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文档简介
1、家兔离体小肠平滑肌生理特性,实验LI的,1 (通过观察各种因素对离体小肠平滑肌运动的影响,加深对平滑肌生理特性的 了解。2(学习动物离体组织器官灌流的实验方法。,实验原理,消化管、血管、子宫、输尿管、输卵管等均III平滑肌组成。平滑肌除具有肌肉 的一般生理特性外,还具有自动节律性、较大的伸展性及对化学、温度和牵拉刺激 敬感等生理特性。在一定时间内,离体的小肠平滑肌在适宜的环境中仍可保持其生理功能。本实 验将小肠平滑肌置于模拟内环境中,观察当模拟内环境因素发生变化时,离体小肠 平滑肌运动的变化。该实验方法不仅在理论上可以证明平滑肌的生理特性,而且还可用来测定微量 化学物质或药物的生物学特性,被称
2、为生物学检定法。,器械与材料,兔(大口鼠或鸭)、恒温平滑肌浴槽、讣算机生物信号釆集处理系统(或二道生 理记录仪)、张力换能器、哺乳动物手术器械一套、注射器、纱布、棉线、丝线、 万能支架、螺旋夹、双凹夹、温度计、细塑料管(或橡胶管)、长滴管。缝针、培养 皿、台氏液、肾上腺素(1710000) 乙酰胆碱(17100000) > 0. omg/ml阿托品、 0. 01%磷酸组织胺、lmol/LNaOH> lmol/LHCK l%BaC12o 1, CaC12、心得安、阿托 品、自己准备可影响消化的药物。,方法与步骤,1(恒温平滑肌槽的准备首先注水于水浴槽,浸漫度务必超过2支加热管。然 后
3、在药液管及预液管加适量台氏液,二通开关是用于接通预液管和药液管之间的台 氏液,使预液管预温的台氏液通向药液管。恒温仪上的加温旋钮置于所需的温度约 40?(此温度是水浴槽中加热管旁的水温,与药液管内的温度相差2, 3?),为了药液 管内的温度得到准确控制,须采用外加温度计调整。最后打开供氧开关,即可产生 空气气泡供氧,微调旋钮调节使气泡一个接一个不断涌出,不能过快以免液面振动 而影响记录。肌槽的右侧面有与预液管、药液管相通的出液管,用弹簧夹控制出液 量。2(水浴里的水恒温38?,营养管内充满台氏液。要不断供应空气或02,通过可 调节供气旋钮控制气流速度,使气泡一个一个地进入台氏液中。3(用铁锤击
4、兔或大白鼠的头部,昏迷后,立即剖开腹腔,取出十二指肠至结肠 间的肠段,剪成约3,4cm小段,放入室温台氏液内轻轻冲洗,以除去肠的内容 物。边洗边通入空气或02,把肠段夹入另一盛有新鲜台氏液的培养皿内,继续通 气备用。4(将肌肉张力换能器(10g)固定于铁架台上,张力换能器输入端与系统的第1 通道中相连,进入讣算机生物信号采集处理系统,选择“新建实验”中“张力”模 块的生理特性实验项U并对控制面板参数进行设置。5(营养管内的溶液保持37?,然后取出一小段肠,用缝针将肠的一端穿线结扎 (只结扎半边肠腔)。肠的一端结扎线系于带夹的固定支架底端S形小钩上,将支 架放入营养管内并固定于管边缘。肠的另一端
5、则连于张力换能器的应力臂上。使肠 段完全浸浴在台氏液中,并立即通气。让肠段稳定20min,便可以描记其活动曲 线。6(实验项口(1)观察、记录38?台氏液中的肠段节律性收缩曲线。(2) 观察、记录25?台氏液中的肠段节律性收缩曲线。(3) 待中央标本槽内的台氏液的温度稳定在38?后,加1:10000肾上腺素1,2滴 于中央标本槽中,观察肠段收缩曲线的改变。在观察到明显的作用后,用预先准备好 的新鲜38?台氏液冲洗三次。(4) 待肠段活动恢复正常后,再加1:10000乙酰胆碱1, 2滴于中央标本槽中, 观察肠段收缩曲线的改变。作用出现后同上法冲洗肠段。(5) 向中央标本槽内加入1 mol?L-l
6、NaOH溶液1, 2滴,观察肠段收缩曲线的改 变。作用出现后同上法冲洗肠段。(6) 向中央标本槽内加入1 mol?L-lHCl溶液1,2滴,观察肠段收缩曲线的改 变。待作用出现后同上法冲洗肠段。(7) 向中央标本槽内加入l%CaC12溶液2, 3滴或l%BaC12 23滴,观察肠段收 缩曲线的改变。(8) 0.01%磷酸组织胺12滴,观察肠段收缩曲线的改变。待作用出现后同上 法冲洗肠段。(9) 参照以上方法,这里可以加入自己设计提出的药物,观察肠段收缩曲线的 改变。(10) 在换上新鲜台氏液,肠段恢复节律收缩的基础上,加入乙酰胆碱3滴,使 引起明显效应,再加入0. 5mg./ml阿托品34滴,观察加入阿托品后肠段运动的 变化。进行这项试验后,需要多次冲洗,肠段才慢慢恢复活动。,实验结果,剪贴实验记录曲线,并做好标记、注释。分析各种因素对小肠运动的影响,并 简要说明其机制。,注意事项,1(每次加药前,必须在预液管内准备好更换用的38?台氏液。2(药液管内台氏液的量必需没过肠段,并保持药液管恒温为38?,以免影响肠 平滑肌的收缩功能以及对药物的反应不稳定。3(各药液加入的量为参考数据,效果不明显可补加,但不可一次过多,以免引 起不可逆
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