评价机体免疫水平主要有哪些免疫学指标

1、评估机体免疫水平主要有哪些免疫学指标？这里要分两大类：一是临床应用学的免疫指标，二是理论研究型的免疫学指标，而临床学应用指标的范围较小，其指标也包括在理论研究型的指标中，即理论研究型不但包括日常医疗应用的指标(临床应用)，也包括了理论研究与教学的指标一，临床应用学的免疫指标：1- 免疫细胞学指标：白细胞，中性粒细胞，淋巴细胞，丁淋巴细胞,NK 细胞，2- 血液学指标:Ig-G,Ig-M,Ig-E,或免疫球蛋白等3- 抗原学指标：(1) 血液免疫学指标：常见有：乙肝两对半中的第一，第三项，(2) 人体各种分泌物中的病原体检查(如淋病双球菌，大便中的寄生虫，大便中的伤寒弧菌的检查，痰中的结核杆菌检

2、查，等等)二，理论研究学的免疫学指标(以上各类其实也是，但理论研究学中，还有更深入的指标，以下只列以上所说之外的)：1- 抗原;即各种微生物的别离，检查，定型；2-免疫球蛋白：Ig-A，Ig-D，再加上以上临床学免疫指标的各项 ；3- 补体系统；4- 细胞免疫学指标：(1) T细胞；(2) B 细胞；(3) NK 细胞；(4) CD 白细胞(以上各种，还有:CD30 以上的系列，5- 体液免疫学指标：(1)以上免疫球蛋白各种；特异性抗体的滴度；(3)补体系统的滴度临床常用免疫学检测：免疫球蛋白检测血清补体检测感染性疾病的免疫学指标肿瘤标志物检测自身免疫性疾病的免疫学指标其他体液免疫指标细胞免疫

3、相关检测免疫球蛋白检测P440-442缺乏特异性诊断价值，主要用于机体体液免疫功能状态的评估 临床检验现状：检验目的内容验方法免疫球蛋白IgA、IgG、IgM疫比浊法IgEIgEn 疫发光血清补体检测P442-443.缺乏特异性诊断意义，主要用于机体体液免疫功能状态的评估。肿瘤标志物检测P458-462肿瘤标志物(tumor marker): P458在肿瘤发生、开展过程中，由肿瘤细胞合成、释放的物质或由机体对肿瘤发生反响而产生的一类物质；与正常组织相比，这些物质在 机体内的含量显著增高；检测这些物质可以反映肿瘤的恶变阶段和肿瘤的基因型。自身免疫性疾病的免疫学指标类风湿因子(rheumatoi

4、d factor, RF)抗核抗体(antinuclear antibody, ANA)组织和细胞抗体其他体液免疫指标抗核抗体抗组蛋白抗体抗脱氧核糖核蛋白(DNP)抗体抗双链 DNA 抗体抗 RNA 抗体抗可提取核抗原(ENA)抗体抗 Sm 抗体抗 RNP 抗体抗 SS-A(Ro)抗体抗 SS-B(La)抗体抗 Scl-70 抗体抗着丝点抗体抗 PM-1 抗体抗 JO-1 抗体抗核仁抗体组织和细胞抗体抗线粒体抗体抗甲状腺球蛋白抗体抗甲状腺微粒体抗体抗乙酰胆碱能受体抗体抗平滑肌抗体其他体液免疫指标循环免疫复合物(IC)冷丙种球蛋白(CG)C 反响蛋白(CRP)细胞免疫相关检测T细胞免疫检测B 细

5、胞免疫检测自然杀伤细胞(NK)免疫检测细胞因子检测T 细胞免疫检测T细胞花环形成试验(ERFT)T细胞分化抗原测定T细胞转化试验B细胞免疫检测B 细胞外表免疫球蛋白测定红细胞-抗体-补体花环试验FcEA-RFC补体受体EAC-RFC小鼠红细胞受体 M-RFCB 细胞分化抗原测定NK 细胞免疫检测活性测定ADCC 测定ELISA 包被蛋白质的原理是什么 ？包被板上的成分有很强的阴离子吸附功能，包被液的PH 为 9.6,可以使被包被的蛋白质为碱性，因此可以牢固吸附在包被孔中酶联免疫吸附 ELISA enzyme linked immunosorbent assay , ELISA IA 。根底：抗

