适配体技术与恶性肿瘤的诊断治疗

1、适配体技术与恶性肿瘤的诊断、治疗恶性肿瘤是起源于遗传和随后的分子水平的突变和改变的 一类疾病，是全球死亡的主要原因之一，如果能早期发现，其治 愈率可达65%Z上。因此，早发现、早诊断成为了治疗关键。1恶性肿瘤现状2008年统计调查显示，全球共有 1270万例癌症病例和760 万例癌症相关死亡病例。2010年新发病例*-*例，死亡569, 490例。由于癌前期和癌症早期阶段，肿瘤细胞数量少，无特异 的分子标志物，所以检出率低，早期诊断受到限制。因此，寻找 特异性强、便于早期诊断的恶性肿瘤分子标志物成为研究热点。 适配体因特异性高、亲和力强，引起了广泛关注。2 SELEX技术与适配体2.1 SEL

2、E域术1990年，Tuerk和Ellington两位科学家几乎同时各自创立 了指数富集配体系统进化(systematic evolution of ligands byexponential eichment , SELEX 技术，即 SELEXfe术。该技术是 一种能获取与靶分子高选择、高亲和力结合的寡核甘酸的筛选技 术，制备出的产物被称为适配体( aptamers)。1998年，Morris 和Jensen首先使用人类红细胞膜作为复合混合物靶标，通过基 于细胞的SELEX方法（细胞SELEX选择适配体，该方法提供了 一种体外实验方案，用于分离高亲和性适配体， 特别是复合混合 物的潜在靶标。

3、与其他SELEX法不同，细胞SELEXK术针对整 个细胞选择适配体，因此细胞表面上的分子靶标处于其天然状态， 并且表示其天然折叠结构。其不仅可以产生能够以非常高的亲和 力和特异性识别这些独特特征的适配体，而且能够容易地发现癌 细胞的分子特征。2.2 适配体适配体是小单链（ss） DNA或RNA寡核甘酸（分子量为5- 40kDa）,由于各种分子内相互作用而折叠成独特的三维（3D）结构。适配体与靶分子凭借彼此互补的立体结构，相互结合形成牢固稳定的化合物，类似于介导抗体-抗原识别和复合物形成的构 象识别，适配体通过范德华力，氢键，静电相互作用，平坦部分 的堆叠和形状互补性使得其能高特异性和亲和性结合

4、同源靶标， 解离常数甚至达到 nmol/Lpmol/L ,可以辨别出靶分子在结构 上的细小差别。3适配体在恶性肿瘤诊断和治疗中的应用3.1 适配体在恶性肿瘤诊断中的应用2000年，Hicke等创造了 护送适配子”这一术语，并证明适 配体可能被用作提供治疗和诊断试剂的工具。使用细胞SELEXK术，上官等鉴定了靶向T细胞急性淋巴细胞白血病细胞系 CCRF-CEM的DNA适配体，用于急性淋巴细胞 白血病诊断。选择的适配体sgc8c可以在真正的临床标本中特异 性识别人骨髓抽吸物中的白血病细胞。因此，sgc8c在开发用于恶性肿瘤诊断的特异性分子探针方面具有很大的前景。2010年，Sefah等开发了一组

5、DNA适配体，通过细胞 SELEX寸结肠直肠 癌培养的细胞系DLD-1和HCT 116进行筛选。所选择的适配体 具有高亲和力和选择性，以鉴定与结肠直肠癌相关的特异性生物 标志物。人类表皮生长因子受体 2 (HER2)的过度表达与许多恶 性肿瘤有关，包括卵巢癌，肺癌，胃癌和口腔癌。因此，监测HER2 表达有利于恶性肿瘤的早期诊断。Javed等人开发了一种新的体 外测定法，以检测 HER2蛋白。该方法基于碳纳米管(CNT)包 裹的抗HER2 ssDNA适配体的亲和解离。3.2 适配体在恶性肿瘤治疗中的应用通过细胞SELEX技术生成的适配体可以在没有其分子特征 的知识的情况下特异性识别细胞表面生物标

6、志物。因此，适配体也可以作为药物有效载体或适配体功能化的纳米颗粒，帮助药物释放到可以实现药物靶向递送的特定靶区域。Lupold等人使用纯化的蛋白质作为靶标，并鉴定出可以识 别PSMA细胞外结构域的适配体 A10o止匕外，已经报道了基于适 配体的包括化疗药物如阿霉素，多西他赛，柔红霉素和顺钳的药物，诸如gelonin等毒素和各种光动力治疗剂以及各种小干扰RNA的药物。迄今为止，在临床试验中对不同类型恶性肿瘤的治疗评估了几种适配体。Pegaptanib (Pfizer / Eyetech)是靶向VEGF 的适配体，已被FDA批准用于临床治疗 AMD。最常用于恶性肿瘤治疗的研究适应症是 AS1411。AS1411是一种未经修饰的富含鸟氨酸