凝血酶原时间PT测定

1、凝血酶原时间PT测定分析仪器法某某人民医院检验科临检室凝血酶原时间PT 测定分析仪器法编号：版本：1页数:共5页1实验原理：凝固法确定量的血浆50微升样本经一定时间加温后,参加 PT试剂,采用波长660nm的光照射样 本,凝血过程中血浆的混浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定,然后通过标准曲线求 出凝血酶原时间,再通过参数计算得出凝血酶原活动度及INR值.2标本采集2.1早晨空腹采血空腹12小时左右,静脉采血.2.2 3.8 % w/v枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀.3标本存放1小时内3000r/min x 15min别离血浆,室温放置不超过2小时,28 C保存不超过4小时,

2、长时间保存需在冰冻条件下,-70 C不超过6个月,只能冻融1次,在37C迅速解冻,以 减低凝血因子的消耗,解冻后立即测试.4标本运输：低温条件下运输.5标本拒收的标准：抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作测定.6. 实验材料：,-jI'6.1德国DadeBehring Marburg公司凝血酶原测定试剂,每瓶加4ml蒸馏水溶解40人份,未开圭寸 试剂28C贮存到说明书上有效期,复溶试剂 28C保存不超过5天.6.2 Dade Control质控血浆.用蒸馏水1ml溶解后放置30分钟,才能使用或分装.复溶后,室温保 存2小时,28°C 4小时.7. 仪器设备：

3、7.1仪器名称：Sysmex CA-1500全自动血液凝固分析仪7.2仪器厂家：日本Sysmex公司7.3 仪器型号：Sysmex CA-15007.4仪器技术参数：7.4.1速度：最快检测速度180测试/小时,组合检测约140测试/小时7.4.2试剂位:36个,具冷藏功能.7.4.3样本位:50个,可自动连续添加.7.5仪器校准程序：7.5.1校准频率：当方法改变,试剂厂家或试剂型号改变,仪器维修影响测定结果等情况时,必须进 行校准.7.5.2校准操作:设置标准曲线分析由仪器提供商指定工程师执行8. 操作步骤：8.1检查前准备：8.1.1清空废液瓶,清空反响杯抛弃槽.8.1.2添加足够反响杯

4、不能超出警告线.8.1.3添加清洁液试剂,清洗用蒸馏水等.8.2开机先开打印机再开主机,开机后仪器自检,约15分钟,屏幕上方“ Not Ready变为“ Ready , 表示仪器预热完成,进入系统准备工作状态,可进行测定.8.3输入工作清单：I I从主菜单项选择 Wo* List卜出现第一架样本工作清单输入画面,选ID NO Entry |输入第一个样 本号一按相应实验工程名称键 PT,并同时输入此标本的其他测试工程,假设选“凝血四项PT APTT Fbg TT,可按Profile #1|组合选项选择,选中工程相应位置标记为“O ,选完工程后按ENTER确认,要删除某工程时只需按该工程按键如P

5、T二变为 門即可,一用T J键,同样输入其他标本编号工程.快速输入可用Repeat键,输入重复标本数,复制同样 工程的输入.8.4放置样本按8.3所设好的工作清单顺序将离心别离好的样本放置于样本架上,并按顺序把样本架排列 于Sampler进样器右边位置最多同时放5架共50个样本8.5按Start键开始测定.盖好遮光盖,确认仪器为准备状态显示屏正上方显示“ Ready"按Start键,进样开始,测 定进行,仪器显示为“ Analying 被选择工程背景变为“,此时可重复8.3,8.4,继续输 入其他架样本工作清单,按Rigester, |继续确认测试任务,添加样本架继续测试,一测定完成

6、, 测定工程背景变为“,打印机打印出测定结果,所有测定清单完成,系统恢复“ Ready 状态.8.6每日维护：完成每日的测定后,关机前维护.8.6.1 冲冼针 Rinse Probe8.6.2清空废液瓶,和已使用过的反响杯.8.6.3将试剂架连用试剂放入冰箱.8.7关机：先关主机,再关打印机.9 检验结果的判断与分析：9.1仪器测定PT的线性范围在5-600秒,测定完成后仪器显示PT秒数、PT活动度、INR值等参数. 假设不能对参数进行正确计算,将出现以下信息：* . *出现错误,不能得到分析数据-.不能计算参数+ + +. +数值超出线性范围.9.2仪器设定PT参考范围在10-14秒,如果得

7、不到一个正常数值,在数据的左侧将出现以下标记：*出现错误信息< 数据低于可报告的低限> 数据高于可报告的高限10.质量限制：每批样本同时测定两个浓度水平高值和正常值的质控品,以2S为警告限,3S为失 控限,绘制质控图,判断是否在控.质控规那么详见室内质控作业指导书.11临床意义：PT是用于筛查外源性凝血系统U、V、X及口服抗凝药物剂量如华发 令、双香豆素等的检测工程.11.1参考范围：秒数S: 10-14 S 患者结果超过正常对照35以上有临床意义活动度：80-120%国际标准化比值INR: 0.8-1.511.2 PT延长见于先天性凝血因子n>V>W>X缺乏；低

8、无纤维蛋白原血症；获得性见于DIC、原发性纤溶症、维生素 K缺乏、肝病、血循环中有抗凝物质如口 服抗凝剂、肝素.11.3 PT缩短：见于先天性凝血因子 V增多、口服避孕药、高凝状态DIC早期、急性心肌硬塞等、 血栓性疾病脑血栓形成、急性血栓性静脉炎、多发性骨髓瘤、洋地黄中毒、乙醚麻醉后.11.4监测口服抗凝药如华发令、双香豆素等的重要指标.一般要求：PTS: 18-24 S INR : 2.5-3.5,不同疾病不同值.12变异的潜在来源12.1抗凝剂：草酸盐、EDTA肝素不适用于PT检查12.2标本采集处理不当,如血与抗凝剂未充分混匀,出现凝块,混匀时过分用力,使标本溶血,造 成结果变异.12

9、.3纤溶药物的影响,如双香豆素、链激酶、尿酶等.12.4超剂量使用肝素使凝固时间延长.12.5 FDP增加使凝固时间延长.12.6某些药物,如口服避孕药、雌激素、天门冬酰胺酶、钠络酮等影响测试结果.13. 操作考前须知：干粉试剂及质控血浆溶解13.1确认溶剂类型,一般溶解液包括：蒸馏水、生理盐水、缓冲液、厂家特定溶解液,必须按说明书要求使用.13.2溶解时,轻轻转动容器,保证干粉完全溶解,防止剧烈振荡.13.3复溶后,室温放置5-10分钟方可使用.14. 仪器维护与保养 14.1日常维护见8.6 14.2每周维护 14.2.1 液路冲洗：仪器在“ Read?状态下,从主菜单按 Special

10、Men|u按Maintain 按Rinse& Prepare 按Eixecute键运行此程序完成后按Return返回14.2.2清洁仪器：定期用擦布擦干净仪器内外,包括试剂槽14.3需要时维护:14.3.1调整压力：仪器在“ Ready状态下,以主菜单按Special Meni按Maintain按 PressureAdjust键,显示压力是否在其调整范围内？假设不在,那么翻开仪器右侧相应压力调整旋钮, 旋动调整好压力,再锁紧旋钮.14.3.2更换灯泡：关机从仪器右侧取下灯泡外盖及内盖换上好的灯泡装上内外盖从主菜Special Menu再按 Maintain按Calib lamp确认关上遮光盖,按Execute单按运行调整程序14.3.3更换保险