6、原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记，参加酶反响的底 物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，由此进行定性或定量分析。酶联免疫吸附剂测定根本原理是：使抗原或抗体结合到某种固相载体外表，并保持其免疫活性。使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保存其免疫活性，又保存酶的活性。在测定时，把受检标本测定其中的抗体或抗原和酶标抗原或抗体按 不同的步骤与固相载体外表的抗原或抗体起反响。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体 上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。参加酶反响的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产

7、物的量与标本中受检物质的量直接相 关，故可根据颜色反响的深浅刊物定性或定量分析。将抗原或抗体固定在过程称为包被coatingo蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的，靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体外表的疏水基团间的作用。这种物理吸附是非特异性的，受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响。大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团，故更易吸附到固 相载体外表。不易吸附的非蛋白质抗原可用间接包被的抗原经固相抗体的亲和层析作用，包被在固相上的抗原纯度大大提高，因此含杂质较多的抗原 也可采用捕获包被法。 亲和素生物素 即用亲和素先包被载体，参加生物素化的DNA,这种包被方法均匀、

8、牢固，已扩大应用于各种抗原物质的定量测定。脂类物质无法与固相载体结合，可将其在有机溶剂例如乙醇中溶解后参加 ELISA 板孔中，开盖置冰箱过夜或冷风吹干，待酒精挥发后， 让脂质自然干固在固相外表。优点：试验的特异性、敏感性均由此得以改善，重复性亦佳。抗原用量少，仅为直接包被的1/10 乃至于/100。包被用抗原： 天然抗原、重组抗原和合成多肽抗原三大类。 合成多肽抗原是抗原决定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。一般只含有一个抗原决定簇，纯度高，特异性也高，但由于分子量太小，往 往难于直接吸附于固相上。借助于偶联物与固相载体的吸附，间接地结合到固相载体外表。 包被用抗体IgG 对聚苯乙烯有强吸附

9、力，其联结发生在Fc 段上，抗体结合点暴露于外。取材于抗血清或含单克隆抗体的培养液.须除去杂抗体后才能用于 ELISA ,以保证试验的特异性。 包被的条件 pH9.6 碳酸盐缓冲液pH7.2 的磷酸盐缓冲液pH7-8 的 Tris-HCL 缓冲液。参加包被液后，在 4-8C 冰箱中放置过夜，37C 中保温 2 小时。包被浓度随载体和包被物的性质可有很大的变化，每批材料需通过实验与 酶结合物的浓度协调选定。一般蛋白质的包被浓度为10ng/ml-20ug/ml。半抗原 H 连接到载体 OVA 之后免疫机体，机体能否产生针对OVA 的抗体，为什么？答，能够产生针对 OVA 的 Ab。能与对应抗体结合

10、出现抗原-抗体反响、又不能单独激发人或动物体产生抗体的抗原。它只有反响原性，不具免疫原性，又称不完全抗原。大多数多糖和所有的类脂都属于半抗原。如果用化学方法把半抗原与某种纯蛋白的分子载体结合，纯 蛋白会获得新的免疫原性，并能刺冲动物产生相应的抗体。半抗原一旦与纯蛋白结合，就构成该蛋白质的一个抗原簇。一些比一般半抗原分 子量小，但有特异结构的化学活性基团物质如青霉素、磺胺剂等，称为简单半抗原。当简单半抗原进入过敏体质的机体时，能与体内组织蛋白结合，成为完全抗原，这种完全抗原可引起超敏反响。免疫学家们常将二硝基苯、三硝基苯、磷酰胆碱等连接到蛋白质分子上，进行免 疫应答机制的研究。半抗原的定义是能够

11、被TCR 或 BCR 识别，但不能独立诱导免疫应答的物质称半抗原。只有免疫原性而不具有反响原性的半抗原不能称之为半抗原。半抗原-载体效应： 半抗原 H本身没有诱导免疫应答的能力。假设用 OVA 免疫小鼠，得到针对 OVA 的 Ab1,该抗体不能识别 H。但是用与 OVA 偶联的 H免疫小 鼠，所得到的抗体Ab2 能够在体外与半抗原特异地结合。在这种情况下 H 成为 B 细胞表位的一个局部，所以 H 具有了你说的反响原性。又因为，结构决定功能。半抗原是单价的，也就是说，半抗原与对应的抗体分子结合的抗原表位数只有一个。上述例子中，半抗原只被B 细胞识别，而 B 细胞表位具有构象依赖性。半抗原的单价

