期二：四点 四十七分。第

16、62页/共89页第六十三页，编辑于星期二：四点 四十七分。卵形疟（P. ovale ） 鉴定要点红细胞正常或略涨大 常见慧星状 (也称齿轮状)环粗大 薛氏点明显 成熟滋养体类似三日疟原虫但更粗大成熟裂殖体约含6-12个裂殖子 第63页/共89页第六十四页，编辑于星期二：四点 四十七分。第64页/共89页第六十五页，编辑于星期二：四点 四十七分。第65页/共89页第六十六页，编辑于星期二：四点 四十七分。第66页/共89页第六十七页，编辑于星期二：四点 四十七分。18. Recent trip to Southern India- headaches and vaguely unwell. 第6

17、7页/共89页第六十八页，编辑于星期二：四点 四十七分。类型周围血中发育阶段红细胞形态疟原虫形态大小点彩胞浆疟色素裂 殖 子数恶 性 疟原虫环状体配子体正 常 大小茂 氏点小 滋 养 体 纤细 ， 常 见 个 核 ， 一 个红 细 胞 内 常有2个以上的原虫粗 黑 ， 配子 体 中 明显16-32间 日 疟原虫各期滋养体裂殖体配子体涨大,可达 正 常的 1.5-2 倍薛 氏点阿 米 巴 样 滋养 体 ， 浅 蓝色，活泼金棕色不明显12-24卵 形 疟原虫各期均有正 常 大小 或 略涨大, 薛 氏点卵 圆 形 滋 养体 ， 蓝 色 较深，核较大深棕色明显6-12三 日 疟原虫各期均有裂殖体正常或

18、略缩小齐氏点（西门氏）但少见圆 形 ， 蓝 色深 ， 核 紧 缩， 滋 养 体 胞浆呈带状深棕色，粗明显6-12第68页/共89页第六十九页，编辑于星期二：四点 四十七分。第69页/共89页第七十页，编辑于星期二：四点 四十七分。厚血膜中容易被误认为疟原虫的物质 未成熟的网织红细胞溶血后的残影易被误为薛氏点 重叠的血小板易被误为裂殖体 混杂在稀释液中的细菌、植物孢子、酵母、花粉、藻类等很像血液中的多种寄生虫，如血孢子虫等，会干扰对疟原虫的鉴别。第70页/共89页第七十一页，编辑于星期二：四点 四十七分。第71页/共89页第七十二页，编辑于星期二：四点 四十七分。第72页/共89页第七十三页，编辑于星期二：四点 四十七分。第73页/共89页第七十四页，编辑于星期二：四点 四十七分。第74页/共8