12、性也就决定了其抗原表位与抗体分子的抗原结合部位在形状上的互补也只有一种形式。所以说不可能有只有免 疫原性而不具反响原性这样的半抗原。哺乳动物包括人类在内的免疫系统是否很完善，为什么？ 答：人类包括动植物的生存法那么是适者生存，漫长的岁月进化造就了生物适应当前环境的要求，哺乳动物的免疫系统是它生存的重要因素， 当然该免疫系统较为完善，能抵抗大多数病菌侵入和自我生长修复。以人为例做一说明，人体的免疫系统像一支精密的军队，24 小时昼夜不停地保护着我们的健康。它是一个了不起的杰作！在任何一秒内，免疫系统都能协调调派不计其数、不同职能的免疫部队从事复杂的任务。它不仅时刻保护我们免受外来入侵物的危害，同

13、时也能预防体内细胞突变引发癌症的威胁。如果没有免疫系统的保护，即使是一粒灰尘就足以让人致命。根据医学研究显示，人体百分之九十以上的疾病与免疫系统失调有关。而人体免疫系统的结构是繁多而复杂的，并不在某一个特定的位置或是器官，相反它是由人体多个器官共同协调运作。骨髓和胸腺是人体主要的淋巴器官，外围的淋巴器官那么包括扁桃体、脾、淋巴结、集合淋巴结与阑尾。这些关卡都是用来防堵入侵的毒素及微生物。当我们喉咙发痒或眼睛流泪时，都是我们的免疫系统在努力工作的信号。长久以来，人们因为盲肠和扁桃体没有明显的功能而选择割除它们，但是最近的研究显示盲肠和扁桃体内有大量的淋巴结，这些结构能够协助免疫系统运作。随着脊椎

14、动物的进化开展，它们的免疫系统变得更为复杂。它除了表现出类似无脊椎动物的自然免疫性的机制之外，还突出地表现出特异性的免疫应答。随着脊椎动物的进化，免疫系统中的淋巴细胞(B 细胞与 T 细胞)，专门的淋巴器官等相继出现，最后表现出一个完整的免疫系统所具有的特异性的体液免疫应答及细胞免疫应答。由此可以看出无脊椎动物和脊椎动物的免疫系统虽然都在细胞和分子水平上表现出 它们各自的免疫应答特性，然而又表现出非常重要的差异。高等的脊椎动物的免疫系统是由分子和细胞水平上的各种各样变异体组成的。在 蛋白分子水平上有免疫球蛋白基因家族的Ig, MHC I, MHC II ,TCR 及其他许多细胞外表分子家族成员

15、。在细胞水平上，有来自多功能干细胞谱系的一系列细胞及细胞亚系，如 B 细胞和 T 细胞及其亚系、粒细胞、单核细胞、巨噬细胞及各种辅助细胞等。这些细胞之间大都有着 特异的协同及制约关系。动物的免疫系统是在动物的系统发生过程中，由低等到高等的进化中而逐步开展和完善的。所以免疫系统的进化是与动物的进化紧密相连的。在无脊椎动物中，没有完整的免疫系统。但在无脊椎动物中有多种多样的免疫防御功能。这些防御功能是通过许多免疫细胞(如吞噬细胞)和免疫分子(如凝集素、溶菌酶、海星因子等 )束实现的。随着动物从无脊椎到脊椎动物的进化。免疫系统的进化也发生了重大的飞跃。突 出表现在：淋巴器官的出现和完善；重要的淋巴细

16、胞T 和 B 细胞的产生与分化；重要的免疫分于Ig家族中的 Ig 及 MHC 的出现及 Ig基因表达多样性的进化。 在脊椎动物从低等到高等的进化近程中这些变化说明免疫系统及免疫功能日臻复杂和完善。 免疫系统进化的压力来自哪儿？为什么？答：免疫系统进化的压力来自于动物的进化，因为免疫系统是极其复杂的。不管低等生物还是高等生物，都存在着宿主对外来人侵者的防御 和修复自身组织损伤的机制。然而在元脊椎动物的成员中表现出来的这种机制是属于自然免疫性，是先天的特性。机体对各种外来的侵染物 的反响没有特异性。反响的效应大多类似于吞噬作用。此外它们还可以通过分泌一些可溶性分子来结合或溶解入浸的微生物。然而随着

17、脊椎 动物的进化开展，它们的免疫系统变得更为复杂。它除了表现出类似无脊椎动物的自然免疫性的机制之外，还突出地表现出特异性的免疫应 答。随着脊椎动物的进化，免疫系统中的淋巴细胞(B 细胞与T细胞)，专门的淋巴器官等相继出现，最后表现出一个完整的免疫系统所具有的特异性的体液免疫应答及细胞免疫应答。由此可以看出无脊椎动物和脊椎动物的免疫系统虽然都在细胞和分子水平上表现出它们各自的免 疫应答特性，然而又表现出非常重要的差异。高等的脊椎动物的免疫系统是由分子和细胞水平上的各种各样变异体组成的。在蛋白分子水平 上有免疫球蛋白基因家族的Ig , MHC I, MHC II ,TCR 及其他许多细胞外表分子家

18、族成员。在细胞水平上，有来自多功能干细胞谱系的一系列细胞及细胞亚系，如 B 细胞和 T 细胞及其亚系、粒细胞、单核细胞、巨噬细胞及各种辅助细胞等。这些细胞之间大都有着特异的协同及 制约关系。(一)、脊椎动物的免疫进化脊推动物与无脊椎动物的比拟，在免疫进化上有了突破性的进展。从低等的无脊椎动物就出现了淋巴样组织。随着免疫系统的进化，淋 巴组织和器官以及各种免疫细胞和分子逐步出现和完善，到哺乳动物免疫系统到达最完善的程度。一、低等脊椎动物的淋巴样组织1.原始的淋巴样组织淋巴系统是产生及储存淋巴细胞及其他血细胞的场所。在最低等脊椎动物无颌类中只有肠系淋巴组织，这种组织在无脊椎动物的纽形动 物和环节动

19、物中也偶而出现过。到有颌类的软骨鱼开始出现原始的胸腺和脾脏，到两栖类开始出现骨髓。在高等脊椎动物中有完善的淋巴组 织和细胞。如骨髓、胸腺、脾脏、淋巴结以及广泛分布的肠系淋巴组织。骨髓在解剖上与其他淋巴器官是分开的；然而在较低等的脊椎动物 中，如鱼类和有尾两栖类等的淋巴组织与髓样组织是混合的。2. 鱼类的淋巴髓样组织在鱼类中虽然有了淋巴髓样组织，但较低等的软骨负类八目鳗中还没有真正的胸腺，只有原始的脾脏。在较高等的真骨鱼中有原始型的肝、脾和肾中有丰富的黑素一巨噬中心。这是鱼类淋巴髓样组织的重要特征。在黑素一巨噬中心里充满大量色素，如血铁黄素(haemosiderir),蜡质(ceroid)，黑素

20、(melanin)以及脂卵丝霉褐素(lipofusin)。有人认为这种黑素一巨噬中心的结构类似高等动物原始类型的发生中心。这种 原始型的发生中心最早发现于鸟类的淋巴样组织中。在鱼类的黑素一巨噬中心里积累的色素可能与脂肪有关，通过脂肪氧化形成脂卵丝霉褐 素。3. 两栖类的淋巴样组织骨髓最早出现在两栖类，而且是在较高等的无尾两栖类。通常用无尾两栖类爪蟾(Xenopus laevis)和美洲豹蛙(Rana piens)作为变温动物有淋巴样组织结构特征的代表。无尾两栖类除淋巴结之外，其他淋巴器官都已出现。这些器官的情况如下：(1) 胸腺：成蛙的胸腺位于皮下，中耳前方。胸腺分皮质和髓质两局部。快速增殖的

21、皮质部淋巴细胞对辐射非常敏感。有证据说明变温动物的胸腺能产生有 T细胞功能的淋巴细胞。 在胸腺的髓部有几种基质细胞。胸腺中还发现肌样细胞 (myoid dells)。这类细胞在哺乳动物和爬行动物 中都有。但在两栖类中只在局部种类中存在。胸腺中的肌样细胞能促进组织液的循环或可能提供自身抗原，以训练T 细胞使其对自身抗原发生耐受性。(2) 脾脏：在所有的有颌类脊椎动物中脾脏是主要的外围淋巴器官。爪蟾的脾脏分为胸腺依赖区和非胸腺依赖区。白髓滤泡中含有B细胞。在前滤泡周围区的 B 细胞外表无 Ig 分子。红髓区开始接收血液循环中带来的物质。后来循环的抗原又被白髓滤泡捕捉。抗原留在大的树突细胞外表。树突

22、细胞从细胞质中伸出伪足穿过介膜，到达T 细胞丰富的边带。整个白髓的排列与哺乳动物的不同。3淋巴结和肠系淋巴组织GALT:两栖动物中无淋巴结，在某些较高等的两栖类中看到淋巴髓样结，但在组织学上与哺乳动物的淋巴结不同淋巴髓样结主要功能是滤血器官。它是在淋巴腔中聚集厂一些淋巴样和髓样纫胞。这类细胞在成蛙中位于颈部和腋下部。肠系淋巴组织最早出现于最低等的脊椎动物无颌类。在两栖类中蛙的肠系淋巴组织类似于哺乳动物的粘膜淋巴组织MALT,它存在于蛙的整个小肠区。GALT 可作为肠中的抗原进入组织细胞的第一道防线。4肾、肝脏和骨髓：肾是鱼类和两栖类的主要淋巴器官。但到了羊膜动物的贤，这种功能便退化。在无后两栖

23、类中.肾和肝在个体发育中是最早出现B细胞的场所。事实上各种脊椎动物的肾都有早期分化的血细胞、淋巴样细胞和韶样细脑。骨髓虽然最早出现于两栖类，但在两栖类中的免疫功能还有待澄清。在美洲豹虹成体中有骨髓淋巴样组织， 但在爪蟾中骨髓就更为原始，股骨的骨髓只是嗜中性粒细胞分化的主要场所。由此可见至少是骨髓的功能在两栖类中还很不完善。二、无脊椎动物与脊椎动物淋巴组织进化的比拟无脊椎动物中除了纽形动物、环节动物有肠系淋巴组织，星虫动物Sipunculid有 NK 细胞外，没有发现元脊椎动物中有淋巴样器官。自然在无脊椎动物中也没有发现抗体分子，没有MHC。在较高等的无脊椎动物中如原素动物，已有 MHC 抗原的

24、某些功能表现，有混合淋巴细胞反响。在脊椎动物中出现了免疫淋巴组织和器官，而且可以看到随着动物的进化这些免疫组织器官也表现出从低等到高等的开展图 12 1。GALT 组织在最低等的脊椎动物中已经出现。到软骨鱼类以后才相继出现胸腺和脾脏，到无尾两栖类出现骨髓。当然这种原始的骨髓组织的 免疫功能还值得研究。在爬行类与鸟类的局部类群中，如蛇和蜥蜴有淋巴结样的组织，有些淋巴结样的组织，但鸡没有。它们有特殊的淋巴 组织，即法氏囊。哺乳动物才出现淋巴结及完整的淋巴系统。三、脊椎动物淋巴细胞和分子的进化与无脊椎动物相比拟，脊椎动物在重要的免疫细胞和分子方面进化有几个突出的特点：从最低等的脊椎动物圆口纲使出现淋

25、巴细胞； 从最低等脊椎动物圆口纲使出现了抗体IgM，随着进化同种异型抗体种类不断增多；在脊椎动物中出现混合淋巴细胞反响和细胞毒性反应，说明 T 细胞的功能在很低等的脊椎动物中便已出现；当脊椎动物开展到高级阶段才出现MHC 分子图 12 2。这些进化过程中出现的分子虽然不一定都是来自共同的祖先，但在脊椎动物进化上总的方向是向最高等最完善的功能开展。1.MHC 的进化主要组织相容性复合体MHC是具有高多态性的。MHC I 类抗原蛋白是由 MHC 基因编码的一条重链及另外染色体上基因编码的6 2微球蛋白组成的，是 CTL 的靶分子。MHCH 类抗原蛋白是由 MHC 基因编码的异源二聚体，表达在 B

26、细胞、吞噬细胞、树突细胞及活化的T细胞上，是 Th 细胞的靶分子见第六章。关于 MHC 的起源有许多假说。其中重要的一种假说认为原始的类似MHC 分子可能是与 MHC II6链类似的同源二聚体。MHCH 的 a 链是后来进化开展而来的。而 MHC I 是在 MHC II a 6 出现之后才出现的。它是由 MHC II a 6 基因之间外显子飘移而产生的。MHC 是在脊椎动物进化到两栖类才开始出现的，但又不是以后各种动物中都相继随着进化而出现图 12 2。在无颌类Agnatha圆口纲的八目鳗Hagfish有混合淋巴细胞反响MLR,从而推断有 MHC 功能的存在。并且认为在八目鳗中有些淋巴样细胞

27、对同种异型的决定簇有诱导增殖的应答作用。在八目鳗的研究中也说明存在着刺激和应答的淋巴细胞群。它具有 Ig +细胞，这主要是一些外周淋巴细胞及应答细胞。但不清楚这些应答细胞是否为依赖于MHC 的 B 细胞的应答。圆口纲动物对组织移植排斥反响很慢，有人认为是缺乏 MHC 成分的表现。在软骨鱼纲和真骨鱼纲中 MHC 的情况还不很清楚。进化到两栖类才肯定了 MHC 的存在。然而 MHC 的结构在两栖类、 鸟类和哺乳类中有很大的差异图 12 3。两栖类 MHC 基因座位为 XLA。MHC I 为单链，相对分子质量 4.0*l04 4.4*104,与其相连接的 6 2 微球蛋白还没有确定。 MHcI至少有

28、 10 个等位基因。MHc H 由 QP 两条链组成。 编码。链的至少有两个基因，编码 6 链的至少有 5 个基因，而且去糖的 6 链比 a 链大，更具酸性。MHCH由 30 个等位基因组成。在蟾赊的蝌蚪中并无 MHC I 表达，这说明 MHC I 对蝌 蚪的免疫系统的形态发生并不是必不可少的。在两栖类中有很强的MLR 和移植排斥反响。在爬行纲中的大鳄鱼Carimans、乌龟Turtles和蛇Snakes都有 MLR,但是否有移植排斥反响还不清楚。在蜥蜴和蛇的研究中已证 明可以进行混合淋巴反响的细胞能促使发生细胞毒作用。蛇的实验证实：混合淋巴细胞反响、急性移植排斥与细胞毒性的发生之间为正相关。

29、这些资料都说明爬行纲确实存在MHC o鸟纲中鸡的 MHC 称为 B 复合物，MHC I 分子的基因座位 BF 编码 4.0*104 4.3*104 的重链，与 1.2*104 的 6 2 微球蛋白以非共价连接。 它们表达在红细胞和白细胞上。分子的局部序列与哺乳动物的MHC I 类分子有同源性。BL 基因座位上的 MHC H 编码 3.0 xl04 的 a 链是只表达在 B 细胞和单核细胞上。而 6 链的 0 16 2及穿膜区与人的 HLA D核酸序列同源性达 62% 66%。此外鸡的 MHC 分子还有第 IV 类 抗原即 BG 分子相对分子质量 3.1*l044.2*l04。BG 分子也是具有

30、高多态性的抗原。BG 只表达在红细胞上，在 MLR 或免疫移植排斥方而似无作用。MHC 在哺乳动物中最为完善，然而在各种哺乳动物又有不同的结构，人和鼠的MHC 详见第六章。2.免疫球蛋白的进化免疫球蛋白作为一类重要的免疫分子是在脊椎动物中才开始出现的。在无脊椎动物中还没有出现过任何免疫球蛋白分子。IgM 是最早出现于低等的园口纲一些动物中的免疫球蛋白同种型。但没有其他同种型的免疫球蛋白的出现。抗体的同种型在各纲进化中有很大变化表 12一 1。在圆口纲中已经有 T、B 细胞异质性的分化，有肠系淋出组织 GALT,没有胸腺和脾脏等淋巴组织，但有合成抗体的能力。这说明它们 能对各种抗原决定簇作出应答

31、。八目鳗和七觥鳗Lamprey都能对羊红细胞、噬菌体、人红细胞等抗原作出应答而产生相应的抗体。这些抗体有重链 H,但没有明确的轻链 L。当使用细菌A.streptococcal作为抗原免疫八目鳗时，产生的抗体主要识别鼠李糖rhamnose。同样抗原免疫哺乳动物产生的抗体主要识别 N 2 烯葡糖胺。另外发现丑婆鱼中的 Ig 分子两条 H 链的相对分子质量并不相等。这说明虽然 IgM在整个脊椎动物各纲都有，但它的分子组成、结构与识别能力并不一样。在有颌类的脊椎动物中IgM 是最为保守的同种型抗体。软骨鱼纲中已开始出现脾和胸腺淋巴组织，这意味着它们在产生抗体应答的能力方面对能有所增强。然而这些抗体的

32、亲和人仍然很低。没有其他的抗体同种型出现。到硬骨鱼纲，IgM 就能形成 4 聚体及 5 聚体。而且多为 5聚体。在鲤鱼的非自交系之间可以看到抗DNP 交叉反响的许多独特型抗体。但还不清楚鱼类中的抗独特型抗体是否与哺乳动物的有相似的异质性。在两柄类的蟾赊中，抗体分子进化的表现是出现了同种型的免疫球蛋白。在 有尾两栖类西美螺Axolotl有 IgY ,在无尾两栖类中有 Ig 重链的 3 种同种型，即 IgM、IgY 和 lgX。其中 IgY 可能类似于哺乳动物的 IgG ; IgX 可能类似与 IgA。它们分布于动物的胃肠系统。无尾两栖类对抗原的反响包括有初应答和再应答。应答反响的速度比鱼类快，在

33、高温下会更 快。爬行纲与两栖纲的情况相似。鸟纲抗体的同种型为IgA 和 IgD。以在血液中含量较低，在胆汁中含量较高。这种 IgA 能与人的 IgA 分泌片特异结合。因此认为鸟纲的IgA 是相当于哺孚 L 动物的 IgA。但是鸟纲的 IgA 多样世与哺乳动物 IgA 的多样性有不同的基因表达方式；鸟纲中的鸡、火鸡和鸟类免疫球蛋白L链的同种型以入链为主。哺乳动物的大鼠，小鼠 Ig 的 L 链的同种型那么以E链同种型为主约占 95% 。而反刍类动物 Ig 的 L 链又以入同种型为主。最原始的无尾两栖类中 L 连的氨基酸序列与哺乳动物E链顺序有 40%60%的同源性，与丫链有 32%36%的同源也脊

34、椎动物免疫球蛋白的合成与同种型的进化在前面表12 1 中已有总结。3.免疫球蛋白基因表达方式的进化1Ig基因的进化：Ig 基因可能是通过两种方式进化的。一是通过多倍体倍增的方式。在染色体分裂失败时，便会发生染色体数加倍。倍增的基因拷贝位于不同的染色体上，彼此之间不连锁。第二种方式可能是串联倍增tadem duplication。在同一染色体上的一段 DNA 发生倍增。倍增的基因拷贝位于原基因附近，与原基因紧密连锁图 12 4。这种倍增的结果会使基因表达的肽链比原来的加长。如此就可能从原始的一个免皮球蛋白基因的功能区，通过串联倍增而产生有多功能区的一条Ig 基因。Ig 基因再特化出一些不同的区域

35、而表达为Ig链的可变区V和恒定区Co V 区基因可能经过屡次多倍体倍增和串联倍增而产生L链的同种型和基因重排而发生的多样性。C区也可能通过串联倍增而产生H链的同种型及 V 区的多样性。但也有些证据说明 Ig 重链同种型是每个链上的功能区独立进化而来的，不是整条链进化的结果。因为在进化过程中选择压力不一致，而表现为恒定区中CH1 - CH4 的保守性不一，其中 CH4 区的保守性最强。2 Ig基因结构与多样性的表达方式的进化： 从 Ig 的重链 VH 区基因结构上看脊椎动物之间的差异很少。 它们都 L 前面的先导序列，CDRl, CDR2,CDR3 以框架 FRl 和 FR2 间隔排列的结构见第三章。只有一个区别是在先与序列的上游近 5端 8 聚体octamer和 TATA 盒序列结 构低等软骨鱼类鲨鱼中不存在。 但 3端的 7 聚体heptamer与 9 聚体monomer在各纲的 IgVH 中都存在。这意味着基因组中 D 和 J 区在各种 之间是保守的图 12 5。虽然上述基因结构区域在脊椎动物之间有保守性，然而这些基因在胚系DNA 上的排列和表达多样性方式在脊椎动物的不同进化阶段上表现出很大差异。软骨鱼中的鲨鱼，Ig 重链基因有数以 100 计的 V、D、J和 C 组成的基因簇，而且除 C 卬之外无同种型。基因重排只发生在簇内而不能在